董迎春，李詩柳，言夢非，劉宗偉，朱 怡

（蘇州市公安局，江蘇 蘇州 215500；2.成都武侯區(qū)檢察院，成都 610041；3.蘇州大學(xué)，江蘇 蘇州 215000）

1025例涉案手機和電腦接頭類檢材的DNA檢驗分析

董迎春1，李詩柳2，言夢非1，劉宗偉1，朱 怡3

（蘇州市公安局，江蘇 蘇州 215500；2.成都武侯區(qū)檢察院，成都 610041；3.蘇州大學(xué)，江蘇 蘇州 215000）

本文采用改良硅珠法，對自2012年以來實驗室受理的1025例涉案手機、電腦接頭類檢材（手機充電器接頭156例，電腦網(wǎng)線水晶接頭416例、電腦電源線接頭155例、電腦顯示器數(shù)據(jù)線接頭22例、鼠標(biāo)、鍵盤等USB接口類檢材276例）進行分析，以檢出性別及13個以上STR基因座同時圖譜峰值≥200 RFU的檢材計算，1025例檢材檢出率為87.0%，其中手機充電器接頭檢出率為93.6%、電腦網(wǎng)線水晶接頭檢出率為84.4%、電腦電源線接頭檢出率為82.0%、電腦顯示器數(shù)據(jù)線接頭檢出率為95.5%、鍵盤等USB接口類檢材檢出率為89.5%。本研究證實，該改良硅珠法便捷、省時高效、檢驗效果理想，適用于法醫(yī)微量物證DNA檢驗。

法醫(yī)物證學(xué)；接觸DNA；改良硅珠法；電器接頭

近年來，盜竊手機、電腦等財物案件頻發(fā)，現(xiàn)場生物物證多為接頭類等微量物證，DNA檢驗難度大。本實驗室通過改進硅珠法，提升了接觸性檢材的檢出率，筆者回顧性分析了2012年以來運用本法處理的接頭類檢材的檢驗情況并討論。

1 材料和方法

1.1 材 料

2012 年以來實驗室受理的涉案手機充電器接頭156例，電腦網(wǎng)線水晶接頭416例、電腦電源線接頭155例、電腦顯示器數(shù)據(jù)線接頭22例、USB接口類（鼠標(biāo)、鍵盤、音響、USB數(shù)據(jù)線、移動硬盤、無線網(wǎng)卡等）檢材276例。共計1025例。

1.2 方 法

DNA提取：采用D-盾超敏DNA提取試劑盒（惠文生物技術(shù)有限公司，上海）。①運用干濕法提取檢材后，將棉簽擦拭子放入離心套管中，加入180 μ L裂解液，99℃裂解5 min；②8000 r/min離心2 min，棄套管；加入吸附液1 000 μ L，硅珠16 μ L，渦旋后靜置15 min；③8 000 r/min離心1 min，棄上清；加入800 μL漂洗液，充分混勻后8 000 r/min離心1min，棄上清；④置于56℃金屬浴上烘干沉淀物；后加入20 μL洗脫液，充分混勻后置于56℃金屬浴上洗脫15 min；⑤16 000 r/min離心2 min，取上清液進行PCR。

PCR反應(yīng)及電泳分析：取上述各檢材DNA模板適量，使用AmpFLSTR?Identifiler?Plus PCR Kit（AB公司，美國）試劑盒和GeneAmp PCR System 9700進行PCR復(fù)合擴增STR基因座（擴增反應(yīng)體系為20 μ L，內(nèi)含mix 8 μ L，prime set 4 μ L，DNA 8 μ L），擴增產(chǎn)物應(yīng)用ABI3500XL型熒光分析儀電泳檢測和GeneMapper ID-X分析。

2 結(jié)果和討論

本文對包含性別及13個以上STR基因座同時圖譜峰值在200RFU及以上的結(jié)果視為檢驗成功，1025例實驗檢材檢驗結(jié)果統(tǒng)計見表1。表中結(jié)果顯示，手機充電器接頭檢出率為93.6%；電腦網(wǎng)線水晶接頭檢出率為84.4%；電腦電源線接頭檢出率為82.0%；電腦顯示器數(shù)據(jù)線接頭檢出率為95.5%；電腦USB接口類檢材（鼠標(biāo)、鍵盤、音響、USB數(shù)據(jù)線、移動硬盤、無線網(wǎng)卡）檢出率為89.5%；本文涉及的檢材累計檢出率為87.0%。

觸摸檢材（touch DNA）作為低拷貝（low copy number， LCN）DNA的一種，是近年來法醫(yī)DNA檢驗的熱點和難點之一。但觸摸檢材通常細胞含量較少，如何從相關(guān)載體上收集轉(zhuǎn)移到足夠多的脫落細胞，對檢驗成功是至關(guān)重要的。本文涉案檢材均為表面積較大且質(zhì)地堅硬光滑的類型，采用了干濕兩步擦拭法［1］進行提取。觸摸檢材因接觸人員的復(fù)雜性，Wickenheiser［2］研究認為皮膚接觸部位的脫落細胞松散地結(jié)合在物體表面，第二次接觸會把第一次接觸者的細胞蹭掉，留下第二次接觸者的細胞，對微量DNA進行檢驗，一般獲得的DNA圖譜以最后的接觸者為主，這也使從涉案物品上檢出嫌疑人的DNA成為可能。

本文建立的改良硅珠法，可獲得高純度DNA［3，4］，同時具有以下合理設(shè)計：①使用具有過濾雜質(zhì)功能的離心套管，操作更為簡便、去除雜質(zhì)和模板保留效果理想；②降低了硅珠懸濁液的用量，使DNA更容易洗脫；③簡化漂洗，減少了漂洗過程中的DNA損耗；④小體系洗脫，進一步提高了模板DNA的濃度；⑤根據(jù)報道［5，6］，高純度DNA輔以適當(dāng)增加PCR循環(huán)數(shù)，可以極大提高擴增成功率，本文實驗增加PCR循環(huán)數(shù)至30個。從整體上簡化了實驗操作，降低了模板DNA的損耗量，提高了檢材檢出率，也印證了硅珠法改良后在微量物證檢驗中的應(yīng)用價值。

本文1025例檢材絕大部分為實物提取送檢，更利于實驗室人員視情況采用更為合理的提取方法，最大程度的進行脫落細胞轉(zhuǎn)移。時間、濕度、溫度、光照、微生物等不利環(huán)境因素會加速DNA的降解，對觸摸檢材影響更大，故提取后妥善保管和及時送檢亦為保證檢材檢出數(shù)據(jù)的重要環(huán)節(jié)，進而更好的發(fā)揮觸摸檢材的科學(xué)證據(jù)作用。

表1 1025例檢材檢驗情況統(tǒng)計Table1 Statistical data for the analysis of 1025 samples

［1］ Gill P, Whitaker J, Flaxman C, et al.An investigation of the rigor of interpretation rules for STRs derived from less than 100pg of DNA ［J］.Forensic Sci Int, 2000,112(1):17-40.

［2］ Wickenheiser R A.Trace DNA: A review, discussion of theory, and application of the transfer of trace quantities of DNA through skin contact ［J］.J Forensic Sci, 2002,47(3):442-450.

［3］ 王林生，蘇勇，顧林崗.硅珠法提取PCR模板DNA ［J］.中國法醫(yī)學(xué)雜志，2000, 15(1):36-37.

［4］ 董迎春，孫偉，劉宗偉.刀具水浸4天DNA檢驗1例 ［J］.中國法醫(yī)學(xué)雜志，2014, 29(2):176.

［5］ 陳連康，王德明，顧麗華，等.PCR擴增循環(huán)數(shù)與低拷貝DNA的STR分型 ［J］.中國法醫(yī)學(xué)雜志，2005, 20(3):149-151.

［6］ 嚴(yán)江偉，唐暉，王靜，等.DNA提取方法和PCR循環(huán)次數(shù)對STR擴增成功率的影響 ［J］.中國法醫(yī)學(xué)雜志，2005, 20(3): 151-153.

引用本文格式：董迎春， 李詩柳， 言夢非， 等.1025例涉案手機和電腦接頭類檢材的DNA檢驗分析［J］.刑事技術(shù)， 2015，40（4）:332-333.

DNA Analysis of 1025 Touch Samples from Various Appliance Connectors

DONG Yingchun1, LI Shiliu2，YAN Mengfei1, LIU Zongwei1，ZHU Yi3
(1.Suzhou Public Security Bureau, Jiangsu Suzhou 215000, China; 2.People’s Procuratorate of Wuhou District，Chengdu 610041, China; 3.Soochow University, Jiangsu Suzhou 215000, China)

Touch DNA is now often encountered in forensic investigation.Its successful acquisition is often crucial for solving the relevant cases.In this paper, 1025 pieces of touch DNA samples tested in our laboratory since 2012 are reviewed with the purpose to fnd some regularity.These samples were collected from various electric connectors consisting of mobile phones’ (156 pieces), net cables’ (416 pieces), power cables’ (155 pieces), displays’ (22 pieces), and USBs’ (276 pieces).The DNA was extracted with modifed method of silica， amplifed with AmpFLSTR?Identifler?Plus PCR Kit, electrophoresed with ABI3500XL.Data were analyzed with GeneMapper ID-X.The results showed that the detection rate was 93.6% for mobile phones’ connectors, 84.4% for net cables’, 82.0% for power cables’, 95.5% for displays’, and 89.5% for USBs’, with a total detection rate of 87.0% for all the 1,025 pieces of touch DNA samples.The method applied here is suitable to tackle the samples of touch DNA.

forensic biological evidence； touch DNA； modifed silicon-based method； appliance connector

DF795.2

B

1008-3650（2015）04-0332-02

10.16467/j.1008-3650.2015.04.019

董迎春（1982—）男，主檢法醫(yī)師，碩士，研究方向為法醫(yī)遺傳學(xué)。 E-mail: 22298013@qq.com

2014-06-28