張思雅+何敬琦

摘要：目的：采用高效液相色譜法建立蘭索拉唑含量測定方法。方法：AlltimaTM C18（4.6mm×250mm，5μm）為色譜柱；流動相為甲醇-水-三乙胺-磷酸（600：400：5：1.5）[用磷酸溶液（1→10）調節(jié)PH值至7.3]；檢測波長為284nm；流速為1.0ml/min。結果：本方法加樣回收率測定平均回收率為100.08%，RSD為0.42%（n=6）。準確度試驗符合測定要求。蘭索拉唑濃度在0.09mg/ml～0.21mg/ml范圍內，具有良好的線性關系。重復性、中間精密度、進樣精密度試驗均符合方法學試驗要求。供試品溶液在室溫條件下5小時內穩(wěn)定。結論：該方法簡便、快速、準確、重復性好，可有效控制注射用蘭索拉唑的含量。

關鍵詞：高效液相色譜法 蘭索拉唑 含量測定

中圖分類號：O657 文獻標識碼：A 文章編號：1672-3791（2015）02（b）-0000-00

蘭索拉唑為苯并咪唑衍生物，為繼奧美拉唑之后的新一代的質子泵抑制劑，能有效地抑制胃酸分泌，治療胃酸相關性疾病。國外大量臨床應用證明，蘭索拉唑對消化性潰瘍有很好的療效，由血液吸收入壁細胞后作用于壁細胞質子泵即抑制H+/K+-ATP酶的活性，從而持續(xù)抑制胃酸分泌。

蘭索拉唑不耐酸，目前比較普遍給藥方式為口服的蘭索拉唑腸溶片和腸溶膠囊，起效較慢，而改變給藥途徑為靜脈給藥的注射用蘭索拉唑提高了蘭索拉唑的生物利用度，縮短了起效時間。為保證產品質量，我們擬用高效液相色譜法對其含量測定方法進行研究。

1 儀器與試藥

Agilent 1260高效液相色譜儀；AlltimaTM C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；MS105型精密電子天平（梅特勒）；蘭索拉唑對照品（批號：100709-201304，含量為99.8%，中國食品藥品檢定研究院）；注射用蘭索拉唑（30mg，以C16H14F3N3O2S計，自制）；甲醇、三乙胺、磷酸均為色譜純，水為注射用水。

2 含量測定方法

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，AlltimaTM C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動相：甲醇-水-三乙胺-磷酸（600：400：5：1.5）[用磷酸溶液（1→10）調節(jié)PH值至7.3]，檢測波長為284nm；流速為1.0ml/min；柱溫30℃；進樣量20μl。調節(jié)流動相比例使蘭索拉唑峰的保留時間約為16分鐘。

2.2 測定法

精密稱定樣品，約含蘭索拉唑15mg，置100ml容量瓶中，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液5ml與甲醇-水（60：40）溶液適量，超聲使溶解，用甲醇-水（60：40）溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取蘭索拉唑對照品，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。

3 方法學試驗

3.1 準確度試驗

按照制劑處方，分別稱取18mg、15mg、12mg的蘭索拉唑對照品各3份，分別加入處方量的輔料于同一100ml容量瓶中，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液5ml與甲醇-水（60：40）溶液適量，超聲使溶解，用甲醇-水（60：40）溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，續(xù)濾液分別作為測定濃度120%、100%、80%的供試品溶液，按外標法以峰面積計算測得量和回收率，試驗結果見表1。

表1 準確度試驗結果

加入量（mg）

測得量（mg）

加樣回收率（%）

平均回收率（%）

RSD（%）

18.01

18.07

100.33

100.08

0.42

18.03

17.99

99.78

18.10

18.08

99.89

15.02

15.01

99.93

15.04

15.06

100.13

15.08

15.16

100.53

12.02

12.12

100.83

12.01

11.95

99.50

12.05

12.03

99.83

結果表明：含量測定平均回收率為100.08%，RSD為0.42%，準確度試驗符合測定要求。

3.2 線性范圍試驗

儲備液的制備：稱取蘭索拉唑對照品15mg，置50ml容量瓶中，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液5ml與甲醇-水（60：40）溶液適量，超聲使溶解，用甲醇-水（60：40）溶液稀釋至刻度，作為儲備液。

精密量取上述溶液3ml、4ml、5ml、6ml、7ml，分別置10ml容量瓶中，加甲醇水（60：40）溶液稀釋至刻度，作為線性試驗溶液。分別精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以蘭索拉唑濃度與相應峰面積計算線性回歸方程，y=13263x-368.8，相關系數r=0.9994。結果表明，蘭索拉唑濃度在0.09mg/ml～0.21mg/ml范圍內，具有良好的線性關系。

3.3 重復性試驗

取供試品，照含量測定項下方法試驗，重復測定6次，計算其平均值。

結果表明：6次測定的平均含量為標示量的101.98%，RSD為0.21%，平行性好，重復性試驗符合測定要求。

3.4 溶液穩(wěn)定性試驗

取供試品，照含量測定項下方法試驗，每隔1小時測定一次，共測定5次，計算其平均值。

結果表明：蘭索拉唑平均含量為標示量的101.44%，RSD為0.36%，供試品溶液在室溫條件下5小時內穩(wěn)定。

3.5 進樣精密度試驗

取供試品溶液，精密量取20μl，注入液相色譜儀，連續(xù)進樣6次。

結果表明：蘭索拉唑平均峰面積為11891.5，RSD為0.56%，該方法進樣精密度良好。

3.6 中間精密度試驗

取供試品，照含量測定項下方法試驗，變動因素為不同日期，不同人員。計算其平均值。

結果表明：蘭索拉唑平均含量為標示量的101.48%，RSD為0.41%，該測定方法中間精密度良好。

4 樣品含量測定

取三批供試品，照含量測定方法分別進行測定。結果表明：三批供試品含量均為98.0%～102.0%之間。

5 討論

建立的高效液相色譜法通過準確度試驗、線性范圍試驗、重復性試驗、溶液穩(wěn)定性試驗、進樣精密度試驗及中間精密度試驗等方法學試驗，表明該含量測定方法具有準確、可靠、靈敏度高等特點，可有效控制注射用蘭索拉唑的含量。

參考文獻

[1]蘭索拉唑質量標準 中國藥典2010年版第一增補本 281.

[2]楊艷等. HPLC測定注射用蘭索拉唑中蘭索拉唑的含量和有關物質. 中國藥學雜志[J]. 2006.4.41（7），538-540.

[3]郭水柱等. HPLC測定注射用蘭索拉唑中蘭索拉唑的含量. 中醫(yī)臨床研究[J]. 2014.6.17， 137-140.