沈睿，李婉怡，張莉莉，劉永立(浙江大學農(nóng)業(yè)與生物技術學院，浙江杭州310058)

花葉開唇蘭(Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl)是蘭科花葉蘭屬多年生植物，為陸生蘭，又名金線蓮(通稱)、金錢草、鳥人參。金線蓮性喜涼爽、蔭濕［1］，在我國主要分布于亞熱帶地區(qū)，即福建、廣東、廣西、浙江、江西、海南、云南、四川、貴州以及西藏南部等省區(qū)。金線蓮是我國傳統(tǒng)的珍貴藥材，可全草入藥，味甘微苦、性平微寒，具有清熱解毒、潤肺止咳和祛風利濕等功效，因此受到醫(yī)藥行業(yè)的廣泛重視。目前金線蓮的人工繁殖主要是靠組織培養(yǎng)育苗后進行大田移栽，金線蓮的組織培養(yǎng)已有報道［2－4］，然而如何高效且節(jié)能地進行擴繁金線蓮是值得進一步探討的課題。該研究以福建金線蓮為材料，研究了基本培養(yǎng)基、植物生長調節(jié)劑以及光照對其繁殖的影響，為金線蓮快繁技術體系的優(yōu)化和生產(chǎn)應用提供了參考。

1 材料與方法

取自實驗室原有的金線蓮組培苗的幼嫩帶腋芽莖段為外植體材料，該材料為福建品種?；九囵B(yǎng)基為改良MS培養(yǎng)基(硝酸銨減半)和1/2MS培養(yǎng)基(大量元素減半)，添加不同濃度的萘乙酸(NAA)和6-BA，pH調整為5.8，在121℃下滅菌20 min。培養(yǎng)條件為溫度(25±2)℃、光照3 000 lx、時間12 h/d、環(huán)境濕度60% ～80%。

表1 不同植物生長調節(jié)劑對金線蓮增殖培養(yǎng)的影響

2 結果與分析

2.1 不同植物生長調節(jié)劑對金線蓮增殖的影響 由表1可見，培養(yǎng)基中沒有添加6-BA時，NAA的濃度對金線蓮芽數(shù)增殖的影響不大，隨著6-BA添加濃度的增加，金線蓮芽數(shù)增殖數(shù)量也隨之增加;芽數(shù)在第8組(改良MS培養(yǎng)基+NAA 0.4 mg/L+6-BA 1 mg/L)最多，即6-BA的濃度在1 mg/L時最佳，超過1 mg/L時，效果反而下降。不論6-BA的濃度變化，株高總是隨NAA的濃度(在0～0.4 mg/L濃度范圍內(nèi))增大而增高，隨6-BA濃度(在0～8 mg/L范圍內(nèi))增大而增大(表1)，在NAA 0.4 mg/L+6-BA 8 mg/L添加區(qū)為最高。只有在不添加6-BA時才生根。生根數(shù)隨NAA濃度(在0～0.4 mg/L濃度范圍內(nèi))增大而增多。

2.2 不同光照條件對金線蓮增殖和生長的影響 從表2可看出，不同光照條件對金線蓮增殖芽數(shù)沒有顯著影響，但株高明顯增加，節(jié)間顯著加長，植株白化細長呈現(xiàn)徒長狀態(tài)，特別有利于進一步切割繁殖。在遮光條件下，節(jié)約能源，組培室溫度也極易控制。

表2 不同光照條件對金線蓮增殖和生長的影響

2.3 不同培養(yǎng)基和植物生長調節(jié)劑對金線蓮生根培養(yǎng)的影響 從表3可以看出，改良MS培養(yǎng)基與1/2MS培養(yǎng)基相比，無論生根數(shù)還是根長均相對較好，生根數(shù)是改良MS培養(yǎng)基 +IBA 0.4 mg/L 最佳，根長是改良MS+NAA 0.2 mg/L;在該試驗中，IBA和NAA對金線蓮的生根均有較好的作用，二者無大差異。經(jīng)過馴化的金線蓮組培苗，移栽到以草炭為基質的營養(yǎng)缽中，1個月以后生長旺盛。

表3 不同培養(yǎng)基、植物生長調節(jié)劑對金線蓮生根培養(yǎng)的影響

3 總結

該試驗以金線蓮無菌苗為研究材料，建立起一條金線蓮的快速繁殖途徑。用改良MS培養(yǎng)基，添加不同濃度的NAA和6-BA，得出最佳的增殖培養(yǎng)配方為改良MS培養(yǎng)基+NAA 0.4 mg/L+6-BA 1 mg/L。

生根試驗中，用改良MS培養(yǎng)基和1/2MS培養(yǎng)基，用不同濃度的NAA和IBA，培養(yǎng)無菌苗，統(tǒng)計生根數(shù)和根長。生根數(shù)是改良MS培養(yǎng)基+IBA 0.4 mg/L最佳，而根長是改良MS培養(yǎng)基+NAA 0.2 mg/L，但兩者差異不大。

［1］陳泳和，饒寶蓉，江文清，等.武夷山金線蓮特征特性及林下栽培技術［J］.福建農(nóng)業(yè)科技，2013(12):32 －34.

［2］范子南，肖華山，范曉紅，等.金線蓮的組織培養(yǎng)研究［J］.福建師范大學學報:自然科學版，1997，13(2):82 －87.

［3］李秀軍，陳穗云，王玉梅，等.臺灣金線蓮的組培快繁研究［J］.青海師范大學學報:自然科學版，2004(3):91－93.

［4］韓曉紅，王春龍，段春紅，等.不同激素水平對金線蓮組織培養(yǎng)的影響［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學，2012(18):94－98.