劉 揚(yáng) 朱金秀

(大連市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心站，大連 116023)

有機(jī)錫化合物當(dāng)今已經(jīng)成為人們廣泛關(guān)注的一類環(huán)境污染物，主要是由于有機(jī)錫化合物是用途最廣、用量最大的有機(jī)金屬化合物，而且在環(huán)境中對(duì)生物具有特殊的毒性作用。有機(jī)錫主要用于塑料工業(yè)生產(chǎn)的穩(wěn)定劑和催化劑、各種殺蟲劑、除草劑、紡織品防霉以及海洋船只防污涂料中。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)每年大約有3000 噸三丁基錫等防污涂料進(jìn)入海洋，對(duì)海洋環(huán)境造成污染。有機(jī)錫對(duì)海洋魚類、甲殼類動(dòng)物、軟體動(dòng)物和海洋藻類的影響是非常大的，能干擾海洋生物內(nèi)分泌系統(tǒng)的正常機(jī)能，從而導(dǎo)致人類和其他野生動(dòng)物生殖系統(tǒng)產(chǎn)生障礙與疾?。?］。因此研究生物體中有機(jī)錫的存在形態(tài)及其準(zhǔn)確的測(cè)量方法對(duì)于掌握海洋生物中有機(jī)錫的污染狀況有著非常重要的意義。

近20年來，環(huán)境中有機(jī)錫的分析技術(shù)發(fā)展很快。由于有機(jī)錫既含有金屬元素，又具有有機(jī)物的性質(zhì)，因此常用的有機(jī)錫的檢測(cè)方法多采用氣相色譜與各種特征檢測(cè)器聯(lián)用，如GC－FPD、GC/MS、GC－ICP－MS 等。其中高效液相色譜－電感耦合等離子體質(zhì)譜(HPLC－ICP－MS)聯(lián)用技術(shù)以其操作簡(jiǎn)單、高靈敏度、快速而受到人們的重視［2］。本次工作采用文蛤、魚等海洋生物作為研究對(duì)象，用流動(dòng)相超聲萃取技術(shù)進(jìn)行樣品前處理，高效液相色譜－電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行有機(jī)錫的測(cè)定。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

1200 型高效液相色譜(美國(guó)Agilent 公司);7500ce電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(美國(guó)Agilent 公司);

實(shí)驗(yàn)用水均為經(jīng)超純水系統(tǒng)純化過的水;乙酸、三乙胺(優(yōu)級(jí)純?cè)噭?，科密歐公司生產(chǎn))，三甲基氯化錫(TMT)、二丁基氯化錫(DBT)、三丁基氯化錫(TBT)、二苯基氯化錫(DPT)、三苯基氯化錫(TPT)為產(chǎn)于德國(guó)的有機(jī)錫標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，甲醇、乙腈(色譜純?cè)噭?，德?guó)Merk 公司產(chǎn)品)。

1.2 儀器的工作參數(shù)

ICP－MS 工作條件及參數(shù):射頻功率:1600W;采樣深度:9.0mm;樣品錐:鉑錐;載氣流速:0.65L/min;補(bǔ)償氣流速:0.1L/min;選擇氣:O2/Ar 混合氣，其中O2的體積占30%;霧化室溫度:－5℃;進(jìn)樣系統(tǒng):有機(jī)專用(石英的T 接頭和有機(jī)專用炬管)。

液相色譜的工作條件及參數(shù):Agilent TC－C18 柱:250mm×416mm，5μm。流動(dòng)相:V(乙腈)∶V(水)∶V(乙酸)= 65∶23∶12，0.05% 的三乙胺;流速:0.5L/min;進(jìn)樣量10.0μL。

1.3 生物樣品的前處理

取生物體的可食部分，依次用去離子水和超純水洗凈后，再用紗布拭干水分，打碎均勻后，在超低溫冰箱中冷凍24h，然后置于凍干機(jī)冷凍干燥72h，充分干燥后粉碎成干粉儲(chǔ)存于密閉玻璃瓶中，冷凍保存。同時(shí)準(zhǔn)確記錄凍干前后重量，并由此獲得樣品水分含量［3－4］。

準(zhǔn)確稱取0.6g 凍干樣品，放在密閉的玻璃瓶中，分別加入9ml 流動(dòng)相，蓋上瓶蓋，放入超市超聲萃取20min，沉降2 個(gè)小時(shí)后，取上清液用0.22μm 有機(jī)濾膜過濾后備用［5］。

1.4 定性定量分析

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

準(zhǔn)確稱取TMT、DBT、TBT、DPT、TPT 的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，溶于色譜純的甲醇或乙腈中，配成1000mg/L 的儲(chǔ)備液。將儲(chǔ)備液用乙腈稀釋成適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)使用液。將有機(jī)錫標(biāo)準(zhǔn)使用溶液用流動(dòng)相分別稀釋成1.0、2.0、5.0、10.0、50.0、100.0、200.0μg/L 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別以5 種有機(jī)錫的濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線［6］。有機(jī)錫參考色譜圖如圖1 所示。

圖1 有機(jī)錫色譜圖

1.4.2 樣品的測(cè)定

取與標(biāo)準(zhǔn)工作液相同體積的樣品萃取液注入液相色譜儀進(jìn)行分離，電感耦合等離子體質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè)。以其標(biāo)準(zhǔn)溶液峰的保留時(shí)間定性，峰面積定量。

2 結(jié)果與討論

2.1 生物體中有機(jī)錫加標(biāo)回收率的測(cè)定

為進(jìn)一步驗(yàn)證該方法對(duì)生物體中有機(jī)錫提取的準(zhǔn)確性和可靠性，以文蛤樣品為基質(zhì)進(jìn)行加標(biāo)回收率測(cè)定。準(zhǔn)確稱取0.6g 凍干樣品，分別加入9μL 的100mg/L 的液體有機(jī)錫的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，吸附平衡后用9mL 流動(dòng)相超聲萃取20min，靜置后取上清液，用0.22μm 的有機(jī)濾膜過濾后備用［6］。加標(biāo)濃度為100μg/L，平行添加3 份樣品進(jìn)行加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)，五種有機(jī)錫化合物平均加標(biāo)回收率測(cè)定結(jié)果列于表1。

表1 五種有機(jī)錫化合物的平均加標(biāo)回收率

2.2 方法檢出限的確定

在與樣品測(cè)定相同的色譜條件下，準(zhǔn)確稱取0.6g凍干樣品，分別加入9μL 的5mg/L 的液體有機(jī)錫的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后與加標(biāo)回收率測(cè)定相同的前處理方法，平行測(cè)定7 個(gè)樣品，并用測(cè)定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差乘以t值(t=3.143)，求出方法的檢出限［7］。五種有機(jī)錫化合物的檢出限測(cè)定結(jié)果列于表2。

表2 五種有機(jī)錫的方法檢出限

3 結(jié) 論

采用超聲溶劑萃取和液相色譜與電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC－ICP－MS)分析技術(shù)，可以將生物體中的五種有機(jī)錫三甲基氯化錫(TMT)、二苯基氯化錫(DPT)、二丁基氯化錫(DBT)、三苯基氯化錫(TPT)、三丁基氯化錫(TBT)很好得分離并且準(zhǔn)確進(jìn)行定性定量測(cè)定，方法的回收率在50%～140% 之間，檢出限在0.1～0.7mg/kg 之間。但該方法中DPT 的回收率偏低。

［1］江桂斌．國(guó)內(nèi)外有機(jī)錫污染研究現(xiàn)．衛(wèi)生研究，2001，3(1):1－3．

［2］于振花，荊淼，王小如，陳登云，黃彥良．液液萃?。咝б合嗌V－電感耦合等離子體質(zhì)譜同時(shí)檢測(cè)海水中的多種有機(jī)錫．光譜學(xué)與光譜分析，2009，29(10):2855－2859．

［3］海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范第6 部分:生物體分析GB17378.6－2007．

［4］丘紅梅，張慧敏，申治國(guó)，黎雪慧，等．液相色譜與電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定海產(chǎn)品中的TPT．中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2008，18(11):2197－2203．

［5］于振花，荊淼，王庚，曹煊，丘紅梅，等．高效液相色譜－電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用同時(shí)檢測(cè)海產(chǎn)品中的多種有機(jī)錫．分析化學(xué)研究報(bào)告，2008，36(8):1035－1039．

［6］馬冰峰，郭嵐，雷曉康，柳英霞，萬益群．微波輔助提?。咝б合嗌V－電感耦合等離子體質(zhì)譜測(cè)定海產(chǎn)品中苯基錫化合物．分析科學(xué)學(xué)報(bào)，2014，30(6):858－862．

［7］崔彥杰，巢靜波，康天放，宋增良.高效液相色譜—電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定牡蠣中的有機(jī)錫．質(zhì)譜學(xué)報(bào)，2011，32(2):82－85．