俞秀玲
(河南省林業(yè)科學(xué)研究院,河南 鄭州 450008)
核桃是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)林,分布廣泛,總產(chǎn)量居世界第1 位[1]。1 株20 a 生的核桃能產(chǎn)2~4 kg雄花,筆者曾對(duì)核桃花粉營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)核桃花粉具有蛋白較高,還原性糖、蔗糖含量較低,高鉀、低鈉的特點(diǎn)[2]。
植物生物活性物質(zhì)在維持人體健康、預(yù)防慢性病方面具有舉足輕重的作用[3]。花粉作為全天然、全營(yíng)養(yǎng)、全功能的保健食品,已引起研究者們的興趣,生物活性物質(zhì)研究也是其熱點(diǎn)之一。目前對(duì)于花粉功能性成分研究多集中于黃酮、多糖、多肽、多酚類[4~6]。針對(duì)的花粉種類多為油菜花粉、松花粉、玉米花粉、銀杏花粉。
目前國(guó)內(nèi)外對(duì)核桃化學(xué)成分的研究暫處于初始研究階段,為了更好地了解該花粉,實(shí)驗(yàn)首次對(duì)核桃花粉的化學(xué)成分進(jìn)行了預(yù)試驗(yàn),以明確其中可能含有的化學(xué)成分,為以后的研究和開發(fā)利用提供依據(jù)。
1.1.1 植物原料
核桃花粉,2014年采自河南鄭州滎陽。
1.1.2 主要試劑
95%乙醇、95%石油醚、甲醇(均為分析純)、a-萘酚,氯化鈉、明膠、三氯化鐵、碘化汞鉀、碘化鉍鉀、硅鎢酸、鹽酸、三氯化鋁、醋酸鎂、鎂粉、鹽酸羥胺、醋酸鉛、濃硫酸等。
1.1.3 主要儀器
K-1001N 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司;FAll04 型電子天平,上海天平儀器廠制造;XMTB 型數(shù)顯水浴鍋,北京市長(zhǎng)風(fēng)儀器公司; KQ-300TDE 數(shù)控超聲波清洗器,昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)。
1.2.1 提取液制備
水提取液:取待試花粉2 g,加入20 mL 水,室溫浸泡過夜,在超聲波條件下,在超聲波條件下粗提2 次,每次10 mL,振蕩0.5 h 獲取冷水提取液。于50~60 ℃水浴中溫浸2 h,過濾,即得熱水提取液。
乙醇提取液:取花粉5 g,加95%乙醇約50 mL,水浴上回流15 min,過濾,濾液濃縮至25 mL。
酸性乙醇提取液:將12 mL 乙醇提取液濃縮至糖漿狀物,用濃度2%的鹽酸10 mL 溶解成酸液。
甲醇提取液:乙醚處理過的材料,用甲醇20 mL水浴回流10 min,趁熱過濾。
乙醚提取液:取花粉5 g,加乙醚50 mL,水浴回流20 min,過濾,濾液濃縮至5 mL。
1.2.2 化學(xué)成分預(yù)試實(shí)驗(yàn)
冷水提取液在試管中做蛋白質(zhì)、氨基酸、有機(jī)酸、皂甙;熱水提取液做糖、多糖、鞣質(zhì)、皂苷等試驗(yàn)。乙醇提取液、酸性乙醇提取液、甲醇提取液在試管中進(jìn)行香豆素、內(nèi)酯、黃酮、苷、萜類、強(qiáng)心苷、蒽醌、酚等的試驗(yàn)。石油醚提取液在濾紙上作揮發(fā)油和油脂試驗(yàn)。
1.2.3 專項(xiàng)試驗(yàn)
對(duì)生物堿、黃酮、香豆素專項(xiàng)試驗(yàn)。
系統(tǒng)進(jìn)行預(yù)試結(jié)果見表1。由表1 可以看出,核桃花粉實(shí)驗(yàn)結(jié)果:糖、多糖及苷類、蛋白質(zhì)、氨基酸、酚性成分、生物堿、甾體、黃酮類化合物、強(qiáng)心苷、內(nèi)酯、香豆素及苷類、揮發(fā)油為陽性;皂甙、有機(jī)酸、鞣質(zhì)、蒽醌及苷類的實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性。
表1 系統(tǒng)預(yù)試結(jié)果
由于生物堿、萜類、內(nèi)酯、香豆素及苷類在花粉中的成分報(bào)道不常見,為了去除偽陽性,提高檢測(cè)的靈敏度,做了專項(xiàng)試驗(yàn)。黃酮是花粉中重要成分,做了對(duì)黃酮專項(xiàng)試驗(yàn),為后續(xù)工作提供鋪墊。專項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果見表2。結(jié)果表明,生物堿、香豆素、黃酮的所有試驗(yàn)項(xiàng)目均呈陽性反應(yīng)。
表2 生物堿、黃酮、香豆素專項(xiàng)試驗(yàn)
由以上結(jié)果可知,核桃花粉中可能含有糖、多糖及苷類、蛋白質(zhì)、氨基酸、酚性成分、生物堿、甾體、萜類、黃酮類化合物、強(qiáng)心苷、內(nèi)酯、香豆素及苷類、揮發(fā)油;可能不含有鞣質(zhì)、蒽醌及苷類;通過專項(xiàng)試驗(yàn)可以確定含有黃酮、生物堿、香豆素。仍需要進(jìn)行色譜分離、分析、鑒定等實(shí)驗(yàn),確定單體化合物,以便為其活性成分的研究提供參考。
[1]郗榮庭.發(fā)揮優(yōu)勢(shì),扭轉(zhuǎn)劣勢(shì),加快核桃產(chǎn)業(yè)化步伐[C].第二屆中國(guó)核桃大會(huì)暨首屆商洛核桃節(jié)論文集,楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué)出版社,2009.
[2]俞秀玲,張杰. 核桃花粉營(yíng)養(yǎng)成分分析與評(píng)價(jià)[J]. 林業(yè)科技開發(fā),2007(3):45-47.
[3]唐傳核. 植物生物活性物質(zhì)[M]. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2004.
[4]張紅城,董 捷,李 慧,等. 六種蜂花粉多酚和黃酮類物質(zhì)含量測(cè)定及抗氧化性的研究[J]. 食品科學(xué),2007,27(8):500-504.
[5]楊佳林,徐 響,孫麗萍,等. 蜂花粉酚類化合物研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué),2008,29(8):693-696.
[6]李云捷. 玉米花粉多糖分離純化結(jié)構(gòu)鑒定及抗氧化活性的研究[D]. 武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2005.
[7]王俊儒. 天然產(chǎn)物提取分離與鑒定技術(shù)[M]. 楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué)出版社,2006.