梁敏芳 (廣西壯族自治區(qū)柳州畜牧獸醫(yī)學(xué)校 545003)
一例獺兔產(chǎn)氣莢膜桿菌病的診治
梁敏芳 (廣西壯族自治區(qū)柳州畜牧獸醫(yī)學(xué)校 545003)
兔產(chǎn)氣莢膜桿菌病又稱兔產(chǎn)氣莢膜桿菌性腸炎,是由A型產(chǎn)氣莢膜桿菌產(chǎn)生的外毒素引起的腸毒血癥,通過觀察一例獺兔發(fā)病情況和臨床診斷,敘述兔產(chǎn)氣莢膜桿菌病的診治。
獺兔;產(chǎn)氣莢膜桿菌;腸炎;養(yǎng)殖示范場;診治
兔產(chǎn)氣莢膜桿菌病發(fā)病率與死亡率都很高,不同年齡、品種、性別的家兔對(duì)產(chǎn)氣莢膜桿菌均有易感性。臨床上以急性腹瀉、排黑色水樣或膠凍樣糞便、盲腸漿膜出血和胃粘膜出血、潰瘍?yōu)橹饕卣?。感染途徑主要有消化道、傷口,常年均有發(fā)生,多在春秋兩季因飼養(yǎng)管理不良及各種應(yīng)激因素誘使本病爆發(fā)。
病例來源于柳州市柳北區(qū)某養(yǎng)殖場,據(jù)工作人員反映該場為縣級(jí)養(yǎng)殖示范場,常常有政府組織的人員入場參觀,參觀后都多多少少有些兔子生病,每年因此造成的損失都比較大。本次飼養(yǎng)的1000多只獺兔,年齡在2~4月,部分兔子進(jìn)行了常規(guī)免疫,曾用磺胺奎惡唑飼喂3天預(yù)防球蟲病,開始發(fā)病約在2014年4月10日,發(fā)病5d造成70多只死亡。發(fā)病后曾經(jīng)使用磺胺奎惡唑、磺胺-5-甲氧密啶等進(jìn)行治療,均未能控制疫情,死亡數(shù)量還在不斷增加。
多數(shù)兔子發(fā)病突然,死前均有抽搐、尖叫現(xiàn)象,少數(shù)患病后癱瘓不能站立,腹部膨脹如球體,觸摸質(zhì)軟。病兔精神不佳,卷縮于籠內(nèi),拒絕吃食和飲水,排黑色水樣糞便,腥臭味很重,體溫大多正常,少數(shù)兔子體溫略有升高,在出現(xiàn)水瀉的當(dāng)天或第二天即死亡,甚至未見水瀉即死亡,大多數(shù)都為急性經(jīng)過,病程很短,少數(shù)病例病程稍長,最終均以死亡告終。
解剖病死兔子5只,切開腹腔后均散發(fā)出一股腐敗的臭味,小腸腸壁薄且透明,腸內(nèi)充滿氣體,內(nèi)容物很少,剪開腸道見粘膜呈彌漫性出血;將胃內(nèi)容物倒出,表面包裹一層脫落的粘膜,胃壁變薄,胃底部有大小不一的潰瘍;盲腸和結(jié)腸漿膜有少量出血斑、點(diǎn),腸內(nèi)有黑綠色稀薄內(nèi)容物,也有腐敗臭味;肝臟質(zhì)地脆弱;心臟表面血管努張呈樹枝狀;脾臟呈深褐色、質(zhì)地脆弱。
取病死兔子的肝臟、脾臟抹片,革蘭氏染色后鏡檢,一個(gè)視野單個(gè)見到3~5個(gè)或成雙的桿菌,菌體平直,兩端鈍圓,菌體外圍包裹有莢膜。
將病料接種于葡萄糖血瓊脂培養(yǎng)基,于厭氧和普通環(huán)境中培養(yǎng),45℃、6h后觀察,細(xì)菌生長良好形成露珠大小的菌落,菌落周圍形成雙環(huán)溶血,內(nèi)環(huán)為完全溶血,外環(huán)為草綠色不完全溶血環(huán)。取菌落抹片、革蘭染色鏡檢,細(xì)菌形態(tài)同病料抹片所見相同。
取分離培養(yǎng)所得的細(xì)菌菌落分別接種于牛奶培養(yǎng)基和葡萄糖肉湯、厭氧肉肝湯培養(yǎng)基、糖發(fā)酵管及硫化氫反應(yīng)管。
(1)培養(yǎng)5h后,牛奶培養(yǎng)基出現(xiàn) “爆裂發(fā)酵”,牛奶酸凝,產(chǎn)生大量氣體,凝塊呈多孔海綿狀。葡萄糖肉湯、厭氧肉肝湯培養(yǎng)基均勻混濁,并有大量氣體產(chǎn)生。
(2)糖發(fā)酵試驗(yàn)和硫化氫試驗(yàn)培養(yǎng)24h后,結(jié)果如附表。
根據(jù)生化試驗(yàn)結(jié)果,判斷該細(xì)菌為產(chǎn)氣莢膜桿菌。
取回腸內(nèi)容物10g加5倍生理鹽水稀釋后離心,取上清液分成兩份,其中一份加等量A型抗毒素于37℃作用40min,另一份不加。選10只健康小白鼠,隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組每只小白鼠腹腔注射1ml不加抗毒素的上清液;對(duì)照組每只小白鼠腹腔注射1ml加有抗毒素的上清液。分別于24h、48h、72h觀察結(jié)果,24h兩組無小白鼠死亡,48h后實(shí)驗(yàn)組5只小白鼠全部死亡,對(duì)照組無小白鼠死亡,72h后對(duì)照組小白鼠無死亡。
選擇4只2月齡的健康家兔分實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。刮取菌落用生理鹽水稀釋后給實(shí)驗(yàn)組的2只各注射2ml,對(duì)照組不注射。實(shí)驗(yàn)組兔子于36h后出現(xiàn)癥狀,72h后死亡,對(duì)照組無異常。
根據(jù)臨床癥狀、剖檢病理變化、實(shí)驗(yàn)室診斷和動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果將獺兔本次發(fā)生的疾病診斷為產(chǎn)氣莢膜桿菌病。
肌肉注射產(chǎn)氣莢膜桿菌免疫血清,每只5~10ml,每天1次,連用3d;同時(shí)每只肌肉注射1.5ml克林霉素,每天1次,連用3d。對(duì)有腹瀉癥狀的兔子腹腔注射5%葡萄糖生理鹽水補(bǔ)充體液。
用產(chǎn)氣莢膜桿菌氫氧化鋁滅活菌苗進(jìn)行緊急免疫,每只兔子皮下注射2ml,2~3周后可產(chǎn)生免疫力,免疫期6個(gè)月左右。在產(chǎn)生免疫前避免與患病獺兔接觸,飼養(yǎng)工具不能交叉使用,飼養(yǎng)員不要串舍。
在治療的同時(shí),配合環(huán)境嚴(yán)格消毒、加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、保持兔舍干燥,5d后疫情基本得到控制。2周后給治愈的獺兔注射疫苗。
(1)應(yīng)激因素是誘發(fā)本病的主要原因,因此平時(shí)要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,避免應(yīng)激因素造成兔子抵抗力下降,如更換飼料緩慢進(jìn)行,營養(yǎng)搭配合理,多喂粗飼料,維護(hù)胃內(nèi)微生物區(qū)系的平衡,補(bǔ)充維生素或在飼料中拌入益生菌,做好轉(zhuǎn)欄的過渡等。
(2)嚴(yán)格遵守獸醫(yī)衛(wèi)生制度,引進(jìn)種兔或購回小兔時(shí)要嚴(yán)格檢疫、隔離觀察2周以上,確認(rèn)無疫病時(shí)方可合群;避免或減少外來人員與兔子直接接觸,自繁自養(yǎng),全進(jìn)全出,清污分流。建議該場在外來人員入場參觀時(shí)能洗澡、更換衣服、鞋、帽。
(3)產(chǎn)氣莢膜桿菌為芽胞桿菌,芽孢一旦形成在外界環(huán)境中可以長時(shí)間存活,是感染的主要來源,搞好環(huán)境消毒和保證飼料和飲水清潔衛(wèi)生,防止病原從消化道入侵是預(yù)防本病的關(guān)鍵措施。尤其在雨季更應(yīng)注意,否則容易發(fā)病。
(4)一旦發(fā)生疫情,應(yīng)立即隔離淘汰病兔避免接觸傳播,兔舍、兔籠及用具用2~4%熱燒堿溶液洗刷消毒或火焰灼燒;病死兔子及其分泌物、排瀉物等深埋或焚燒,發(fā)酵不能全部殺滅本菌。
(5)產(chǎn)氣莢膜桿菌的致病原因主要是細(xì)菌產(chǎn)生的外毒素,因此疾病發(fā)生時(shí),兔群立即使用免疫血清或疫苗緊急免疫,配合抗生素治療,腹瀉兔子及時(shí)補(bǔ)液,一般都能取得比較好的效果,單一使用抗生素治療效果則不理想。
(6)做好預(yù)防接種,每年春秋兩季用產(chǎn)氣莢膜桿菌滅活苗進(jìn)行全場接種,是預(yù)防本病的最好方法。對(duì)新出生的幼兔要及時(shí)進(jìn)行免疫接種,成年兔與幼兔分開飼養(yǎng)。建議該場認(rèn)真制定免疫程序,做好各種疾病的預(yù)防。
附表 生化試驗(yàn)鑒定結(jié)果
(7)產(chǎn)氣莢膜桿菌的陳舊培養(yǎng)物為革蘭陰性菌,菌體形態(tài)在顯微鏡下與炭疽桿菌極為相似,診斷時(shí)要注意避免誤診。