王 剛，李桂榮，王躍進(jìn)，張朝紅

(西北農(nóng)林科技大學(xué) 園藝學(xué)院，旱區(qū)作物逆境生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)部西北地區(qū)園藝作物生物學(xué)與種質(zhì)創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，陜西 楊凌 712100)

無核葡萄胚挽救試管苗馴化移栽體系優(yōu)化

王 剛，李桂榮，王躍進(jìn)，張朝紅

(西北農(nóng)林科技大學(xué) 園藝學(xué)院，旱區(qū)作物逆境生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)部西北地區(qū)園藝作物生物學(xué)與種質(zhì)創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，陜西 楊凌 712100)

【目的】 研究煉苗移栽過程中生根粉溶液浸根時(shí)間、營(yíng)養(yǎng)液處理、開始通風(fēng)時(shí)間及遮陰處理對(duì)無核葡萄胚挽救苗煉苗及移栽的影響，探索胚挽救試管苗煉苗移栽技術(shù)?！痉椒ā?以2011年與2012年無核葡萄胚挽救雜交育種后代試管苗為材料，研究生根粉溶液浸根時(shí)間、煉苗過程中是否添加營(yíng)養(yǎng)液、揭開保濕罩時(shí)間以及移栽大田過程中遮陰對(duì)胚挽救苗煉苗及移栽的影響。【結(jié)果】 1.0 mg/L生根粉溶液浸泡根系3 min時(shí)植株各項(xiàng)生理指標(biāo)較好且成活率最高；移栽過程中添加1/8 MS營(yíng)養(yǎng)液一定程度上抑制了植株的長(zhǎng)勢(shì)；煉苗初期保濕時(shí)間為4 d時(shí)煉苗成活率最高；移栽至溫室或大田中時(shí)一定程度的遮陰處理有利于移栽成活率的提高與植株的生長(zhǎng)發(fā)育?！窘Y(jié)論】 無核葡萄胚挽救試管苗煉苗前生根粉浸根處理3 min、煉苗時(shí)添加1/8 MS營(yíng)養(yǎng)液、煉苗后4 d開始通風(fēng)以及移栽時(shí)進(jìn)行遮陰能提高胚挽救試管苗的生物積累量和成活率。

葡萄；試管苗；煉苗；移栽；胚挽救

胚挽救技術(shù)自應(yīng)用到無核葡萄育種以來一直備受關(guān)注，其有效地解決了無核葡萄育種中母本只能為有核品種的難題，極大地提高了后代無核的比率，加速了優(yōu)質(zhì)無核品種的選育進(jìn)程，尤其是隨著葡萄無核分子標(biāo)記的引入，育種初期便能有效地識(shí)別無核種質(zhì)，更進(jìn)一步提高了葡萄育種效率[1-4]。然而胚挽救試管苗在煉苗移栽過程中成活率較低的問題一直是無核葡萄胚挽救育種研究亟待解決的問題[5]。

試管苗由于長(zhǎng)期在恒溫、高濕、弱光、營(yíng)養(yǎng)豐富及水分充足的環(huán)境中生長(zhǎng)發(fā)育，其生理特性和組織結(jié)構(gòu)與大氣環(huán)境中生長(zhǎng)的植株有較大差別，如葉表面角質(zhì)層較薄，氣孔開度大，柵欄組織發(fā)育不完善，細(xì)胞間隙較大，且氣孔無開閉功能，因此煉苗移栽時(shí)易過度失水萎蔫，甚至干枯死亡[6-7]。本研究以2011年與2012年胚挽救雜交育種后代試管苗為材料，對(duì)移栽過程中生根粉溶液浸根時(shí)間、是否添加營(yíng)養(yǎng)液、開始通風(fēng)時(shí)間以及移栽大田過程中是否遮陰4個(gè)方面進(jìn)行了研究，以確定最佳的煉苗移栽方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試無核葡萄材料為2011年與2012年胚挽救雜交育種后代試管苗，雜交母本分別為火焰無核(Flame Seedless)、底來特(Delight)和赫什無核(Heshi Seedless)，試管苗株高6～8 cm，具有5～8片葉和4～6條根。試管苗在煉苗前1周增大光照強(qiáng)度，煉苗前1 d將瓶口的封孔膜適當(dāng)揭開一部分，使其適應(yīng)大氣中的氣體環(huán)境，為防止植株失水過多，將煉苗室內(nèi)的濕度調(diào)至90%，溫度調(diào)至26 ℃。

試管苗在移栽前長(zhǎng)期處在與室外隔絕的三角瓶?jī)?nèi)部環(huán)境中，瓶?jī)?nèi)的濕度及空氣組成與外界大氣有一定的差別。當(dāng)移入營(yíng)養(yǎng)缽時(shí)，可能因外界環(huán)境濕度較小導(dǎo)致葉片失水太快干枯而死，因此在移栽時(shí)將一個(gè)保濕杯罩在組培苗上方，設(shè)法使其保持較高濕度，之后逐漸增大植株與外界的接觸面積，最終完全去除保濕罩。

煉苗及移栽過程中所用材料：品氏泥炭(Pindstrup Plus Peat Substrate,300 L)、MS粉(Phyto Technology Laboratories)、珍珠巖、蛭石，育苗營(yíng)養(yǎng)缽(10 cm×10 cm)，乙醇(分析純)，丙酮(分析純)。ABT4號(hào)生根粉配制成終質(zhì)量濃度為1.0 mg/L溶液。移栽所用基質(zhì)由泥炭、珍珠巖與蛭石按體積比1∶1∶1混合而成，每升基質(zhì)加200 mL的自來水，混合均勻后裝入自封袋密封，高壓滅菌50 min。將配制好的1×MS溶液高溫滅菌30 min后，用蒸餾水稀釋成1/8的MS備用。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 生根粉浸根時(shí)間對(duì)試管苗的影響 移入營(yíng)養(yǎng)缽前將試管苗根部浸泡在配制的1.0 mg/L生根粉溶液中浸泡0(僅用蒸餾水浸泡)，1和3 min，分別處理42株、172株和49株。待完全去除保濕罩3周后，每個(gè)處理選取3株統(tǒng)計(jì)其株高、節(jié)數(shù)及莖葉和根的干鮮質(zhì)量，重復(fù)3次取平均值。去除保濕罩8周后統(tǒng)計(jì)最終植株的成活率，評(píng)估生根粉浸根時(shí)間對(duì)試管苗發(fā)育及移栽成活率的影響。

成活率=成活株數(shù)/煉苗株數(shù)×100%。

1.2.2 營(yíng)養(yǎng)液處理對(duì)試管苗煉苗期間營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)的影響 試管苗移入營(yíng)養(yǎng)缽后分別設(shè)加1/8 MS營(yíng)養(yǎng)液處理與不加任何營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)處理(對(duì)照)，加營(yíng)養(yǎng)液的處理共計(jì)76株，不加營(yíng)養(yǎng)液的處理共計(jì)91株，待完全去除保濕罩后，每個(gè)處理選擇5株連續(xù)7周測(cè)量株高與節(jié)數(shù)，評(píng)估1/8 MS營(yíng)養(yǎng)液對(duì)試管苗煉苗過程中植株生長(zhǎng)發(fā)育的影響。

1.2.3 開始通風(fēng)時(shí)間對(duì)煉苗成活率的影響 本試驗(yàn)分別從移栽后第4,7,10天開始逐漸揭開保濕罩使其通風(fēng)透氣，并增大植株與大氣環(huán)境的接觸面積，待完全揭開保濕罩后1周統(tǒng)計(jì)煉苗成活率，評(píng)估開始通風(fēng)時(shí)間對(duì)煉苗成活率的影響。

1.2.4 遮陰對(duì)試管苗葉片葉綠素含量及成活率的影響 幼苗在煉苗室中生長(zhǎng)8周，待莖部開始木質(zhì)化后移去營(yíng)養(yǎng)缽直接定植到溫室或大田。試驗(yàn)設(shè)遮陰與不遮陰(對(duì)照)2個(gè)處理，每個(gè)處理選取3個(gè)具有代表性的植株，分別在移入溫室當(dāng)天(0 d)與移栽后第7天在同一品系上采集從上往下第3～4節(jié)上的健康葉片，測(cè)定其葉綠素含量。葉綠素含量測(cè)定采用丙酮-乙醇直接浸提法[8]。移栽10周后統(tǒng)計(jì)遮陰與不遮陰條件下移栽成活株數(shù)并計(jì)算成活率。

2 結(jié)果與分析

2.1 生根粉溶液浸泡時(shí)間對(duì)試管苗的影響

由表1可見，生根粉溶液浸根時(shí)間對(duì)試管苗根系干質(zhì)量的影響明顯，生根粉溶液浸泡3 min時(shí)對(duì)根干質(zhì)量有顯著促進(jìn)作用。生根粉溶液浸根處理能顯著提高試管苗根系的生物量，增強(qiáng)根系的吸水及養(yǎng)分的能力，有效提高煉苗移栽成活率。隨生根粉溶液浸根時(shí)間延長(zhǎng)，株高、節(jié)數(shù)、莖葉鮮質(zhì)量、莖葉干質(zhì)量、根鮮質(zhì)量、根干質(zhì)量均呈增大趨勢(shì)，但除根干質(zhì)量在浸泡3 min時(shí)有顯著促進(jìn)作用外，其他均差異不顯著。表明生根粉浸根時(shí)間越長(zhǎng)，越有利于無核葡萄胚挽救試管苗煉苗過程中生物量的增加和成活率的提高。

表1 生根粉浸根時(shí)間對(duì)無核葡萄胚挽救試管苗生長(zhǎng)發(fā)育及煉苗成活率的影響Table 1 Effects of ABT soak time on growth and surviving rate of seedless grape embryo rescue tube plantlets

注：標(biāo)*的為Duncan新復(fù)極差法檢驗(yàn)結(jié)果差異顯著。

Note:* means significantly different according to Duncan multiple range test.

2.2 營(yíng)養(yǎng)液對(duì)煉苗期間試管苗營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)的影響

由圖1可以看出，添加營(yíng)養(yǎng)液的試管苗(處理)無論是株高還是節(jié)數(shù)均低于不加營(yíng)養(yǎng)液的試管苗(對(duì)照)，這一定程度上反映出添加營(yíng)養(yǎng)液反而不利于試管苗營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)。一元線性回歸分析顯示，添加營(yíng)養(yǎng)液的株高回歸線斜率(斜率：2.362 92；截距：3.851 73)小于對(duì)照(斜率：5.323 02；截距：1.022 43)，而添加營(yíng)養(yǎng)液試管苗的節(jié)數(shù)回歸線斜率(斜率：1.609 48；截距：2.969 99)卻高于對(duì)照(斜率：1.515 53；截距：4.026 57)，表明添加1/8 MS營(yíng)養(yǎng)液抑制株高的生長(zhǎng)，且增加節(jié)間數(shù)量，有利于試管苗的壯苗。添加營(yíng)養(yǎng)液對(duì)試管苗成活率無明顯影響，對(duì)照組成活率為86.81%，加營(yíng)養(yǎng)液的成活率為86.84%。

圖1 營(yíng)養(yǎng)液對(duì)無核葡萄胚挽救試管苗長(zhǎng)勢(shì)的影響
Fig.1 Effects of nutrition on growth of seedless grape embryo rescue tube plantlets

2.3 開始通風(fēng)時(shí)間對(duì)煉苗成活率的影響

試管苗生長(zhǎng)在高濕封閉的環(huán)境中，使植物角質(zhì)膜變薄，柵欄組織細(xì)胞層數(shù)減少而體積增大，海綿組織相對(duì)較多，細(xì)胞間隙較大，不利于組織對(duì)水分的保持[9]，因此煉苗之時(shí)需保持較高的濕度，以防植株失水過快而萎蔫死亡。由表2可以看出，開始通風(fēng)時(shí)間越早，試管苗成活率越高，導(dǎo)致這種現(xiàn)象的一個(gè)重要原因是長(zhǎng)期高濕環(huán)境會(huì)增加病原菌的滋生，且試管苗此時(shí)角質(zhì)膜較薄容易受侵染[10]，故通風(fēng)時(shí)間越晚其發(fā)病越嚴(yán)重，煉苗成活率也越低。

表2 開始通風(fēng)時(shí)間對(duì)無核葡萄胚挽救試管苗成活率的影響Table 2 Effects of lid off time on survival rate of seedless grape embryo rescue tube plantlets

2.4 遮陰對(duì)試管苗移栽葉片葉綠素含量及成活率的影響

由表3可以看出，遮陰條件下，移栽后0 d葉綠素a的含量低于7 d后的含量；不遮陰條件下，移栽后0 d葉綠素a的含量要高于7 d后的含量；移栽7 d后葉綠素b含量較移栽0 d時(shí)有明顯的上升，移栽0 d時(shí)遮陰處理的葉綠素b含量低于不遮陰處理的含量，移栽7 d后遮陰條件下的葉綠素b含量要明顯高于不遮陰的處理；移栽7 d后葉綠素a/b低于移栽0 d，因此遮陰處理可以避免試管苗葉片葉綠體灼傷。

表3 遮陰對(duì)無核葡萄胚挽救試管苗葉綠素含量及成活率的影響Table 3 Effects of shade treatment on content of chlorophyll and surviving rate of seedless grape embryo rescue tube plantlets

由表3可見，遮陰條件下的移栽成活率明顯高于不遮陰條件。這主要是由于不遮陰條件下植株的蒸騰速率大于遮陰條件下，且在移栽過程中根系的損傷導(dǎo)致植株因水分無法及時(shí)供應(yīng)而過度失水。

3 討 論

3.1 生根粉浸泡時(shí)間對(duì)煉苗過程中生根及成活的影響

根系是植物體的重要組成部分，具有固定、吸收水分養(yǎng)分、合成和貯藏營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的功能[11]，發(fā)達(dá)的根系對(duì)植物正常的生長(zhǎng)發(fā)育及適應(yīng)不同環(huán)境具有重要作用。生根粉的主要成分為生長(zhǎng)素類生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，而生長(zhǎng)素能夠調(diào)控側(cè)根根原基的形成，能夠促進(jìn)植物側(cè)根和不定根的發(fā)生和生長(zhǎng)，并且側(cè)根的發(fā)生與伸長(zhǎng)都直接或間接依賴生長(zhǎng)素的調(diào)控作用[12]。

本研究結(jié)果表明，0～3 min生根粉浸泡處理，浸泡的時(shí)間越長(zhǎng)試管苗的成活率越高，生根效果越好。前人對(duì)甘蔗[13]、毛白楊[14]的研究也得出相同的結(jié)論。生長(zhǎng)素誘導(dǎo)植物生長(zhǎng)只有在特定時(shí)間內(nèi)才有效果，超過特定的時(shí)間對(duì)植株便會(huì)產(chǎn)生抑制作用，而在此之前則一直是正效應(yīng)狀態(tài)[15]。本研究顯示，試管苗根系在受生根粉溶液誘導(dǎo)3 min時(shí)仍處于促進(jìn)生根的時(shí)間段，因此3 min浸泡處理的根系干質(zhì)量差異顯著。因浸泡3 min處理的植株生根較好，且發(fā)達(dá)的根系有助于植株生長(zhǎng)的發(fā)育，其株高、節(jié)數(shù)、莖葉鮮質(zhì)量以及根系干鮮質(zhì)量較對(duì)照、生根粉溶液浸根1 min處理有一定提高。

3.2 營(yíng)養(yǎng)液對(duì)煉苗期間試管苗營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)的影響

本研究表明，添加1/8 MS營(yíng)養(yǎng)液無助于長(zhǎng)勢(shì)的提高，一定程度上還抑制了植株的長(zhǎng)勢(shì)。李桂榮[16]研究發(fā)現(xiàn)，1/8 MS營(yíng)養(yǎng)液處理試管苗的成活率最高，不加營(yíng)養(yǎng)液的對(duì)照成活率最低，唐冬梅也得出類似的研究結(jié)果[17]。然而本研究發(fā)現(xiàn)，1/8 MS營(yíng)養(yǎng)液與對(duì)照處理移栽成活率方面無差異。這是因?yàn)?，在試管苗移栽初期因移栽過程中根系受損嚴(yán)重，根系吸收水分與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力弱，易出現(xiàn)失水癥狀；再者因其長(zhǎng)期生長(zhǎng)在弱光、高濕與封閉的環(huán)境中，根系木質(zhì)化程度低[9]，使試管苗根系處在一個(gè)相對(duì)高鹽低滲透勢(shì)的環(huán)境中，過多鹽離子干擾了植物體根系的離子動(dòng)態(tài)平衡[12]，根系通過抑制和誘導(dǎo)多種酶系統(tǒng)來影響植物的新陳代謝[18],導(dǎo)致植株根系受到干旱脅迫[19]，因此生長(zhǎng)速度較不加營(yíng)養(yǎng)液的植株慢。后期因基質(zhì)中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被不斷消耗，部分植株生長(zhǎng)至第8周到第9周時(shí)出現(xiàn)缺素癥狀，此時(shí)若向基質(zhì)中添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，則有利于植株的生長(zhǎng)。

3.3 開始通風(fēng)時(shí)間對(duì)煉苗成活率的影響

本研究結(jié)果顯示，開始揭蓋時(shí)間越早越有利于煉苗成活率的提高。煉苗是一個(gè)使試管苗提前適應(yīng)環(huán)境的過程，植物在這個(gè)階段角質(zhì)膜不斷加厚，柵欄組織細(xì)胞層數(shù)逐漸增加而其細(xì)胞體積相對(duì)縮小，同時(shí)其細(xì)胞間隙也相應(yīng)縮小[9]。煉苗之時(shí)加保濕蓋使植株處在一個(gè)高濕、密閉且多菌的環(huán)境，這一方面使其擁有一個(gè)相對(duì)濕度較高的環(huán)境，以免其失水過度，但同時(shí)這樣的環(huán)境極易產(chǎn)生次生病害，較早揭開保濕蓋可有效降低植株所處環(huán)境的濕度，減小病原菌的萌發(fā)速率及其危害[20]。說明較早的經(jīng)常性通風(fēng)能使植株較早且更快地接觸外界環(huán)境，加速煉苗進(jìn)程。

3.4 遮陰對(duì)胚挽救試管苗移栽的影響

葉綠素a是光合作用的中心色素，它起著光能捕捉和電荷分離的雙重作用，葉綠素b則是天線色素，負(fù)責(zé)光能吸收和傳遞，因此葉片內(nèi)葉綠素a含量的多少直接影響植株的生長(zhǎng)發(fā)育，同時(shí)也反映出其對(duì)環(huán)境的適應(yīng)程度。植物受到強(qiáng)光照射并同時(shí)存在環(huán)境脅迫時(shí)，葉綠體內(nèi)光合作用固定CO2和吸收光能的平衡會(huì)被打破，導(dǎo)致光能過剩積累[21]。光能過剩所激發(fā)的電子通過Mechler反應(yīng)傳遞給O2形成超氧陰離子自由基(O2·)，在超氧化物歧化酶作用下生成H2O2，H2O2與O2·反應(yīng)生成·OH，當(dāng)活性氧積累到一定程度后，由其引起的膜脂過氧化會(huì)破壞葉綠體結(jié)構(gòu)，最終使葉片失綠，嚴(yán)重時(shí)甚至壞死[22]。

本研究發(fā)現(xiàn)，遮陰條件下植株的葉綠素含量及成活率較對(duì)照處理有明顯提高。前人研究發(fā)現(xiàn)，弱光條件下總?cè)~綠素含量增加，其中葉綠素b含量增加較多[23]，葉綠素a/b比值下降[24]，這是植物對(duì)弱光環(huán)境的一種適應(yīng)性反應(yīng)[25]。本研究中，葉綠素 a/b 移栽后0 d高于7 d，而高光強(qiáng)下植株葉綠素 a/b 值會(huì)逐漸降低[23]，這表明植株先前所處環(huán)境的光照強(qiáng)度小于溫室中遮陰條件下的光照強(qiáng)度，說明自然條件下的光照強(qiáng)度要遠(yuǎn)高于煉苗所處環(huán)境的光強(qiáng)。加之移栽過程中出現(xiàn)斷根等現(xiàn)象，根系吸收水分及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能力較弱，導(dǎo)致植株吸收水分速率不及蒸騰速率而失水過度甚至死亡。因此移栽到大田的過程需要在陰天進(jìn)行，同時(shí)加遮陽網(wǎng)。

[1] Cain D W,Emershad R L,Tarallo R E.In-ovuloembryo culture and seedling development of seeded and seedless grapes (VitisviniferaL.) [J].Vitis,1983,22:9-14.

[2] Gray D J,Fisher L C,Mortensen J A,et al.Comparison of methodologies forinovuloembryo rescue of seedless grapes [J].Hort Sci,1987,22:1334-1335.

[3] Loomis N H,Weinberger J H.Inheritance studies of seedlessness in grapes [J].J Amer Soc Hort Sci,1979,104:181-184.

[4] Striem M J，Hayyim G B，Roy P S.Identifying molecular genetic markers associated with seedlessness in grape [J].J Amer Soc Hort Sci,1996,121(5):758-763.

[5] 潘學(xué)軍,王躍進(jìn),張劍俠,等.葡萄胚挽救苗移栽技術(shù)研究 [J].西北植物學(xué)報(bào),2004,24(6):1077-1082.

Pan X J,Wang Y J,Zhang J X,et al.Study on transplanting techniques of grape seedlings from embryo rescue [J].Acta Bot Boreal-Occidentalia Sinica,2004,24(6):1077-1082.(in Chinese)

[6] 柏新富,張 萍,蔣小滿,等.一品紅組培苗移栽期葉片生理變化與解剖變化 [J].林業(yè)科學(xué),2005,41(6):170-173.

Bai X F,Zhang P,Jiang X M,et al.Changes of leaf physiology and anatomy of poinsettia plantlet in transplantation [J].Scientia Silvae Sinicae,2005,41(6):170-173.(in Chinese)

[7] 曹孜義,季 唯,強(qiáng)維亞,等.葡萄試管苗在移栽過程中葉解剖和根系活力的變化 [J].果樹學(xué)報(bào),1992，92(2):81-86.

Cao Z Y,Ji W,Qiang W Y,et al.Changes of leaf anatomy and root activity of grape plantletsinvitroduring transfer acclimatization [J].Journal of Fruit Science,1992,92(2):81-86.(in Chinese)

[8] 高俊鳳.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) [M].北京:高等教育出版社,2006.

Gao J F.The experimental guide for plant physiology [M].Beijing:China Higher Education Press,2006.(in Chinese)

[9] Chartzoulakis K,Patskas A,Kofidis G,et al.Water stress affects leaf anatomy,gas exchange,water relations and growth of two acocado cultivars [J].Hort Sci,2002,95:39-50.

[10] Martin M P,Junjper P E.Ultrastructure of leisons produced by cercosporabeticola in leaves ofBetavulgaris[J].Physiological Plant Pathology,1979,15:13-26.

[11] Hodge A,Berta G,Doussan C,et al.Plant root growth,architecture and function [J].Plant Soil,2009,321:153-187.

[12] Péret B,Rybel B D,Casimiro I,et al.Arabidopsislateral root development:An emerging story [J].Trends Plant Sci,2009,14:399-408.

[13] 秦昌鮮,莫周美,唐君海,等.生根粉對(duì)甘蔗組培苗移栽的影響 [J].中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè),2013(1):50-51.

Qin C X,Mo Z M,Tang J H,et al.ABT impact on sugarcane plantlets transplanted [J].China Tropical Agriculture,2013(1):50-51.(in Chinese)

[14] 張紅梅,孫 毅,杜建忠,等.超聲波、生長(zhǎng)素和浸泡時(shí)長(zhǎng)對(duì)毛白楊插穗生根率的影響 [J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,38(3):34-38.

Zhang H M,Sun Y,Du J Z,et al.Effects of ultrasonication,auxins and soaking time to the rooting rate ofPopulustomentosacuttings [J].Journal of Shanxi Agricultural Sciences,2010,38(3):34-38.(in Chinese)

[15] Bialek K,Meudt W J,Cohen J D.Indole-3-acetic acid(IAA) and IAA conjugates applied to bean stem sections [J].Plant Physiology,1983,73:130-134.

[16] 李桂榮.無核葡萄胚胎發(fā)育的生理特性和胚挽救育種技術(shù)的研究 [D].陜西楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2013.

Li G R.Studies on physiological characteristics of embryo development and breeding techniques on embryo rescue in seedless grapes [D].Yangling,Shaanxi:Northwest A&F University,2013.(in Chinese)

[17] 唐冬梅.無核葡萄雜交胚挽救新種質(zhì)創(chuàng)建與技術(shù)完善 [D].陜西楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2010.

Tang D M.Novel germplasm innovation of seedless grapes by embryo rescue and technique improvement [D].Yangling,Shaanxi:Northwest A&F University,2013.(in Chinese)

[18] Greenway H,Munns R.Mechanisms of salt tolerance in nonhalophystes [J].Annual Review of Plant Physiology,1980,23:149-190.

[19] 李建超,王學(xué)臣.水分脅迫下細(xì)胞延伸生長(zhǎng)與細(xì)胞膨壓和細(xì)胞壁特性的關(guān)系 [J].植物生理學(xué)通訊,1998,34(3):161-167.

Li J C,Wang X C.The relationship between plant cell elongation and wall properties under water deficits [J].Plant Physiology Journal,1998,34(3):161-167.(in Chinese)

[20] Brown G E.Factors affecting postharvest development of collectotrichum gloeosporioides inCitrusfruits [J].Phytopathology,1974,65:404-409.

[21] 楊廣東,朱祝軍,計(jì)玉妹.不同光強(qiáng)和缺鎂脅迫對(duì)黃瓜葉片葉綠素?zé)晒馓匦院突钚匝醍a(chǎn)生的影響 [J].植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào),2002,8(1):115-118.

Yang G D,Zhu Z J,Ji Y M.Effect of light intensity and magnesium deficiency on chlorophyll fluorescence and active oxygen in cucumber leaves [J].Plant Nutrition and Fertlizer Science,2002,8(1):115-118.(in Chinese)

[22] Cakmak I.Activities of ascorbate-dependent H2O2-scavenging enzymes and leaf chlorosis are enhanced in magnesium- and potassium-deficient leaves,but not in phosphorus-deficient leaves [J].J Exp Bot,1994,45:1259-1266.

[23] 李 偉,黃金麗,眭曉雷,等.黃瓜幼苗光合及熒光特性對(duì)弱光的響應(yīng) [J].園藝學(xué)報(bào),2008,35(1):119-122.

Li W,Huang J L,Sui X L,et al.Effects of low light on photosynthetic and fluorescent characteristics of seedlings ofCucumissativus[J].Acta Horticulturae Sinica,2008,35(1):119-122.(in Chinese)

[24] Bailey S,Walters R G,Jansson S,et al.Acclimation ofArabidopsisthalianato the light environment:The existence of separate low light and high light responses [J].Planta,2000,213:794-801.

[25] 眭曉雷,毛勝利,王立浩,等.弱光條件下辣椒幼苗葉片的氣體交換和葉綠素?zé)晒馓匦?[J].園藝學(xué)報(bào),2007,34(3):615-622.

Sui X L,Mao S L,Wang L H,et al.Effect of low light intensity of gas exchange and chlorophyll fluorescence characteristics of capsicum seedlings [J].Acta Horticulturae Sinica,2007,34(3):615-622.(in Chinese)

Optimization of acclimatization system for embryo rescue tube plantlets of seedless grape

WANG Gang,LI Gui-rong,WANG Yue-jin,ZHANG Chao-hong

(CollegeofHorticulture,KeyLaboratoryofBiologyandGeneticImprovementofHorticulturalCrops(NorthwestRegion),MinistryofAgriculture,P.R.China,KeyLaboratoryofCropStressBiologyinAridAreas,NorthwestA&FUniversity,Yangling,Shaanxi712100,China)

【Objective】 Effects of ABT soak time,nutrition,lid off period and shade treatment on embryo rescue seedling and transplantation were studied to improve the embryo rescue seedling transplant technique.【Method】 The hybrid progeny tube plantlets of seedless grape through embryo rescue in 2011 and 2012 were selected to study the effects of ABT soak time,nutrition,lid off period and shade treatment on growth and survival rate of embryo rescue seedling in domestication.【Result】 The survival rate and growth of plants were best with 1.0 mg/L ABT solution soaking for 3 min.The growth of tube plantlets was inhibited after irrigating 1/8 MS nutrient solution.Survival rate of domestication was highest with lid off 4 days after hardening.Shade treatment after transplant promoted growth and improved survival rate.【Conclusion】 Bioaccumulation and survival rate of seedless grape embryo rescue tube plantlets were highest when soaking root in ABT for 3 min,adding 1/8 MS nutrient solution during hardening,and starting ventilation 4 d after hardening with shade treatment.

Vitis;tube plantlets;domestication;transplant;embryo rescue

2014-01-01

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31372023)；國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-30-yz-7)；陜西省農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目(2013K01-28)

王 剛(1989-)，男，山西應(yīng)縣人，在讀碩士，主要從事鮮食無核葡萄胚挽救育種工作。E-mail:wanggang827@126.com

張朝紅(1970-)，男，陜西丹鳳人，副教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事果樹種質(zhì)資源與生物技術(shù)育種研究。 E-mail:zhangchaohong@nwsuaf.edu.cn

時(shí)間:2015-06-30 13:47

10.13207/j.cnki.jnwafu.2015.08.011

S663.103.8

A

1671-9387(2015)08-0153-06

網(wǎng)絡(luò)出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/61.1390.S.20150630.1347.011.html