李小剛

摘要：為了探討冬藏對(duì)插穗內(nèi)含物的影響，尋找寧夏枸杞扦插的適宜采條時(shí)期，為寧夏枸杞扦插育苗提供理論依據(jù)，該研究設(shè)冬藏與留樹(shù)兩種處理，并研究不同處理對(duì)可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白質(zhì)、游離脯氨酸、過(guò)氧化物酶（POD） 、多酚氧化酶（PPO）、吲哚乙酸氧化酶（IAAO）、單寧等8個(gè)內(nèi)含物指標(biāo)的影響。研究表明：冬藏會(huì)降低插穗內(nèi)的游離脯氨酸、可溶性糖、淀粉、蛋白質(zhì)等的含量和POD、PPO、IAAO等酶的活性，增加單寧含量。因而會(huì)降低插穗的成活率和新梢生長(zhǎng)量。插穗留樹(shù)有利于插穗的成活和新梢快速生長(zhǎng)。研究表明寧夏枸杞硬枝扦插適宜的采條時(shí)期是春季萌動(dòng)前。

關(guān)鍵詞：冬藏；內(nèi)含物；插穗；萌芽

中圖分類號(hào)：S351.5+9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1004-3020（2015）06-0017-03

寧夏枸杞Lycium barbarum 茄科Solanaceae寧夏枸杞屬中唯一一種鹽生植物，具有抗旱、耐鹽等特點(diǎn)，且是我國(guó)傳統(tǒng)名貴中藥材之一，具有藥食同源的功效，在我國(guó)當(dāng)前西部生態(tài)建設(shè)和鹽堿地改良中具有很高的經(jīng)濟(jì)開(kāi)發(fā)潛力和生態(tài)價(jià)值。

寧夏枸杞育苗方法很多，有種子育苗、器官育苗、根孽育苗、組織培養(yǎng)育苗等。硬枝扦插育苗具有保持母本優(yōu)良性狀、結(jié)果早、產(chǎn)量高，苗木繁育速度快、栽植成活率高等優(yōu)點(diǎn)[3]。寧夏枸杞主要的栽培方式是扦插，而插穗能否生根是成活的關(guān)鍵[4]。人們通常在冬季把插穗進(jìn)行儲(chǔ)藏，以促進(jìn)愈傷組織的形成，提高第二年扦插的成活率，增加產(chǎn)量，提高收益。

近年來(lái)，許多學(xué)者做了以插穗枝條的部位、插穗粗度、試驗(yàn)品種、不同濃度、不同藥劑處理等的相關(guān)研究[5-6]，而在冬藏及插穗內(nèi)含物等方面的研究較缺乏。為了尋找寧夏枸杞扦插的適宜采條時(shí)期，為寧夏枸杞扦插育苗提供理論依據(jù)，本試驗(yàn)進(jìn)行冬藏對(duì)插穗內(nèi)含物的影響。

1試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本次研究以甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院苗圃地里寧夏枸杞‘寧杞1號(hào)1 a生枝條為試驗(yàn)材料，于2015年1月中旬采集插穗，設(shè)寧夏枸杞插條冬藏（在2015年1月中旬開(kāi)始冬藏）與留樹(shù)（插穗在2015年3月采集）兩個(gè)處理。冬藏2個(gè)月后測(cè)定插穗中的可溶性糖、可溶性淀粉、游離蛋白質(zhì)、游離脯氨酸、過(guò)氧化物酶（POD） 、多酚氧化酶（PPO）、吲哚乙酸氧化酶（IAAO）、單寧等8個(gè)指標(biāo)。3月上旬在試驗(yàn)地（栽培基質(zhì)）布設(shè)扦插試驗(yàn)。扦插后，每種處理選擇50株作為調(diào)查對(duì)象，于5月20日統(tǒng)計(jì)萌芽率，測(cè)量新梢生長(zhǎng)量，分析兩個(gè)處理之間插穗內(nèi)含物的變化，探討冬藏對(duì)插穗內(nèi)含物及扦插成活與生長(zhǎng)的影響，找出適宜的采條時(shí)期。

2試驗(yàn)方法

本次研究以室內(nèi)試驗(yàn)為主，并結(jié)合室外測(cè)量、統(tǒng)計(jì)分析的方法?？扇苄蕴菧y(cè)定采用蒽酮比色法[7]；可溶性淀粉測(cè)定采用酶-比色法[8]；游離蛋白質(zhì)測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)-G250法[9]；游離脯氨酸測(cè)定采用酸性茚三酮比色法[10]；過(guò)氧化物酶（POD）測(cè)定采用愈創(chuàng)木酚比色法[10]；多酚氧化酶（PPO）測(cè)定采用鄰苯二酚比色法[11]；吲哚乙酸氧化酶（IAAO）測(cè)定采用氧化吲哚乙酸法[12]；單寧測(cè)定采用檸檬酸鐵銨比色法 [13] 。

3結(jié)果與討論

3.1冬藏對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量的影響

插穗在生根過(guò)程中，利用較多的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是碳水化合物和氮素化合物。碳水化合物和氮素化合物不僅是生根和生長(zhǎng)不可缺少的，也是插穗在生根前維持其生長(zhǎng)的重要能源[14]。游離脯氨酸除了作為植物細(xì)胞質(zhì)內(nèi)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)外，還在穩(wěn)定生物大分子結(jié)構(gòu)、降低細(xì)胞酸性、解除氨毒以及作為能量庫(kù)調(diào)節(jié)細(xì)胞氧化還原勢(shì)等方面起重要作用。由表1可知：冬藏處理插穗中的可溶性糖含量、游離蛋白質(zhì)含量、游離脯氨酸含量、淀粉含量分別是留樹(shù)處理的4968%，9712%，3567%，9921%。均低于留樹(shù)處理。其中，游離脯氨酸含量和可溶性糖含量極顯著低于留樹(shù)處理。由于冬藏過(guò)程中插穗為了維持插穗本身的生命特征要進(jìn)行呼吸作用，而呼吸作用就會(huì)大量消耗插穗中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，會(huì)降低插穗中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量，即會(huì)降低插穗的成活率和新梢生長(zhǎng)量。留樹(shù)枝條由于外界氣溫很低，樹(shù)液的流動(dòng)很慢，呼吸作用很弱，對(duì)插穗中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗相對(duì)冬藏較低。

3.2冬藏對(duì)酶類物質(zhì)活性的影響

IAAO、PPO和POD是目前公認(rèn)的與不定根關(guān)系最密切的三種酶類[15]。Ahuja 等研究指出，植物插條的 POD 活性關(guān)系到其愈傷組織形成能力的大小，植物體內(nèi)的 IAAO 活性與插條的愈傷組織形成有重要聯(lián)系，可作為愈傷組織形成能力高低的評(píng)價(jià)指標(biāo)。Al Bazari等通過(guò)組織化學(xué)鑒定的方法研究發(fā)現(xiàn)，PPO 位于植物插條不定根的起源部位，對(duì)不定根的發(fā)生和發(fā)展起著重要的作用。由表2可知：冬藏處理插穗中的POD活性、PPO活性、IAAO活性分別是留樹(shù)處理的2964%，4871%，4302%，均極顯著低于留樹(shù)處理，所以冬藏處理會(huì)降低測(cè)定酶類的活性，即不利于插穗的成活和快速生長(zhǎng)。

很早以前有關(guān)學(xué)者就認(rèn)為難生根樹(shù)種插條內(nèi)存在阻礙生根的物質(zhì)。對(duì)難生根樹(shù)種插條浸提液進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)其中大多數(shù)都含有酸性物質(zhì)，可能類似于有機(jī)酸、單寧或相關(guān)成分。生根的難易程度與淀粉和單寧的含量有關(guān)。淀粉含量比單寧含量高的樹(shù)種，一般容易生根，反之則難生根，這說(shuō)明單寧含量對(duì)生根不利。從表3可知：冬藏處理插穗單寧含量是留樹(shù)的399倍，極顯著高于留樹(shù)處理，這可能是由于插穗為了抵御多種細(xì)菌、真菌和微生物的侵害，避免插穗腐爛，而單寧對(duì)于細(xì)菌、真菌和微生物有明顯的抑制能力。冬藏處理的淀粉/單寧比值小于1，且僅為留樹(shù)處理（3648 2）的1/4，不利于不定根的形成；而留樹(shù)處理極有利于插穗生根。冬藏會(huì)顯著提高單寧含量，降低淀粉/單寧，即會(huì)降低插穗的成活率和新梢生長(zhǎng)量。

3.4冬藏對(duì)插穗萌芽與新梢生長(zhǎng)的影響

圖1不同處理的插穗平均萌芽率、新梢生長(zhǎng)量

由圖1可看出：冬藏處理插穗的萌芽率、新梢生長(zhǎng)量分別是留樹(shù)插穗的555%，717%，均極顯著低于留樹(shù)處理。冬藏會(huì)降低插穗萌芽率、新梢生長(zhǎng)量。結(jié)果與冬藏對(duì)插穗內(nèi)含物的影響一致。

4結(jié)論

4.1冬藏對(duì)插穗內(nèi)含物的影響

通過(guò)冬藏對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量、保護(hù)性酶類活性、單寧含量的影響進(jìn)行分析得出：冬藏會(huì)降低插穗內(nèi)的游離脯氨酸、可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白質(zhì)等的含量和POD、PPO、IAAO等酶的活性，增加單寧含量。即會(huì)降低插穗的成活率和新梢生長(zhǎng)量。

4.2適宜的采條時(shí)期

插穗留樹(shù)與冬藏相比游離脯氨酸、可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白質(zhì)等的含量和POD、PPO、IAAO等酶的活性均高，單寧含量顯著的低。有利于插穗的成活和新梢快速生長(zhǎng)。即寧夏枸杞硬枝扦插適宜的采條時(shí)期是春季萌動(dòng)前。

參考文獻(xiàn)

[1]匡可任，路安民. 中國(guó)植物志：茄科[M].北京：科學(xué)出版社，1978：2427.

[2]何方.中國(guó)經(jīng)濟(jì)林名優(yōu)產(chǎn)品圖志[M].北京：中國(guó)林業(yè)出版社，2001：4951.

[3]孫麗霞，成蓓王，冬梅.藥食兼用種子果實(shí)類中藥材植物種植技術(shù)[M].北京：中國(guó)林業(yè)出版社，2001： 151153.

[4]俞建中，潘學(xué)琴，曾鶴云，等.稻茬田中寧寧夏枸杞硬枝扦插育苗技術(shù)[J].寧夏農(nóng)林科技，2007，（2）：108109.

[5]張德純，王德檳.不同基質(zhì)及生根粉對(duì)菜用寧夏枸杞扦插苗生長(zhǎng)的影響[J].蔬菜，1999，（9），3132.

[6]戢小梅，陳法志，張勝三，等.生根劑對(duì)寧夏枸杞扦插苗生長(zhǎng)的影響[J].湖北林業(yè)科技，2008，（5），3435.

[7]陳毓荃.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)[M].北京：科學(xué)出版社，2002：7882.

[8] GB/T 5009.9-2008中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn).食品中淀粉的測(cè)定方法[S]，北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2009：112.

[9]王孝平，邢樹(shù)禮.考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的研究[J].天津化工，2009，23（3），4041.

[10]李玲.植物生理學(xué)模塊實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京：科學(xué)出版社.2009：6568.

[11]張憲政，陳鳳玉，王榮富.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].沈陽(yáng)：遼寧科學(xué)技術(shù)出版社， 1994：9192.

[12]GB/T 15686-2008 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn).高粱 單寧含量的測(cè)定[S]. 北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008：13.

[13]中國(guó)科學(xué)院上海植物生理研究所，上海市植物生理學(xué)會(huì).現(xiàn)代植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南[M]. 北京：科學(xué)出版社，1999：96101.

[14]陳泗維，徐繼忠.莖插條不定根的起源與發(fā)育[J].河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1987，10（3）：86～89.

[15]曹幫華，扈紅軍，張大鵬，等.桑樹(shù)硬枝扦插生根能力及其生根關(guān)聯(lián)酶活性的研究[J].蠶業(yè)科學(xué)，2008，34（1）：96100.

（責(zé)任編輯：鄭京津）