王玉范（沈陽化工研究院有限公司，遼寧沈陽 110021）

王俊一（大連東方研究所有限公司，遼寧省莊河市 116400）

禾草丹農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品研制

王玉范（沈陽化工研究院有限公司，遼寧沈陽 110021）

王俊一（大連東方研究所有限公司，遼寧省莊河市 116400）

［目的］采用層析法研制禾草丹農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品純度高，方法簡便。［方法］采用采用層析法對禾草丹原藥進(jìn)行純化，鑒別試驗(yàn)采用HPLC、IR進(jìn)行，并進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)和穩(wěn)定性試驗(yàn)，多組檢驗(yàn)數(shù)據(jù)確定量值。［結(jié)果］禾草丹標(biāo)樣含量99.8%。［結(jié)論］層析法得到的禾草丹標(biāo)準(zhǔn)品符合標(biāo)準(zhǔn)品要求。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；禾草丹；量值

禾草丹是氨基甲酸酯類內(nèi)吸傳導(dǎo)選擇性除草劑劑，英文通用名為Thiobencarb，CAS登錄號為［28249-77-6］，其化學(xué)名稱為：S-［（4-氯苯基）甲基］二乙基硫代氨基甲酸酯。本文通過層析法制備的禾草丹純品其滿足了標(biāo)準(zhǔn)品要求。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑和溶液

正己烷（分析純）；乙酸乙酯（分析純）；禾草丹原藥：含量≥95%；硅膠（200目-300目，青島海洋化工廠）。

1.2 儀器

254nm紫外線分析儀（上海金鵬分析儀器有限公司）。；層析管（φ5cm×1m帶活塞開關(guān)，柱管底部有4#砂芯片）；層析板（稱取2g硅膠GF-254于研缽中，加水約20mL磨成均勻糊狀，均勻地倒在一塊預(yù)先洗凈的10cm×5cm的玻璃板上，輕輕振動(dòng)以趕走氣泡，于水平處涼開，放入130℃烘箱中干燥半小時(shí)）。

1.3 分離操作

1.3.1 流動(dòng)相選擇。

稱取0.1g禾草丹標(biāo)樣于10mL容量瓶中，用異丙醇定容，移取1mL于距層析板底邊2.5cm，兩側(cè)1.5cm處點(diǎn)或一直線浸入有約0.5-1.0cm深的溶劑（正已烷+乙酸乙酯=95+5）的展開缸中。待溶劑上升至層析板的上部15cm處時(shí)，取出自然風(fēng)干，用紫外分析儀下標(biāo)出溶劑上沿和禾草丹譜帶，計(jì)算Rf值。調(diào)整正已烷和乙酸乙酯比例，當(dāng)正已烷+乙酸乙酯=97+3時(shí)，禾草丹Rf值約為0.5。稱取含禾草丹0.1g的樣品，置于調(diào)整Rf值約0.5的展開劑中，待溶劑上沿至15cm處時(shí)，在紫外分析儀下觀察是否有雜質(zhì)譜帶出現(xiàn)，將禾草丹譜帶小心刮取至潔凈燒杯中加入適量氯仿，于氣相色譜分析條件下用歸一法測定無雜質(zhì)。最終確定流動(dòng)相比例為：正已烷+乙酸乙酯=97+3。

1.3.2 層析柱填裝。稱取一定量層析硅膠，將層析硅膠用流動(dòng)相稀釋成流動(dòng)性很好的糊狀，注入層析管，關(guān)閉活塞待其自然沉降至體積不變，打開活塞流出上層流動(dòng)相，再裝填硅膠直至硅膠裝填至層析管85-90%高度處。

1.3.3 分離。關(guān)閉層析柱活塞，取10g左右樣品用適量流動(dòng)相稀釋，然后沿層析柱管壁慢慢倒入層析管柱，防止濺起硅膠，然后用少量流動(dòng)相清洗管壁，使樣品集中在某段位置。管壁上頭置一分液漏斗內(nèi)裝流動(dòng)相，打開分液漏斗和層析管活塞，控制流速使流入管柱的流動(dòng)相與底部活塞流出的流動(dòng)相大概相等，防止流干。用紫外分析儀檢測是否有餾出物，分段收集，并結(jié)合選擇流動(dòng)相時(shí)樣品的譜帶中雜質(zhì)的位置，判斷禾草丹流出的時(shí)間段（雜質(zhì)的流出時(shí)間同薄層色譜時(shí)Rf值，Rf值大的先流出），分別收集幾個(gè)時(shí)間段的樣品。

1.3.4 鑒定、脫溶、干燥。將收集的各個(gè)餾出液用氣相色譜定性，將無雜質(zhì)的餾出液合并在一起，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸發(fā)掉溶劑，并用真空干燥器干燥。

1.4 定量

1.4.1 方法提要。待標(biāo)禾草丹標(biāo)準(zhǔn)品用丙酮溶解，以鄰苯二甲酸二正戊酯為內(nèi)標(biāo)物，使用鍵合5%苯基-甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管色譜柱和氫火焰離子化檢測器，對禾草丹進(jìn)行氣相色譜分離，內(nèi)標(biāo)法定量。

1.4.2 儀器與試劑。Agelient 6890N氣相色譜儀，具有氫火焰離子化檢測器；禾草丹標(biāo)準(zhǔn)品已知純度99.5%；丙酮（分析純）；內(nèi)標(biāo)物：鄰苯二甲酸二正戊酯（分析純）。

1.4.3 色譜操作條件。載氣：氮?dú)猓皦海?00kPa；氫氣：30mL/min；空氣：300mL/min；柱溫：程序升溫，初始溫度220℃，保持10min，20℃/min升至260℃，保持8min；氣化溫度：260℃；檢測器溫度：280℃，分流比：50：1；進(jìn)樣體積：1μL；保留時(shí)間：禾草丹5.4min；鄰苯二甲酸二正戊酯8.2min。

2 結(jié)果與討論

2.1 禾草丹標(biāo)準(zhǔn)品定量結(jié)果（見表1）

表1 禾草丹標(biāo)準(zhǔn)品檢測結(jié)果

實(shí)驗(yàn)測得干燥減量為0.03%，故禾草丹標(biāo)準(zhǔn)樣品的含量X（%）=99.82×（100%-0.03%）=99.8，不確定度為+0.01%--0.03%。

2.2 穩(wěn)定性和有效期

2.2.1 均勻性。在不同部位隨機(jī)抽取10個(gè)試樣，每個(gè)試樣測定一次；再從一個(gè)部位抽取10個(gè)試樣，重復(fù)測定10次［2］，測定結(jié)果見表2。