·實驗研究·

通信作者：陳真,女，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：生化藥理，Tel:025-86214045,E-mail:czcpu@163.com

熱淋清顆粒的一般藥理學(xué)研究

潘梅1，唐靖雯1，陳真2，趙勇2，萬億2，李智2，張麗艷3

(1.貴州威門藥業(yè)股份有限公司，貴州 貴陽 550018；2.中國藥科大學(xué)藥學(xué)院，江蘇 南京 210009；

3.貴陽中醫(yī)學(xué)院，貴州 貴陽 550002)

摘要：目的觀察熱淋清顆粒對麻醉犬心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)及小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響。方法十二指腸給予熱淋清顆粒，記錄戊巴比妥鈉麻醉后雜種犬生理、心電圖；觀察熱淋清顆粒對小鼠自發(fā)活動、機(jī)能協(xié)調(diào)功能和閾下戊巴比妥鈉催眠作用的影響。結(jié)果十二指腸給藥熱淋清顆粒(15.43、7.72 g原生藥/kg)對麻醉犬心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)無明顯影響；灌胃熱淋清顆粒(114.3、57.2 g原生藥/kg)在給藥30 min時對小鼠的自由活動有一定的抑制作用，對小鼠的機(jī)能協(xié)調(diào)功能和與閾下戊巴比妥鈉協(xié)同催眠作用均無顯著影響。結(jié)論熱淋清顆粒對麻醉犬心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)及小鼠神經(jīng)系統(tǒng)無明顯影響。

關(guān)鍵詞：熱淋清顆粒；一般藥理學(xué)；狗；小鼠

基金項目：國家科技支撐計劃項目(No.2013BAI11B00);貴州省重大專項基金資助項目(No.黔科合重大專項字[2011]0019-02號);貴陽市重大專項項目(No.筑科合同[2011401]社6-2號)

作者簡介：潘梅，女，高級工程師，研究方向：新藥、保健食品研發(fā)及質(zhì)量控制,E-mail:896221375@qq.com

中圖分類號：R285文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

General pharmacology studies of Relinqing Granules

PANMei1，TANGJing-wen1，CHENZhen2，ZHAOYong2，WANYi2，LIZhi2，ZHANGLi-yan3

(1.GuizhouWarmenPharmaceuticalCo.,Ltd.,Guiyang550018，China； 2.CollegeofPharmacy，

ChinaPharmaceuticalUniversity,Nanjing210009，China;3.GuiyangCollegeofTraditional

ChineseMedicine,Guiyang550002,China)

Abstract：ObjectiveTo observe the effects of Relinqing Granules in cardiovascular system and respiratory system in anesthetic dogs and nervous system in mice.MethodsAfter duodenal administration of Relinqing Granules,physiology,ecg of pentobarbital sodium anesthesia mongrel dogs were recorded;The effects of Relinqing on spontaneous activity,function coordination function and subthreshold hypnotic effect of pentobarbital sodium in mice were abserved.ResultsDuodenal dosing Relinqing Granules of anesthetic dogs did not significantly affect the cardiovascular system and respiratory system;Lavage thermal spray clear particles in 30 min dosing had certain inhibitory effect on free activity of mice,the mice of functional coordination function and with pentobarbital sodium under threshold hypnotic effect had no significant influence.ConclusionRelinqing Granules in anesthetic dogs cardiovascular system and respiratory system and did not affect the nervous system in mice.

Key words:Relinqing Granules;General pharmacology;Dog;Mouse

熱淋清顆粒是以貴州特色苗藥頭花蓼為原料制備而成的單方制劑,具有清熱瀉火，利尿通淋的功效；用于下焦?jié)駸崴碌臒崃?，癥見尿頻、尿急、尿痛、尿路感染、腎盂腎炎見上述證候者[1～4]。為了進(jìn)一步明確其安全性，本實驗參考《中藥、天然藥物一般藥理學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》相關(guān)技術(shù)要求，觀察了熱淋清顆粒對麻醉犬血壓、心率、心律、心電、呼吸及小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響，為其在臨床上的應(yīng)用提供了更為詳實的安全性評價實驗數(shù)據(jù)。

1材料與方法

1.1藥物

1.1.1受試藥物熱淋清顆粒原料浸膏粉(每克浸膏粉樣品相當(dāng)于原生藥11.43 g，貴州威門藥業(yè)股份有限公司，批號：2005052)；受試藥物臨用前用蒸餾水配成所需濃度2.86、1.43、0.72 g原生藥/mL(即250、125、62.5 mg浸膏粉/mL)供小鼠實驗用；配成7.72、3.86、1.93 g原生藥/mL(即675、337.5、168.75 mg浸膏粉/mL)供犬實驗用。

1.1.2對照藥物鹽酸氯丙嗪注射液(25 mg·mL-1，上海禾豐制藥廠，批號：000701)；安定片(2.5 mg/片，江蘇濟(jì)川制藥有限公司，批號：030208)。

1.2動物雜種犬24只，體重8～12 kg，雌雄兼用，由中國藥科大學(xué)動物房提供，合格證號：SCXK(蘇)2002-0001；小白鼠，ICR種，體重18～22 g，清潔級，由南京醫(yī)科大學(xué)動物中心提供，合格證號：SCXK(蘇)2002-0031。

1.3儀器LMS-2B型二導(dǎo)生理記錄儀；壓力換能器；JZ100型肌肉張力換能器；針型電極；XZ-4小鼠自由活動計數(shù)器(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所)。

1.4方法

1.4.1熱淋清顆粒對麻醉犬心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響[6～8]雜種犬24只，雌雄兼用，隨機(jī)分成4組，每組6只，實驗前靜脈注射3%戊巴比妥鈉30 mg·kg-1，麻醉，將充有肝素生理鹽水的聚乙烯管插入左頸總動脈，通過壓力換能器接LMS-2B型二導(dǎo)生理記錄儀，用以記錄血壓曲線，量取主動脈收縮壓(SAP)、舒張壓(DAP)的高度，由定標(biāo)計算平均壓(MAP)及SAP、DAP。十二指腸插管供給藥用；在犬劍突連線于JZ100型肌肉張力換能器，再接于LMS-2B型二導(dǎo)生理記錄儀，用以記錄呼吸曲線，根據(jù)走紙速度測算呼吸頻率和呼吸幅度，同時用針型電極由心電圖儀記錄Ⅱ?qū)?lián)心電圖，待各參數(shù)穩(wěn)定后，紀(jì)錄給藥前正常值，同時開始給藥。實驗數(shù)據(jù)用Excel程序的t檢驗作統(tǒng)計處理。熱淋清顆粒3個劑量組，劑量分別為30.86、15.43、7.72 g原生藥/kg(即2.7、1.35、0.675 g浸膏粉/kg)，溶劑對照組為蒸餾水。受試藥物臨用前用蒸餾水配成7.72、3.86、1.93 g原生藥/mL(即675、337.5、168.75 mg浸膏粉/mL)，供犬實驗用。十二指腸給藥，給藥容量為4 mL·kg-1，每只犬給藥1次，給藥后連續(xù)觀察5 h。

1.4.2熱淋清顆粒對小鼠精神神經(jīng)系統(tǒng)的影響[9～11]

1.4.2.1熱淋清顆粒對自發(fā)活動的影響[2]取ICR種小白鼠50只，體重18～22 g，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，每組10只。實驗前16 h將小鼠放入實驗室中以適應(yīng)環(huán)境，室溫控制在(24±2)℃。 實驗在8∶00～17∶00間進(jìn)行。測試時將小鼠置于XZ-4小鼠自由活動計數(shù)器的透明觀察籠中，待小鼠活動較穩(wěn)定后，記錄連續(xù)5 min內(nèi)的自由活動數(shù)，測試小鼠給藥前自由活動數(shù)，然后各組分別灌胃給藥。小鼠灌胃給藥后0.5、1、2、3及4 h時，分別放入記錄儀的活動箱中，測定各鼠活動情況，每次記錄連續(xù)5 min內(nèi)的自由活動數(shù)，實驗數(shù)據(jù)用Excel程序的t檢驗作統(tǒng)計處理。實驗設(shè)3個熱淋清顆粒給藥組，劑量分別為114.3、57.2、28.6 g原生藥/kg(即10、5、2.5 g浸膏粉/kg)，一個氯丙嗪陽性對照組(4.0 mg·kg-1)，一個蒸餾水對照組。受試藥物臨用前用蒸餾水配成2.86、1.43、0.72 g原生藥/mL(即250、125、62.5 mg浸膏粉/mL)，供小鼠實驗用。灌胃給藥，給藥體積均為0.4 mL·(10 g)-1，每只小鼠給藥1次。

1.4.2.2熱淋清顆粒對小鼠機(jī)能協(xié)調(diào)功能的影響按文獻(xiàn)傾斜板法稍作改進(jìn)[2]，將小鼠置于與水平面呈約70度角的光滑板，每次0.5 min，共放3次，對小鼠進(jìn)行篩選，取3次均不跌落的小鼠50只，隨機(jī)分成5組，每組10只，然后開始給藥。實驗設(shè)3個熱淋清顆粒給藥組，劑量分別為114.3、57.2、28.6 g原生藥/kg(即10、5、2.5 g浸膏粉/kg)；一組陽性對照組，氯丙嗪劑量4.0 mg·kg-1；一組陰性對照組，蒸餾水。受試藥物臨用前用蒸餾水配成2.86、1.43、0.72 g原生藥/mL(即250、125、62.5 mg浸膏粉/mL)，供小鼠實驗用。灌胃給藥，給藥體積均為0.4 mL·(10 g)-1，每只小鼠給藥1次。記錄給藥后不同時間點連續(xù)放3次，跌落兩次者為陽性，經(jīng)“直接機(jī)率法”檢驗[2]，與空白對照組相比較。

1.4.3熱淋清顆粒對小鼠閾下戊巴比妥鈉催眠作用的影響取小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，每組10只，然后開始給藥。實驗設(shè)3個熱淋清顆粒給藥組，劑量分別為114.3、57.2、28.6 g原生藥/kg(即10、5、2.5 g浸膏粉/kg)；設(shè)一個陽性對照組，安定劑量8 mg·kg-1；設(shè)一個陰性對照組，蒸餾水。受試藥物臨用前用蒸餾水配成2.86、1.43、0.72 g原生藥/mL(即250、125、62.5 mg浸膏粉/mL)，供小鼠實驗用。灌胃給藥，給藥體積均為0.4 mL·(10 g)-1。每只小鼠給藥1次。給藥15 min后，5組小鼠均腹腔注射戊巴比妥鈉20 mg·kg-1，以30 min內(nèi)小鼠翻正反射消失達(dá)1 min以上記為陽性反應(yīng)，記錄每組陽性反應(yīng)動物數(shù)[2]，以“直接機(jī)率法”與空白對照組相比較。

2結(jié)果

2.1熱淋清顆粒對麻醉犬心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響與空白對照組相比，十二指腸給藥熱淋清顆粒(30.86、15.43、7.72 g原生藥/kg)對麻醉犬血壓(SAP、DAP及MAP) 無明顯影響(P>0.05)；熱淋清顆粒(6、12、24 mg·kg-1) 對麻醉犬心率(HR)無明顯影響(P>0.05)。心律整齊，無異常心律；十二指腸給藥熱淋清顆粒(30.86、15.43、7.72 g原生藥/kg)對心電圖各參數(shù)(P-R間期， QRS波群寬度，QRS幅度，Q-T間期，T波)無明顯影響(P>0.05)；熱淋清顆粒(15.43、7.72 g原生藥/kg)對呼吸頻率和呼吸幅度均無明顯影響(P>0.05)。十二指腸給藥熱淋清顆粒(30.86 g原生藥/kg)僅在給藥60 min時明顯加強(qiáng)呼吸幅度(P<0.05)；熱淋清顆粒(30.86 g原生藥/kg)在給藥后其他時間點對呼吸頻率和呼吸幅度均無明顯影響(P>0.05)。

2.2熱淋清顆粒對小鼠精神神經(jīng)系統(tǒng)的影響與同期空白對照組相比，灌胃給藥熱淋清顆粒(114.3 g原生藥/kg) 30、60 min時，明顯抑制小鼠的自由活動數(shù)(P<0.05)；灌胃給藥熱淋清顆粒(57.2 g原生藥/kg)30 min時，明顯抑制小鼠的自由活動數(shù)(P<0.05)；灌胃給藥熱淋清顆粒(114.3、57.2、28.6 g原生藥/kg)對小鼠的機(jī)能協(xié)調(diào)功能無顯著影響(P>0.05)。

2.3熱淋清顆粒對小鼠閾下戊巴比妥鈉催眠作用的影響與空白對照組相比，灌胃給藥熱淋清顆粒(114.3、57.2、28.6 g原生藥/kg)與閾下戊巴比妥鈉合用對小鼠催眠作用無明顯協(xié)同作用(P>0.05)。

3結(jié)論

除熱淋清顆粒(30.86 g原生藥/kg)僅在十二指腸給藥60 min時明顯加強(qiáng)呼吸幅度(P<0.05)外，熱淋清顆粒(30.86、15.43、7.72 g原生藥/kg)對麻醉犬的血壓、心率、心電、心律、呼吸頻率和呼吸幅度無明顯影響。

灌胃給藥熱淋清顆粒(114.3 g原生藥/kg)30、60 min時，明顯抑制小鼠的自由活動數(shù)(P<0.05)；灌胃給藥熱淋清顆粒(57.2 g原生藥/kg)30 min時，明顯抑制小鼠的自由活動數(shù)(P<0.05)。灌胃給藥熱淋清顆粒(114.3、57.2、28.6 g原生藥/kg)對小鼠的機(jī)能協(xié)調(diào)功能和與閾下戊巴比妥鈉協(xié)同催眠作用均無顯著影響(P>0.05)。

4討論

熱淋清顆粒上市銷售近20年來，因其療效確切，成為臨床上治療泌尿系感染首選藥物。但是，熱淋清顆粒對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)等方面的影響未見報道。本實驗通過熱淋清顆粒對麻醉犬血壓、心率、心律、心電、呼吸及小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的實驗研究，證明了熱淋清顆粒對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)無明顯不良影響。因此，本研究進(jìn)一步補(bǔ)充和完善了熱淋清顆粒安全性實驗數(shù)據(jù)，為本品在臨床上的應(yīng)用提供了更為廣泛的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局.新藥(西藥)臨床前研究指導(dǎo)原則匯編(藥學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué))[M].北京：中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局,1993.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(一部)[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

[3] 梁斌，張麗艷，冉懋雄.中國苗頭花蓼[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社,2014.

[4] 張敬杰，羅迎春.苗族常用植物藥[M].貴陽：貴州科技出版社，2010.

[5] 徐叔云.藥理實驗方法學(xué)[M].第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社,1991.

[6] 袁占奎,齊長明.舒泰和速眠新Ⅱ?qū)θ粑托难芟到y(tǒng)影響的比較[J].中國獸醫(yī)雜志,2009,45(1):62-64.

[7] 王海軍,王永林,方泰慧,等.注射用辛芍對神經(jīng)、呼吸、心血管系統(tǒng)影響的實驗研究[J].中國藥業(yè),2008,17(23):4-5.

[8] 丁云錄,陳聲武,陰景峰,等.銀杏達(dá)莫注射液對神經(jīng)、呼吸和心血管系統(tǒng)影響的實驗研究[J].中國中醫(yī)藥科技,2006,13(5):326-327.

[9] 騫秀芳,張雪梅,史小四.苜?？傇碥諏π∈缶裆窠?jīng)系統(tǒng)的影響[J].實用中醫(yī)藥雜志,2012,28(12):991-992.

[10] 王平,張貴蓉.右肽普蘭對小鼠精神神經(jīng)系統(tǒng)的影響[J].中國藥理通訊,2004,21(3):4-5.

[11] 彭均華,黎淵弘,楊斌，等.尖吻蝮蛇毒無出血活性纖溶酶的一般藥理學(xué)作用研究[J].廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2008,25(4):537-539.