（青島科技大學(xué)，山東青島 266042）

1 簡(jiǎn)介

雌激素是一種固醇類激素，由膽固醇合成并由卵巢、胎盤、脂肪組織和腎上腺等分泌[1]，對(duì)一些激素依賴性生殖組織有重要的生理作用。通過(guò)與高親和力的雌激素受體（ER）結(jié)合，它們控制著乳房上皮組織的生長(zhǎng)，調(diào)節(jié)血液中的膽固醇水平，并通過(guò)促進(jìn)子宮內(nèi)膜增生從而調(diào)節(jié)月經(jīng)周期，對(duì)心血管具有保護(hù)作用等[2]。雌激素的生物學(xué)作用是通過(guò)與雌激素受體（ER）之間高效的親和力實(shí)現(xiàn)的[3]。但是暴露于高濃度的雌激素環(huán)境下可引起不同的腫瘤。例如，可以表達(dá)雌激素受體（ER）的乳腺腫瘤就是由雌激素刺激形成的[4]，因此抗雌激素療法已成為既定的治療雌激素受體陽(yáng)性乳腺癌的方法[5]。

選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑（SERMs）是一種化合物，它對(duì)選定的目標(biāo)雌激素激動(dòng)而對(duì)其他的雌激素拮抗。SERM的主要角色是對(duì)骨代謝，心血管系統(tǒng)的多種功能具有雌激素激動(dòng)劑活性，對(duì)乳房和子宮具有雌激素拮抗作用[6]。幾個(gè)表現(xiàn)出SERM性質(zhì)的化合物目前可用于臨床，其中常用的有克羅米芬，他莫昔芬，托瑞米芬，雷洛昔芬。他莫昔芬是第一個(gè)被國(guó)際機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的（FDA，WHO，etc）可以防止惡性乳腺癌的藥物。然而，研究表明長(zhǎng)期使用他莫昔芬可能會(huì)增加患子宮內(nèi)膜癌的風(fēng)險(xiǎn)[7]。本綜述的目的是評(píng)估這些選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑的遺傳毒性。遺傳毒性是一個(gè)廣義的術(shù)語(yǔ)，指的是干擾調(diào)節(jié)基因組精度的DNA和細(xì)胞器（如紡錘體和拓?fù)洚悩?gòu)酶）的能力[8]，一般情況下基因毒性藥物可導(dǎo)致癌癥。因此，評(píng)估一個(gè)化學(xué)藥物可能存在的遺傳毒性是十分重要的。

2 選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑（SERMs）及其遺傳毒性

2.1 克羅米芬

克羅米芬是一種非甾體類排卵興奮劑[9]和選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑（SERMs）。它是一種合成荷爾蒙激素，可以欺騙下丘腦使之認(rèn)為人體內(nèi)的雌激素水平太低。作為回報(bào)，下丘腦釋放GnRH（促性腺激素釋放激素），激活垂體釋放卵泡刺激素（FSH），F(xiàn)SH的數(shù)量的增加可以刺激卵泡的發(fā)展，最終導(dǎo)致排卵[10]。有報(bào)道[11]稱用克羅米芬作為治療藥物時(shí)可以導(dǎo)致各種惡性腫瘤，如子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌等。

克羅米芬的遺傳毒性作用已經(jīng)被許多作者做了報(bào)道。Ohnishi[12]報(bào)道稱克羅米芬中含有氯米芬，可以導(dǎo)致大腸桿菌DNA鏈斷裂。London等[13]報(bào)道稱克羅米芬在體內(nèi)100mg/Kg時(shí)可減少排卵細(xì)胞的數(shù)目并顯著提高其超倍性。類似地，在體外小鼠實(shí)驗(yàn)中5.0 μg/mL濃度的氯米芬會(huì)顯著增加細(xì)胞基因的超倍性的水平和降低中期I卵母細(xì)胞的比例。Duran等[14]由微核試驗(yàn)研究了克羅米芬在大鼠嗜多染紅細(xì)胞內(nèi)潛在的遺傳毒性。實(shí)驗(yàn)中連續(xù)5天將0.16，0.32和0.64mg/kg濃度的氯米芬以腹腔注射的方式分別注入大鼠體內(nèi)，作者們發(fā)現(xiàn)大鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率和基因組不穩(wěn)定性隨克羅米芬量的不同呈劑量依賴性增加。Hastwell[15]報(bào)道稱在對(duì)人類淋巴母細(xì)胞TK6細(xì)胞系進(jìn)行GADD45a-GFP遺傳毒性試驗(yàn)中并未發(fā)現(xiàn)氯米芬對(duì)淋巴母細(xì)胞具有遺傳毒性。Y1lmaz等[16]報(bào)道說(shuō)0.4、0.8、1.6和3.2 μg/mL濃度的克羅米芬會(huì)引起人淋巴細(xì)胞染色體畸變，微核率及DNA損傷的顯著增加，它還可以通過(guò)減少有絲分裂指數(shù)造成細(xì)胞周期的延遲，然而在這項(xiàng)工作中作者還報(bào)告說(shuō)，克羅米芬沒(méi)有造成鼠傷寒沙門氏菌TA98和TA100菌株堿基對(duì)取代或移碼突變。我們實(shí)驗(yàn)室對(duì)克羅米芬誘導(dǎo)的人淋巴細(xì)胞姐妹染色單體互換實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了研究，研究結(jié)果表明克羅米芬會(huì)引起人淋巴細(xì)胞姐妹染色單體交換的顯著增加。

2.2 他莫昔芬

他莫昔芬是一種非甾體類抗雌激素藥物，被用于乳腺癌的治療已經(jīng)30多年。它是一種選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑,主要作用是抑制發(fā)展中惡性腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。有作者報(bào)道[17]稱他莫昔芬會(huì)增加患子宮內(nèi)膜癌的風(fēng)險(xiǎn)，此外,他莫昔芬對(duì)小鼠來(lái)說(shuō)是一種強(qiáng)有力的致肝癌物[18]。他莫昔芬-DNA加合物[19]可引起肝腫瘤，老鼠和人類肝臟微粒體可以催化他莫昔芬代謝活性中間體,使之與共價(jià)蛋白質(zhì)和DNA相結(jié)合，造成肝細(xì)胞損傷[20]。

他莫昔芬的基因毒性已經(jīng)經(jīng)由不同的測(cè)試系統(tǒng)進(jìn)行驗(yàn)證.Tucker等[21]觀察到他莫昔芬在艾姆斯測(cè)試中沒(méi)有致突變性，但他莫昔芬會(huì)以劑量依賴的方式顯著誘導(dǎo)MCL-5細(xì)胞中微核形成增加,而MCL-5細(xì)胞可以表達(dá)五個(gè)不同的人類細(xì)胞色素P450同功酶以及環(huán)氧化物水解酶。Wilson等[22]報(bào)道說(shuō)50μm的他莫昔芬會(huì)降低人類淋巴細(xì)胞的增殖,但它并不具有基因毒性。Sargent等[23]在觀察Sprague-Dawley老鼠時(shí)發(fā)現(xiàn)他莫昔芬可誘導(dǎo)基因的非整倍擴(kuò)增。Vijayalaxmi和Rai[24]通過(guò)進(jìn)行小鼠骨髓染色體畸變分析和微核測(cè)試研究了枸櫞酸他莫昔芬的基因毒性效應(yīng)。10d中以0.1、0.2、0.4和0.8mg/kg/d的劑量向老鼠體內(nèi)注射他莫昔芬，統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示他莫昔芬引起另外染色體的顯著畸變，同時(shí)也透露了其導(dǎo)致染色體斷裂的能力。Carmichael等[25]報(bào)道說(shuō)他莫昔芬沒(méi)有導(dǎo)致人類子宮內(nèi)膜細(xì)胞的DNA聚合，他同時(shí)還指出在小鼠中觀察到的他莫昔芬對(duì)細(xì)胞的基因毒性可能不適用于人類子宮內(nèi)膜細(xì)胞。他莫昔芬的染色體畸變實(shí)驗(yàn)是在六個(gè)人類淋巴母細(xì)胞系中測(cè)試了與特定的轉(zhuǎn)染人細(xì)胞色素相關(guān)的細(xì)胞色素P450 cDNA(CYP1A1,CYP1A2,CYP2D6,CYP2E1or CYP3A4)的活性，實(shí)驗(yàn)中與細(xì)胞色素基因相關(guān)聯(lián)的單氧酶表現(xiàn)出了活性的明顯增加。當(dāng)MCL-5細(xì)胞暴露于它莫昔芬環(huán)境中時(shí)，就可以觀察到細(xì)胞微核出現(xiàn)劑量依賴型增長(zhǎng)[26]。

2.3 托瑞米芬

托瑞米芬是一種非甾體雌激素拮抗劑，已經(jīng)在市面上被使用了20年。該藥物在高濃度（＞10-6mol/L）時(shí)對(duì)乳腺癌細(xì)胞具有殺滅作用，在較低濃度時(shí)可以抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、阻斷細(xì)胞從G0期到G1期的增殖周期[27]。托瑞米芬具有抗腫瘤活性，其作用機(jī)制為刺激轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β和表皮生長(zhǎng)因子的分泌、與抗雌激素結(jié)合位點(diǎn)相互作用、抑制蛋白激酶C的活性并結(jié)合鈣鍵合蛋白等[28]。托瑞米芬與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生沒(méi)有關(guān)聯(lián)[29]，它可以作為他莫昔芬的替代藥物用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌的治療[30]。

Styles等[31]研究了在人的類淋巴母細(xì)胞系（MCL5）中托瑞米芬和4-羥基托瑞米芬的致畸變和非整倍體誘發(fā)效果。用4-羥基托瑞米芬處理的MCL-5細(xì)胞出現(xiàn)微核形成增加的現(xiàn)象，而在用托瑞米芬處理后，染色體畸變（非整倍體）和結(jié)構(gòu)異常（不含空白）細(xì)胞的發(fā)生率顯著升高.Williams等[32]通過(guò)小鼠紅細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)評(píng)估托瑞米芬的遺傳毒性：在實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)選擇100～250 mg/mL不等濃度的托瑞米芬溶液，為了檢測(cè)其在體內(nèi)試驗(yàn)中的染色體毒性，對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠使用高達(dá)2g/kg的托瑞米芬灌胃，連續(xù)實(shí)施3d。Okuboa等[33]報(bào)道稱托瑞米芬和N-去甲基托瑞米芬均沒(méi)有造成pUC18質(zhì)粒DNA的損傷.托瑞米芬的細(xì)胞毒性已經(jīng)通過(guò)WST-1測(cè)試方法，經(jīng)由視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞系D407細(xì)胞進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果發(fā)現(xiàn)托瑞米芬存在細(xì)胞毒性[34]。Umemoto等[35]研究了托瑞米芬使乳腺癌患者白細(xì)胞中形成DNA加合物的能力。從27名服用托瑞米芬和20名未服用此藥物的乳腺癌患者中收集白細(xì)胞，經(jīng)由32P標(biāo)記的高效液相色譜分析發(fā)現(xiàn)，在托瑞米芬服用者和未服用者的白細(xì)胞中都沒(méi)有檢測(cè)到DNA加合物。

2.4 雷洛昔芬

雷洛昔芬，最初批準(zhǔn)用于絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥的治療和預(yù)防。雷洛昔芬可以抑制由雌激素誘導(dǎo)的乳腺癌組織增生，似乎可以防止高危婦女乳腺癌的發(fā)生[36]。與他莫昔芬不同，它由于缺乏乙基所以不與DNA反應(yīng)[37]。Goldstein等[38]報(bào)道說(shuō)雷洛昔芬不會(huì)增加子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率。Martino等[39]通過(guò)8年的臨床試驗(yàn)研究了雷洛昔芬的安全性，他們聲稱8年的臨床數(shù)據(jù)支持了雷洛昔芬是安全的這一觀點(diǎn)。

人們很少進(jìn)行雷洛昔芬的遺傳毒性的調(diào)查,只進(jìn)行了少數(shù)的研究。Rajaniemi[40]報(bào)道稱雷洛昔芬確實(shí)不會(huì)引起大鼠肝細(xì)胞DNA加合物的生成。Rodrigues等[41]對(duì)雷諾昔芬是否會(huì)導(dǎo)致雌性Wistar-Hannover大鼠中微核的形成進(jìn)行了研究，作者報(bào)告說(shuō)，雷洛昔芬不會(huì)引起微核的形成，而且它對(duì)嗜多染紅細(xì)胞中微核的形成具有抑制作用。

3 結(jié)論

選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑可以非常有效地治療和預(yù)防乳腺癌，同時(shí)也可以治療不育癥。他莫昔芬是預(yù)防乳腺癌的重要藥物，但長(zhǎng)期使用可引起副作用，尤其是造成子宮內(nèi)膜癌?？肆_米芬是治療不孕不育癥的主流藥物，但在使用時(shí)要考慮到它的基因毒性。托瑞米芬是一種雌激素拮抗劑，與他莫昔芬不同，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明它不會(huì)引起子宮內(nèi)膜癌。雷諾昔芬目前用于絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松的治療和預(yù)防以及用于高危婦女乳房癌的預(yù)防。關(guān)于雷洛昔芬的遺傳毒性信息很少，所以需要采用不同的試驗(yàn)方法進(jìn)行詳細(xì)的研究。我們的回顧表明，他莫昔芬、克羅米芬與雷洛昔芬、托瑞米芬相比具有更強(qiáng)的基因毒性。

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