李萌博，丁 輝

急性高原病發(fā)病前后血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體水平變化

李萌博1，丁 輝2

目的 探討人群急進(jìn)高原前后血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和受體VEGFR-1(fms-like tyrosine kinase-1，flt-1)、VEGFR-2(fetal liver kinase-1/kinase insert domain-containing receptor，flk-1/KDR)的表達(dá)變化及其與急性高原病(acute mountain sickness, AMS)發(fā)病的關(guān)系，為發(fā)現(xiàn)和保護(hù)易感人群提供理論依據(jù)。方法 以2000名健康新兵為研究對(duì)象，分別在急進(jìn)高原前后抽取靜脈血備用。以癥狀評(píng)分法調(diào)查急進(jìn)高原后AMS的發(fā)病率，隨機(jī)選取20名AMS發(fā)病對(duì)象為AMS組，20名未發(fā)病對(duì)象為對(duì)照組，采用 ELISA法檢測(cè)急進(jìn)高原前后兩組血漿VEGF、 VEGFR-1、VEGFR-2濃度的變化。結(jié)果 2000名研究對(duì)象中AMS的發(fā)病率為34.3%。與平原地區(qū)相比，AMS組急進(jìn)高原后血漿VEGF濃度明顯升高且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.799，P=0.011)，血漿VEGFR-1和VEGFR-2濃度無(wú)明顯變化；對(duì)照組急進(jìn)高原后血漿VEGF、VEGFR-1和VEGFR-2濃度變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。急進(jìn)高原前后AMS組血漿VEGF濃度均明顯高于對(duì)照組(t=2.461，P=0.018;t=2.698，P=0.010)，而血漿VEGFR-1、VEGFR-2濃度與對(duì)照組相比均無(wú)明顯差異。結(jié)論 血漿 VEGF濃度有可能作為一個(gè)敏感指標(biāo)在急進(jìn)高原前篩選AMS易感者，而血漿VEGFR-1、VEGFR-2濃度與AMS的發(fā)生無(wú)相關(guān)性。

急性高原??；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；受體

AMS是指從平原進(jìn)入海拔2500 m以上高原地區(qū)，暴露于低氧環(huán)境所產(chǎn)生的病理反應(yīng)，臨床上常見(jiàn)的癥狀有頭痛、失眠、胸悶、呼吸困難、食欲減退、惡心、嘔吐及疲乏無(wú)力等。所處海拔高度、上升速度及個(gè)體易感性等多種因素都可能影響到AMS的發(fā)病。部分重癥患者可能發(fā)展成為高原肺水腫( high altitude pulmonary edema, HAPE)或高原腦水腫( high altitude cerebral edema, HACE)，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡。長(zhǎng)期以來(lái)，AMS嚴(yán)重威脅著由平原進(jìn)駐高原人群的健康，成為制約高原經(jīng)濟(jì)建設(shè)和社會(huì)發(fā)展的最主要障礙。因此在急進(jìn)高原前，將AMS易發(fā)人群挑選出來(lái)，有針對(duì)性地加以預(yù)防十分必要。近年來(lái)，有關(guān)血漿VEGF與AMS關(guān)系的研究頗多，主要集中在AMS發(fā)病后對(duì)體內(nèi)VEGF水平的變化觀察，而有關(guān)AMS患者在進(jìn)入高原前后體內(nèi)VEGF水平變化的研究尚不多。筆者通過(guò)研究急進(jìn)高原前后AMS患者及耐受者的血漿VEGF及VEGFR-1，VEGFR-2濃度的對(duì)比觀察，探索其與AMS發(fā)生的關(guān)系及其對(duì)AMS發(fā)病的預(yù)測(cè)價(jià)值。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 選擇湖南、云南、四川、山東籍漢族男性入藏新兵2000名，入伍地海拔均低于2000 m，年齡18～22歲。所有對(duì)象從各入伍地乘坐火車(chē)抵達(dá)四川省成都市(海拔506 m)集結(jié)，休整5 d后分批空運(yùn)至西藏自治區(qū)拉薩市(海拔3658 m)。

1.2 方法 分別在成都和拉薩對(duì)所有觀察對(duì)象進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查并采集靜脈血備用。根據(jù)問(wèn)卷調(diào)查結(jié)果使用Lake Louise標(biāo)準(zhǔn)[1](表1)進(jìn)行癥狀評(píng)分和診斷，從Lake Louise評(píng)分≥3分者中隨機(jī)抽取20名對(duì)象為AMS患者組，從評(píng)分<3分者中隨機(jī)選取20名對(duì)象為對(duì)照組。使用深圳欣博盛生物科技有限公司的人血漿VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2 ELISA試劑盒檢測(cè)兩組靜脈血血漿VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2的濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析，計(jì)量資料用描述；同一指標(biāo)高原與平原總體均數(shù)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，兩組間總體均數(shù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 急性高原病國(guó)際Lake Louise診斷標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié) 果

2.1 AMS發(fā)病率 本次研究共回收合格問(wèn)卷1876份，有效回收率93.8%。根據(jù)Lake Louise標(biāo)準(zhǔn)，診斷為AMS的有644名，耐受者1232名，AMS發(fā)病率為34.3%(644/1876)。

2.2 急進(jìn)高原前后血漿VEGF及VEGFR-1、VEGFR-2濃度的變化 與平原地區(qū)相比，AMS組急進(jìn)高原后血漿VEGF濃度明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.799，P=0.011)，而對(duì)照組急進(jìn)高原后血漿VEGF濃度無(wú)明顯變化(t=1.126，P=0.274)；血漿VEGF濃度AMS組急進(jìn)高原前后均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.461，P=0.018;t=2.698，P=0.010)。與平原地區(qū)相比，AMS組和對(duì)照組急進(jìn)高原后血漿VEGFR-1濃度均無(wú)明顯變化(t=-0.573，P=0.597；t=0.380，P=0.708)；血漿VEGFR-1的濃度AMS組急進(jìn)高原前后與對(duì)照組相比均無(wú)明顯差異(t=1.508，P=0.140；t=0.941，P=0.353)。與平原地區(qū)相比，AMS組和對(duì)照組急進(jìn)高原后血漿VEGFR-2濃度均無(wú)明顯變化(t=-0.403，P=0.691；t=-0.449，P=0.659)；血漿VEGFR-2的濃度AMS組急進(jìn)高原前后與對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=0.046，P=0.964；t=-0.160，P=0.874)。見(jiàn)表2。

組別血漿VEGF濃度平原高原血漿VEGFR-1濃度平原高原血漿VEGFR-2濃度平原高原對(duì)照組166.8±71.7191.5±108.51126.7±412.21170.7±442.62107.8±238.62071.8±266.6AMS組240.8±113.5②306.6±157.1①②1410.2±733.11344.6±697.42101.3±589.02054.4±406.2

注：對(duì)照組為未發(fā)生AMS的對(duì)象，AMS組為發(fā)生AMS的對(duì)象；①與平原地區(qū)相比，P<0.05；②與對(duì)照組相比，P<0.05

3 討 論

AMS是由平原進(jìn)入高原地區(qū)人群的常見(jiàn)病，發(fā)病率為15%～80%[2,3]。其發(fā)病的具體機(jī)制尚不明確，目前普遍認(rèn)為進(jìn)入高原低氧環(huán)境后，機(jī)體組織器官缺氧，低氧誘導(dǎo)因子-1生成增多，誘導(dǎo)VEGF基因表達(dá)增加，導(dǎo)致血液中VEGF水平升高，VEGF與血管壁上的VEGFR-2相結(jié)合后，作用于內(nèi)皮細(xì)胞膜上的緊密連接蛋白(occludin)，使胞內(nèi)結(jié)構(gòu)發(fā)生磷酸化，繼而水解該蛋白，破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接，致使血管通透性增高，最終引起腦、肺等組織水腫，導(dǎo)致AMS發(fā)生[4-6]。

本此研究AMS發(fā)病率為34.3%，研究中所有對(duì)象觀察時(shí)間為進(jìn)入高原后24～48 h，因此可能遺漏了一些發(fā)病較晚的患者；另外，有些新入伍的戰(zhàn)士對(duì)于研究目的不完全清楚，可能存在隱瞞病情的情況。因此AMS的實(shí)際發(fā)病率可能略高于本次的觀察結(jié)果。本研究結(jié)果與之前的研究結(jié)論大致相同。

VEGF是一類可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞增生的蛋白，有6個(gè)亞型：VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E 和 PIGF。VEGF-A即通常所指的VEGF，是一種缺氧誘導(dǎo)蛋白，主要生物學(xué)作用是促進(jìn)血管增生，同時(shí)，VEGF-A也是一種能夠增加血管通透性的因子，與受體結(jié)合后會(huì)引起血管滲漏[7]。目前的研究認(rèn)為其在AMS的發(fā)病中發(fā)揮著重要作用，其強(qiáng)度不僅與血液中自身濃度有關(guān)，而且與其兩個(gè)重要受體VEGFR-1和VEGFR-2濃度直接相關(guān)。

關(guān)于血漿VEGF的濃度，國(guó)內(nèi)報(bào)道多見(jiàn)關(guān)于AMS患者與耐受者在高原地區(qū)的對(duì)比，或由高原海拔較低處到更高海拔的水平變化，而對(duì)于急進(jìn)高原前后血漿VEGF濃度的變化，目前鮮有報(bào)道。多數(shù)研究結(jié)果顯示，在高原地區(qū)AMS患者血漿VEGF濃度與耐受者相比較高，并且其濃度與AMS嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。國(guó)外的相關(guān)報(bào)道多見(jiàn)于對(duì)登山者的研究，Tissot van Patot等[8]觀察顯示，在高原環(huán)境下，AMS患者的血漿VEGF水平明顯高于健康受試者，認(rèn)為血漿VEGF的增加可能與AMS發(fā)病密切相關(guān)。同樣，Walter等[9]觀察了登山者由低海拔(490 m)到達(dá)高海拔(4559 m)地區(qū)24 h后血漿VEGF的變化，結(jié)果顯示到達(dá)高海拔地區(qū)后血漿VEGF濃度升高，但VEGF與AMS評(píng)分、平均肺動(dòng)脈壓、動(dòng)脈血氧分壓和肺泡-動(dòng)脈O2梯度之間均不存在相關(guān)性，認(rèn)為血漿VEGF的變化可能與AMS的發(fā)生無(wú)直接關(guān)聯(lián)。而華明磊[10]的結(jié)論則相反，認(rèn)為進(jìn)入高原后血漿VEGF濃度降低。另外，其他一些研究結(jié)果顯示，兩者無(wú)明顯差異[11]。筆者認(rèn)為這可能與影響外周血VEGF測(cè)定濃度的因素較多有關(guān)，如性別、種族、年齡、基礎(chǔ)身體狀況、服藥情況、樣本大小、進(jìn)入高原的時(shí)間、采血時(shí)海拔高度、標(biāo)本保存時(shí)間、檢測(cè)方法等。

本研究結(jié)果顯示，急進(jìn)高原后AMS組血漿VEGF水平與平原地區(qū)相比明顯升高，而對(duì)照組無(wú)明顯變化，說(shuō)明VEGF可能是AMS的重要致病因素，也證明高原低氧環(huán)境對(duì)VEGF表達(dá)的刺激存在個(gè)體差異。本研究中AMS組患者在平原狀態(tài)下(即AMS未發(fā)病時(shí))血漿VEGF濃度即高于對(duì)照組，說(shuō)明對(duì)于AMS患者血漿高水平的VEGF表達(dá)可能是其易感因素。因而提示血漿VEGF濃度有可能作為一個(gè)敏感指標(biāo)在進(jìn)入高原之前篩選AMS易感者。

VEGF有兩個(gè)受體，分別是VEGFR-1和VEGFR-2。兩者主要在內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)。目前普遍認(rèn)為，缺氧和VEGF都會(huì)引起這兩種受體表達(dá)的上調(diào)，但缺氧誘導(dǎo)其表達(dá)的程度較VEGF弱。Tissot van Patot等[8]在一項(xiàng)對(duì)20名志愿者的研究中，無(wú)論平原還是高原地區(qū)，AMS患者血漿VEGFR-1水平均較習(xí)服者低，認(rèn)為在低海拔地區(qū)，較低的受體水平可作為AMS發(fā)病的預(yù)警機(jī)制。而Schommer等[12]觀察了31名進(jìn)入海拔4559 m健康人，結(jié)果顯示進(jìn)入高海拔地區(qū)后血漿VEGF和VEGFR-1濃度均增加，但與AMS發(fā)生并無(wú)相關(guān)性。目前尚無(wú)有關(guān)VEGFR-2與AMS關(guān)系的報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)AMS組與對(duì)照組無(wú)論在平原地區(qū)還是高原地區(qū)，血漿VEGFR-1和VEGFR-2的表達(dá)水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說(shuō)明兩者與AMS發(fā)病可能無(wú)關(guān)。但由于樣本數(shù)量有限，本研究結(jié)果尚有待進(jìn)一步深入研究。

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(2014-11-27收稿 2014-12-22修回)

(責(zé)任編輯 付 輝)

Study on vascular endothelial growth factor and its receptors levels before and after the onset of acute mountain sickness

LIMengbo1andDINGHui2.

1.SecondDepartmentofInternalMedicine,BeijingCorpsHospital,ChinesePeople’sArmedPoliceForces,Beijing100027,China； 2.DepartmentofPediatrics,AffiliatedHospitalofLogisticsCollege,ChinesePeople’sArmedPoliceForces,Tianjin300162,China

Objective To investigate the changes of vascular endothelial growth factor (VEGF) and its receptors(VEGFR-1 and VEGFR-2) in plasma before and after emergent entering plateau and their relationship with acute mountain sickness (AMS), in order to provide a theoretical basis for identifying and protecting susceptible population. Methods 2000 healthy recruited soldiers were selected as research object, their venous blood were collected respectively before and after emergent entering plateau. AMS incidence was investigated with symptom score method, and 20 patients randomly selected as AMS group and 20 objects without AMS as control group, then plasma concentration of VEGF, VEGFR-1 and VEGFR-2 before and after emergent entering plateau by ELISA were examined respectively. Results The AMS incidence was 34.3%. Compared with plain area, plasma VEGF concentration of AMS group increased significantly after emergent entering plateau, the difference was statistically significant (t=2.799，P=0.011), the changes of plasma VEGFR-1 and VEGFR-2 concentration were not obvious. Changes of plasma VEGF, VEGFR-1 and VEGFR-2 concentration in control group were meaningless (P>0.05). Plasma VEGF concentration of AMS group were significantly higher than that of control group both on plateau and in plain areas (t=2.461，P=0.018;t=2.698，P=0.010). The differences of VEGFR-1 and VEGFR-2 concentration between the two groups were not significant neither on plateau nor in plain. Conclusions Plasma VEGF concentration may serve as a tool in screening the people susceptible to AMS before emergent entering plateau. There is no correlation between plasma VEGFR-1, VEGFR-2 concentration and AMS.

acute mountain sickness; vascular endothelial growth factor; receptor

10.13919/j.issn.2095-6274.2015.01.003

李萌博，碩士，主治醫(yī)師，E-mail: wjlmb@163.com

1.100027， 武警北京總隊(duì)醫(yī)院內(nèi)二科；2.300162 天津，武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院兒科

R594.3；R3