夏紅安，劉穎，魯小龍

廣安市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，四川 廣安638001

SY SMEX X T-4000i血液分析儀應(yīng)用性能評(píng)價(jià)

夏紅安，劉穎，魯小龍

廣安市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，四川 廣安638001

目的 對(duì)SYSMEX XT-4000i血液分析儀的性能進(jìn)行驗(yàn)證及評(píng)價(jià)。方法 使用臨床常規(guī)血液、體液標(biāo)本和儀器配套質(zhì)控物對(duì)XT-4000i的本底計(jì)數(shù)、攜帶污染率、精密度（批內(nèi)、日間）、線性范圍、準(zhǔn)確度，儀器間的比對(duì)等分析性能進(jìn)行驗(yàn)證和評(píng)價(jià)。結(jié)果 XT-4000i測(cè)定的本底計(jì)數(shù)均低于廠商設(shè)計(jì)規(guī)定的要求；XT-4000i檢測(cè)血液標(biāo)本白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白含量、血小板4項(xiàng)，其攜帶污染率低，精密度、線性范圍、準(zhǔn)確度均良好，其白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)與顯微鏡分類具有相關(guān)性；XT-4000i 檢測(cè)體液標(biāo)本白細(xì)胞、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞分類與手工法檢測(cè)結(jié)果具有較高的相關(guān)性。結(jié)論 XT-4000i血液分析儀性能良好，可以較好地滿足臨床常規(guī)血液標(biāo)本及體液標(biāo)本的檢測(cè)要求。

血液分析儀；性能評(píng)價(jià)；體液細(xì)胞檢測(cè)；質(zhì)量控制

臨床血液學(xué)檢驗(yàn)是臨床和實(shí)驗(yàn)室最常規(guī)、最基礎(chǔ)的一項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目，全血細(xì)胞分析的準(zhǔn)確與否對(duì)臨床醫(yī)生判斷疾病及治療非常重要。SYSMEX XT-4000i血液分析儀（下稱XT-4000i）是日本SYSMEX公司生產(chǎn)的一臺(tái)性能較高、自動(dòng)化程度較強(qiáng)的五分類血液分析儀，同時(shí)該儀器增加了體液細(xì)胞的分析模式，使體液常規(guī)的細(xì)胞檢測(cè)成為可能，為了驗(yàn)證其可靠性，本研究依照國(guó)家相關(guān)行業(yè)文件對(duì)儀器進(jìn)行分析評(píng)價(jià)，現(xiàn)報(bào)告如下：

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 測(cè)定樣品

定值樣本采用SYSMEX公司配套的樣品，日間精密度測(cè)試樣品采用公司配套的高值和低值室內(nèi)質(zhì)控品，每日開機(jī)后先使用配套質(zhì)控物進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，室內(nèi)質(zhì)控在控后，測(cè)定樣本。攜帶污染、批內(nèi)精密度、線性范圍、準(zhǔn)確度和比對(duì)試驗(yàn)均使用患者EDTA-K2抗凝的新鮮靜脈全血（BD真空采血管采集靜脈血3 mL，采血后迅速輕輕顛倒混勻6～8次，2 h內(nèi)完成檢測(cè)），體液標(biāo)本準(zhǔn)確度使用30例體液標(biāo)本（腦脊液10例、腹水10例、胸水10例，標(biāo)本無凝塊、不粘稠）。

1.1.2 儀器與試劑

XT-4000i及其原裝配套試劑、校準(zhǔn)物和質(zhì)控物；經(jīng)校準(zhǔn)后符合要求的XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套試劑；OLYMPUS CX21顯微鏡；瑞氏染液按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第3版）[1]要求配制。

2 方法

2.1 本底檢測(cè)

每次開機(jī)后，查看儀器的本底檢測(cè)結(jié)果。

2.2 攜帶污染率（CR）實(shí)驗(yàn)[2]

分別針對(duì)WBC、 RBC、HGB、PLT4個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)，按CLSI EP102A文件要求，在儀器穩(wěn)定狀態(tài)下，取1份高值樣本連續(xù)測(cè)定3次，所得檢測(cè)值依次為H1、H2、H3，接著取1份低值樣本連續(xù)測(cè)定3次，所得檢測(cè)值依次為L(zhǎng)1、L2、L3。按公式計(jì)算：CR =|（L1-L3）|/（H3-L3）×100%。

2.3 精密度分析[2]

2.3.1 批內(nèi)精密度

取正常濃度水平樣本和醫(yī)學(xué)決定水平樣本（低值）兩個(gè)水平的樣本，按常規(guī)方法在儀器上連續(xù)檢測(cè)20次，計(jì)算20次的算術(shù)平均值和標(biāo)準(zhǔn)差，計(jì)算變異系數(shù)即為批內(nèi)精密度。

2.3.2 日間精密度

使用高值、中值和低值的室內(nèi)質(zhì)控品，每日至少檢測(cè)1次，連續(xù)檢測(cè)20天，計(jì)算在控?cái)?shù)據(jù)的變異系數(shù)即為日間精密度。

2.4 準(zhǔn)確度分析[2]

2.4.1 全血細(xì)胞計(jì)數(shù)（CBC）

實(shí)驗(yàn)材料為SYSMEX公司提供的定值標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（SCS-1000），連續(xù)測(cè)定4次后取均值，計(jì)算相對(duì)偏差。

2.4.2 白細(xì)胞分類

選取30例非血液科、非腫瘤科住院患者新鮮抗凝全血標(biāo)本，應(yīng)用XT-4000i對(duì)每份標(biāo)本重復(fù)檢測(cè)2次，取五分類均值；顯微鏡分類[1]，每份樣本推血片2張，由2人選擇血片體尾之間區(qū)域細(xì)胞分布均勻處使用油鏡，各計(jì)數(shù)200個(gè)白細(xì)胞，分別取其平均值，與XT-4000i五分類均值結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性比對(duì)。

2.5 線性范圍

選取1份接近預(yù)期上限的高值全血樣本，用同源血小板血漿按100%、80%、60%、40%、20%比例依次稀釋，每個(gè)稀釋度樣本分別重復(fù)測(cè)定3次，計(jì)算測(cè)定結(jié)果的均值，將實(shí)測(cè)值與理論值作比較（偏差＜10%），驗(yàn)證線性范圍[3]。

2.6 比對(duì)實(shí)驗(yàn)[2]

以校準(zhǔn)后符合要求的XE-2100為參考儀器，XT-4000i 和XE-2100分別檢測(cè)涵蓋各醫(yī)學(xué)決定水平的新鮮抗凝全血樣本共30例，樣本均在2 h內(nèi)完成檢測(cè)。比較WBC、RBC、HGB、PLT，對(duì)每一項(xiàng)參數(shù)確定其相關(guān)系數(shù)和線性回歸方程，相關(guān)性檢驗(yàn)應(yīng)用配對(duì)t檢驗(yàn)，并且計(jì)算P值。

2.7 體液標(biāo)本準(zhǔn)確度分析

2.7.1 XT-4000i計(jì)數(shù)與分類

30例體液標(biāo)本（腦脊液10例，腹水10例，胸水10例，標(biāo)本無凝塊，不粘稠），每例標(biāo)本連續(xù)測(cè)定2次后取均值。

2.7.2 手工計(jì)數(shù)與分類

檢測(cè)方法嚴(yán)格按照第3版《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》，采用標(biāo)準(zhǔn)的改良牛鮑計(jì)數(shù)板在顯微鏡下計(jì)數(shù)體液標(biāo)本的紅、白細(xì)胞，透明或微渾的標(biāo)本直接沖池計(jì)數(shù)，渾濁的標(biāo)本根據(jù)情況用生理鹽水稀釋后計(jì)數(shù)RBC；WBC用0.2%冰醋酸稀釋后計(jì)數(shù)，所有細(xì)胞均計(jì)上下10個(gè)大方格總數(shù)。所有標(biāo)本在1 h內(nèi)與XT-4000i同時(shí)檢測(cè)。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析與結(jié)果

運(yùn)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3.1 本底計(jì)數(shù)

XT-4000i本底檢測(cè)結(jié)果顯示每次本底檢測(cè)計(jì)數(shù)均達(dá)到廠商設(shè)計(jì)規(guī)定的要求。

3.2 攜帶污染率（CR）實(shí)驗(yàn)

WBC、RBC、HGB和PLT的CR分別為：0.1%、0.31%、0.59%和0.18%，均遠(yuǎn)低于判定標(biāo)準(zhǔn)，滿足衛(wèi)生部臨檢中心要求的標(biāo)準(zhǔn)[3]，全部合格，見表1。

表1 XT-4000i全血細(xì)胞分析儀攜帶污染率的測(cè)定結(jié)果

3.3 精密度分析

3.3.1 批內(nèi)精密度

批內(nèi)精密度檢測(cè)結(jié)果見表2。對(duì)正常濃度水平樣本檢測(cè)各項(xiàng)目的批內(nèi)精密度均在允許范圍內(nèi)，符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)醫(yī)學(xué)決定水平樣本檢測(cè)各項(xiàng)目的批內(nèi)精密度也均符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，見表3。

表2 XT-4000i對(duì)正常濃度水平樣本進(jìn)行檢測(cè)的批內(nèi)精密度結(jié)果

表3 XT-4000i對(duì)醫(yī)學(xué)決定水平（低值）樣本進(jìn)行檢測(cè)的批內(nèi)精密度結(jié)果

3.3.2 日間CV

對(duì)高、中和低值質(zhì)控物檢測(cè)各項(xiàng)目的日間精密度均符合衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，見表4。

表4 對(duì)高、中和低值質(zhì)控物進(jìn)行檢測(cè)的日間精密度結(jié)果

3.4 準(zhǔn)確度分析

3.4.1 全血細(xì)胞計(jì)數(shù)

XT-4000i五項(xiàng)主要檢測(cè)指標(biāo)其相對(duì)偏差均符合WS/ T406-2012衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，見表5。

表5 XT-4000i對(duì)CBC檢測(cè)的準(zhǔn)確度結(jié)果

3.4.2 白細(xì)胞分類

以顯微鏡法為金標(biāo)準(zhǔn)，XT-4000i測(cè)定的白細(xì)胞分類比值與鏡檢法比較，得出各自的回歸方程和相關(guān)系數(shù)。其中，中性粒細(xì)胞（N）、淋巴細(xì)胞(L)、單核細(xì)胞（M）、嗜酸性粒細(xì)胞（E）和嗜堿性粒細(xì)胞（B）的相關(guān)系數(shù)分別為0.993、0.987、0.914、0.898和0.812。

3.5 線性范圍

WBC、RBC、HGB和PLT線性范圍評(píng)價(jià)結(jié)果見表6。行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)：a≤1±0.05、r≥0.975，均符合CLSI H26-A2行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。

表6 XT-4000i的線性范圍評(píng)價(jià)結(jié)果

3.6 血液標(biāo)本比對(duì)實(shí)驗(yàn)

以XE-2100系統(tǒng)作為參考儀器，XT4000檢測(cè)結(jié)果與其進(jìn)行相關(guān)與回歸分析，得出兩臺(tái)儀器各參數(shù)的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)，見表7。各項(xiàng)目的相關(guān)系數(shù)r均＞0.99，說明回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠。

表7 血液標(biāo)本比對(duì)試驗(yàn)結(jié)果

3.7 體液標(biāo)本比對(duì)實(shí)驗(yàn)

以手工法檢測(cè)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)計(jì)數(shù)值將RBC（×106/L）分為3個(gè)濃度水平，I：100～1000；II：1001～100000；III：>100000。為便于統(tǒng)計(jì)分析未收集RBC＜100×106/L的標(biāo)本。WBC（×106/L）分為3個(gè)水平，I：1～50；II：51～100；III：>100。其計(jì)數(shù)分析結(jié)果見表8。

表8 體液標(biāo)本比對(duì)試驗(yàn)結(jié)果

4 討論

選擇性能良好的檢測(cè)系統(tǒng)或方法是保證患者檢驗(yàn)結(jié)果可靠性的重要前提，檢測(cè)系統(tǒng)或方法的分析性能評(píng)價(jià)是臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理的重要內(nèi)容。ISO15189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專用要求》（下稱ISO15189要求）參加認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室，在開展某一檢測(cè)項(xiàng)目前，需提供并保留相關(guān)的方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；美國(guó)頒布的臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)的最終法規(guī)（CLIA′88 Final Rule）明確要求：每個(gè)實(shí)驗(yàn)室在引入未作修改的、FDA認(rèn)可或批準(zhǔn)的檢測(cè)系統(tǒng)時(shí)，在報(bào)告患者檢測(cè)結(jié)果前，必須作性能指標(biāo)的確認(rèn)。本實(shí)驗(yàn)室依照國(guó)家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于血液分析儀的性能要求及驗(yàn)證方法的明確規(guī)定，參考ISO 15189要求并結(jié)合儀器實(shí)際性能，探討并制定了針對(duì)Sysmex XT-4000i血液分析儀性能驗(yàn)證方案，供同行參考。

檢測(cè)系統(tǒng)最主要性能為精密度、準(zhǔn)確度、線性報(bào)告范圍和攜帶污染率等。對(duì)XT-4000i評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，攜帶污染率均＜1.00%的標(biāo)準(zhǔn)要求；批內(nèi)精密度和日間精密度變異系數(shù)（CV%）在國(guó)家衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定范圍內(nèi)＜CLIA′88指標(biāo)規(guī)定；正確度結(jié)果顯示各偏差均＜1/2 CLIA′88允許總誤差；線性范圍內(nèi)WBC、RBC、HGB、PLT測(cè)定值與理論值相關(guān)系數(shù)均＞0.999，線性及相關(guān)良好；在血液標(biāo)本比對(duì)分析中，XT-4000i與XE-2100相比較，主要參數(shù)的相關(guān)系數(shù)均＞0.99，相關(guān)性良好。XT-4000i對(duì)白細(xì)胞分類檢測(cè)與鏡檢法比較，N、L符合率最高，其次是M、E，B相對(duì)較差。分析其原因：① 不同種類白細(xì)胞在外周血出現(xiàn)比例差異較大，B最少（參考值為0%～1%），數(shù)據(jù)變異較大；② 人工鏡檢法計(jì)數(shù)量遠(yuǎn)低于儀器計(jì)數(shù)量，且單核細(xì)胞的形態(tài)變異較多，儀器不易分辨[5]，儀器計(jì)數(shù)時(shí)還會(huì)出現(xiàn)單核細(xì)胞與中性桿狀核粒細(xì)胞相混淆現(xiàn)象。

XT-4000i帶有體液模式，可直接對(duì)各種體液標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)了體液標(biāo)本的自動(dòng)化。利用XT-4000i檢測(cè)體液標(biāo)本中的細(xì)胞，與手工計(jì)數(shù)相比具有較好的相關(guān)性，但是對(duì)于細(xì)胞數(shù)較少的標(biāo)本，兩種方法的結(jié)果差異較大。分析其原因：① 細(xì)胞分布不均，所計(jì)數(shù)的標(biāo)本用量較少；② 儀器本身檢測(cè)范圍的基數(shù)設(shè)計(jì)可能不適用于細(xì)胞數(shù)太少的標(biāo)本。XT-4000i設(shè)定的WBC檢測(cè)限為0.001×109/L～99.999×109/L，對(duì)應(yīng)手工法的檢測(cè)限為1×106/ L～99999×106/L，故WBC本底值為1×106/L，儀器對(duì)RBC設(shè)定的檢測(cè)參數(shù)低限為0.001×1012/L，但是研究參數(shù)低限為0.0001×1012/L，對(duì)應(yīng)手工檢測(cè)低限為100×106/L。故建議低細(xì)胞數(shù)標(biāo)本應(yīng)手工鏡檢。XT-4000i對(duì)體液細(xì)胞的檢測(cè)有很高的應(yīng)用價(jià)值,但是尚不能完全代替手工計(jì)數(shù)，兩者應(yīng)相互結(jié)合，以便對(duì)臨床提供更準(zhǔn)確的參考信息。

總之，XT-4000i具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值[6-7]，其攜帶污染率低、精密度、準(zhǔn)確度、線性及可比性良好，能滿足臨床實(shí)驗(yàn)室常規(guī)血液標(biāo)本的檢測(cè)，其對(duì)白細(xì)胞較多的體液標(biāo)本可部分代替人工鏡檢進(jìn)行計(jì)數(shù)及分類。對(duì)于血液五分類結(jié)果可能會(huì)受到患者本身細(xì)胞狀態(tài)影響，需結(jié)合儀器報(bào)警及人工顯微鏡分類后再綜合評(píng)估。

[1] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子渝.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006.

[2] WS/T406-2012,臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求[S].

[3] CLSI.alidation.Verification,and Quality of Automated Hematology. lyzers.CLSI document H26-A2[S]. Wayne,Pa.:Clinical and Laboratory Standards Insyitute.2010.

[4] YY/T0653-2008,血液分析儀[S].

[5] Amundsen EK, Henriksson CE, Holthe MR, Urdal P. Is the blood basophil count sufficiently precise, accurate, and specific?: three automated hematology instruments and flow cytometry compared[J]. Am J Clin Pathol. 2012 Jan;137(1):86-92.

[6] 白雪.X T-400i多功能全自動(dòng)細(xì)胞分析儀在體液細(xì)胞檢測(cè)中與手工法的應(yīng)用比較[J].中國(guó)醫(yī)療設(shè)備,2012,27(1):75-76.

[7] 孫穎.多臺(tái)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)試結(jié)果比對(duì)及相關(guān)性分析[J].基層醫(yī)學(xué)論壇,2012,(1):86-87.

Application Performance Evaluation of SYSMEX XT-4000i Hematology Analyzer

XIA Hong-an, LIU Ying, LU Xiao-long
Clinical laboratory, The People’s Hospital Guang’an City, Guang’an Si chuan 638001, China

Objective To test and evaluate the performance of SYSMEX XT-4000i hematology analyzer. Methods Clinical blood samples, body fluid samples and quality control materials were used to test and evaluate the background counting, contamination rate, precision (within-run precision, within-day precision), linear range, accuracy, and the contrast between XT-4000i machines. Results The background counting tested by XT-4000i was lower than the specified requirements designed by the manufacturer. Using the XT-4000i to test the WBC, RBC, HGB and PLT has advantages of low contamination rate, and high precision, linear range and accuracy, as well as strong correlation between differential leukocyte counting and microscope classification. The results of testing the WBC, RBC and differential leukocyte manual counting by XT-4000i are highly related. Conclusion The XT-4000i hematology analyzer has good performance to meet the requirements of clinical routine detections of blood and body fluid samples.

hematology analyzer; performance assessment; body fl uid detection; quality control

R197.39；TH776

B

10.3969/j.issn.1674-1633.2015.01.037

1674-1633(2015)01-0114-04

2014-08-06

作者郵箱：xiahongan@126.com