高 武

(國藥集團精方(安徽)藥業(yè)股份有限公司，安徽宣城 242000)

尼美舒利是磺酰苯胺的衍生物，屬于非甾體類解熱鎮(zhèn)痛藥(NSAIDs)，是環(huán)氧化酶-2(Cyclooxygenase-2，COX-2)選擇性抑制劑，其作用機制為抑制合成前列腺素所需的環(huán)氧化酶(COX)，從而發(fā)揮強大的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎作用。其化學名為4-硝基-2-苯氧基甲烷磺酰苯胺，由美國 Piker公司開發(fā)研制［1-2］，并于1985年首次在意大利上市，目前已在50多個國家使用廣泛使用，2005年名列世界抗炎藥銷售量的前5名，尼美舒利雖然銷售量大，但相關不良反應報告也時有報道［3-6］。尼美舒利劑型較多，相關研究也見報道［7-10］。尼美舒利原料藥收載于2010年中國藥典二部，含量測定為電位滴定［11］，而尼美舒利顆粒標準收載于衛(wèi)生部新藥轉正標準第三十冊，含量測定為紫外分光光度法［12］。但因制劑中相關輔料對其測定有一定的影響，故本試驗采用高效液相色譜儀測定尼美舒利的含量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent-1200型高效液相色譜儀;自動進樣器;紫外檢測器;Agilent HC-C18色譜柱(4.6 mm×250 mm，5μm);Mettler AG 163電子天平;JL-120DT超聲儀等。

1.2 試藥 乙腈、磷酸二氫銨均為色譜純;水為重蒸餾水;尼美舒利顆粒(安徽精方藥業(yè)股份有限公司，批號:120801、120802、120904、121006);尼美舒利標準品購自中國食品藥品檢定研究院(100555-201202)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱Agilent HC-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm);乙腈—1.15 g·L-1磷酸二氫銨溶液(氨水調(diào) pH至7.0)(40∶60);檢測波長為230 nm;流速 1.0 mL·min-1;柱溫為 30℃;進樣量20 μL。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取105℃干燥2 h的尼美舒利對照品12.52 mg，置50 mL量瓶中，加60%乙腈稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取尼美舒利顆粒，研細，精密稱取本品細粉適量(約相當于尼美舒利12.5 mg)，置于50 mL的容量瓶中，加60%乙腈振搖使溶解，稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液5 mL置25 mL量瓶，用60%乙腈稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.4 測定法 分別取對照品溶液與供試品溶液于色譜用的測試瓶中，精密量取20μL注入液相色譜儀，用上述色譜條件測定，即得，色譜圖見圖1。

2.5 線性關系考察 分別取尼美舒利對照品溶液1、2、3、5、10 mL，置 25 mL 量瓶中，加60%乙腈稀釋至刻度，搖勻。濃度分別為:10.04、20.08、30.12、50.2、100.4 mg·L-1，在上述色譜條件下，分別進樣20μL分析，記錄色譜圖。樣品峰面積分別為:160 393.740 4、320 772.618 8、481 183.722 5、801 951.985 5 、1 603 894.871 7 以樣品峰面積(A)對濃度(C，mg·L-1)進行線性回歸分析，得回歸方程為:Y=15 975X+4.7241(r=0.999 9)，結果表明尼美舒利在10.04 ～100.4 mg·L-1濃度范圍內(nèi)，呈現(xiàn)良好的線性關系。

2.6 精密度試驗 精密吸取同一種尼美舒利對照品溶液，重復進樣6次，測定尼美舒利的峰面積積分值，峰面積分別為 481 107.2088、481 106.6025、481 105.6754、481 106.4883、481 106.7432 其相對標準偏差 RSD=0.56%。實驗結果表明精密度較好。

2.7 重復性試驗 按“2.3”項下方法制備供試品溶液5份，精密進樣20μL進行測定，峰面積分別為:27 165.5355、27 166.5066、27 167.7498、27 165.0724、27 167.5482，RSD 為 1.2%，表明樣品溶液的重復性良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液(批號121006)，分別于0、2、4、8、12、24 h 進樣，測定尼美舒利的峰面積積分值，峰面積分別為27 165.5355、27 166.3222、27 167.7498、27 165.4788、27 167.5482，其相對標準偏差RSD=1.1%。實驗結果表明供試品溶液在24 h穩(wěn)定。

2.9 回收率試驗 取已知含量的尼美舒利顆粒，研細，分別精密稱取本品細粉適量(約相當于尼美舒利6.25 mg)6份，置于50 mL的容量瓶中，分別加入125.2 mg·L-1尼美舒利對照品溶液1 mL，按上述供試品溶液制備，按樣品含量測定方法測定，計算回收率。結果見表1，平均回收率為98.22%，RSD 為0.83%。

表1 回收率試驗結果(n=6)

2.10 樣品含量測定 取尼美舒利顆粒四批樣，按上述供試品溶液的制備方法制備，精密取20μL供試品溶液，注入液相色譜儀中，同法測定，結果見表2。

3 討論

3.1 波長的選擇 取尼美舒利對照品溶液，在200～400nm范圍內(nèi)進行掃描，測得在230nm處有最大吸收，與藥典中尼美舒利有關物質的測定波長一致，故選本實驗的測定波長為230 nm。

3.2 流動相的選擇 在先前的預試驗中，分別采用不同比例甲醇—水，乙腈-水及離子對試劑等作為流動相，發(fā)現(xiàn)乙腈—1.15 g·L-1磷酸二氫銨溶液(氨水調(diào)pH至7.0)(40∶60)為流動相，分離效果良好，保留時間、對稱因子及理論塔板數(shù)均能達到理想效果。

本試驗采用HPLC法對尼美舒利顆粒中的含量，該方法操作簡單、專屬性強、靈敏度高、重現(xiàn)性好，因此，該方法可作為尼美舒利質量標準提供作參考。

表2 尼美舒利顆粒含量測定結果

［1］王延龍.尼美舒利的藥理作用與臨床應用［J］.中國當代醫(yī)學，2006(5):51-52

［2］岑彥艷，覃容欣，李小麗，等.尼美舒利解熱鎮(zhèn)痛抗炎作用比較研究［J］.中國現(xiàn)代應用藥學，2014，31(8):933-938.

［3］高冬虹.尼美舒利致不良反應中文文獻分析［J］.藥物流行病學雜志，2012，21(5):234-236.

［4］劉毅清，陸 敏.尼美舒利致不良反應247例分析［J］.中國藥房，2014，25(4):363-365.

［5］金 星，崔紅花，陶曙紅，尹永芹.尼美舒利的臨床應用及其不良反應［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2012，12(25):4995-4997.

［6］梁 毅，李 林，曾力楠，張伶俐.兒童口服尼美舒利安全性的系統(tǒng)評價［J］.中國循證兒科雜志，2011，6(3):173-182.

［7］王 發(fā)，王 莉，王嫦鶴，等.頂空毛細管氣相色譜法測定尼美舒利原料藥的溶劑殘留量［J］.安徽醫(yī)藥，2014，18(12):2260-2262.

［8］韋翠玲，王麗華.尼美舒利干混懸劑含量測定方法研究［J］.中國醫(yī)藥指南，2012，10(2):83-84.

［9］張 輝.尼美舒利膠囊劑的制備和質量控制［J］.中國醫(yī)院藥學雜志，2012，32(5):393-395.

［10］袁 園，張 莉，張金安，郭均平.溫敏凝膠中尼美舒利含量測定及穩(wěn)定性研究［J］.中國藥師，2014(12):2033-2036.

［11］國家藥典委員會.中國藥典:(二部)［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:225-226.

［12］衛(wèi)生部.國家藥品標準.化學藥品地方標準上升國家標準［S］.第30 冊.WS1-(X-068)-2002Z.