孫寧寧 王子健 高祥 程欣 孫萬春 楊靜波 劉寧
摘 要 蛋白質(zhì)組學研究所面臨的首要問題就是蛋白質(zhì)組的樣品制備, 而不同的樣品制備方案針對細胞、組織等樣品的裂解能力, 以及對不同種類蛋白的溶解能力會有很大的差異。本研究以培養(yǎng)的293T細胞為對象, 利用質(zhì)譜分析鑒定蛋白的方法, 比較了采用3種常用的蛋白質(zhì)組樣品制備方法(Triton X100法、尿素法和TRIzol法)所提取蛋白種類的差異, 并利用生物信息學工具對所得數(shù)據(jù)進行了分析。結(jié)果表明, Triton X100法和尿素法所提取蛋白的鑒定數(shù)目接近, 而TRIzol法所提取蛋白的鑒定數(shù)目比二者減少約8%。從所鑒定的蛋白種類來看, 3種方法相差較大, 僅約有32%的蛋白為3種方法所共有, 生物學功能也不盡相同。本研究為評價各種蛋白質(zhì)組樣品制備方法提供了一種快速、有效、全面的研究方法。
關(guān)鍵詞 蛋白質(zhì)組; 樣品制備; 尿素; 曲拉通 X100; TRIzol; 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用endprint