張小瑞，王金波，慕高萌*

0 引言

達(dá)克羅寧是常用的表面麻醉劑，能阻斷各種神經(jīng)沖動(dòng)或刺激的傳導(dǎo)，抑制觸覺和痛覺。其毒性較普魯卡因低，局部麻醉作用較持久，對(duì)皮膚有止痛、止癢及殺菌作用。由于刺激性大，注入皮下組織后能引起劇痛及水腫，達(dá)克羅寧不可注射或浸潤麻醉用，與其他局麻藥無交叉過敏反應(yīng)［1］。達(dá)克羅寧多制成1%的軟膏、乳膏或0.5%溶液劑用來局部用藥，可避免口服給藥的副作用［2］。凝膠劑系指藥物與適宜的輔料制成均勻或混懸的透明或半透明的半固體制劑。水溶性凝膠易于涂展，無油膩感，對(duì)皮膚的刺激小，能吸收組織滲出液，不妨礙皮膚正常功能，還由于其基質(zhì)粘度較小而利于藥物(特別是水溶性藥物)的釋放。本研究將鹽酸達(dá)克羅寧制成水溶性凝膠劑并進(jìn)行質(zhì)量控制研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 FA1004分析天平(上海上平儀器有限公司);pH S-3C型酸度計(jì)(上海今邁儀器儀表有限公司);LD5-2A離心機(jī)(北京京立離心機(jī)有限公司);優(yōu)普UPT系列超純水器(上海優(yōu)普實(shí)業(yè)有限公司);UV-240紫外分光光度計(jì)(日本島津公司);JB90-D強(qiáng)力電動(dòng)攪拌機(jī)(上海標(biāo)本模型廠);Waters高效液相色譜儀(美國Waters公司)。

1.2 試藥 鹽酸達(dá)克羅寧(上海輕工實(shí)驗(yàn)廠，批號(hào):2010068，純度:99.8%);卡波姆940(上海遠(yuǎn)宏化工制劑輔料技術(shù)有限公司，批號(hào):010094425);甘油(上海運(yùn)佳黃浦制藥有限公司，批號(hào):110506);聚山梨酯-80(上海大眾藥業(yè)有限公司，批號(hào):120421);三乙醇胺(上海凌峰化學(xué)試劑有限公司，批號(hào):100902);薄荷腦(上海新嘉香料有限公司，批號(hào):120307);羥苯乙酯(廣東省臺(tái)山市新寧制藥廠，批號(hào):100703);乙腈(美國 TEDIA公司)為色譜純;水為超純水;其余試劑均為分析純。

2 方法和結(jié)果

2.1 處方 鹽酸達(dá)克羅寧10 g，卡波姆94 015 g，三乙醇胺13.5 g，聚山梨酯-80 30 g，甘油25 g，羥苯乙酯1 g，薄荷腦5 g，超純水加至1 000 g。

2.2 制備工藝 將卡波姆940緩慢加入到300 mL超純水中，靜置約24 h，使其充分溶脹，依次加入甘油、薄荷腦、10%羥苯乙酯，加入10%三乙醇胺調(diào)pH值為7.0～8.0，攪拌形成無色透明的凝膠基質(zhì)。將聚山梨酯-80加入到300 mL超純水中，加入鹽酸達(dá)克羅寧攪拌使其完全溶解后，緩慢加入到上述凝膠基質(zhì)中，加超純水至1 000 g攪拌均勻，除去氣泡即得。按此工藝分別制得批號(hào)為130307、130309、130312 的3 份凝膠樣品。

2.3 質(zhì)量控制

2.3.1 性狀和pH值 本品外觀為乳白色半透明的凝膠，質(zhì)地均勻細(xì)膩。

2.3.2 鑒別 取凝膠樣品1 g，加超純水10 mL溶解，攪拌均勻后加入二硝基苯肼試液，振搖后顯黃色;取不含主藥的空白凝膠同法測試，溶液不變色。

2.3.3 檢查 取凝膠樣品1 g，加水50 mL溶解后測定pH值，測得pH值在7.0～7.6范圍內(nèi)，見表1，pH值和微生物限度等項(xiàng)均符合中國藥典2010版附錄凝膠劑的有關(guān)規(guī)定［3］。

表1 樣品pH值

2.3.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)［4］取樣品10 g裝入離心管中，以3 000 r/min(離心半徑16 cm)離心30 min，無分層現(xiàn)象。取樣品10 g裝入塑料盒內(nèi)，分別放入55℃的干燥箱和－15℃的冰箱中，24 h后取出，恢復(fù)至室溫觀察，未發(fā)生分離、沉淀、變色現(xiàn)象。

2.4 含量測定

2.4.1 檢測波長的確定 取“2.4.3”項(xiàng)下對(duì)照品溶液、供試品溶液，以及“2.4.4”項(xiàng)下陰性對(duì)照溶液適量，在200～400 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描(圖1)。由圖1可知，鹽酸達(dá)克羅寧在282 nm處有最大紫外吸收，空白基質(zhì)在此處無吸收干擾，故選擇282 nm為檢測波長［5］。

2.4.2 色譜條件［6］色譜柱:Diamonsil TM C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相:乙腈 －KH2PO4溶液(0.015 mol/L)=55∶45(V∶V)，磷酸調(diào)節(jié)pH至3.0;流速:0.6 mL/min;柱溫:25℃;檢測波長:282 nm;進(jìn)樣量:20 μL。

圖1 紫外吸收光譜注:A.鹽酸達(dá)克羅寧對(duì)照品，B.鹽酸達(dá)克羅寧凝膠，C.空白凝膠基質(zhì)

2.4.3 溶液配制 對(duì)照品溶液:精密稱取鹽酸達(dá)克羅寧對(duì)照品0.1 g，置于100 mL容量瓶中，加流動(dòng)相定容，搖勻并超聲10 min，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液4 mL，置100 mL容量瓶中，加流動(dòng)相定容，搖勻并超聲10 min，作為對(duì)照品溶液。供試品溶液:精密稱取鹽酸達(dá)克羅寧凝膠0.4 g，置于小燒杯中，用0.05 mol/L的硫酸溶液溶解，超聲10 min后過濾;將濾液轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中并洗滌小燒杯3次，加0.05 mol/L的硫酸溶液定容，搖勻并超聲10 min，作為供試品溶液。

2.4.4 干擾性試驗(yàn) 按處方量配制不含主藥的空白凝膠，按“2.4.3”項(xiàng)下供試品溶液配制方法操作，得陰性對(duì)照溶液。將對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液分別進(jìn)樣20 μL測定，色譜見圖2。達(dá)克羅寧保留時(shí)間tR=4.51 min，陰性對(duì)照溶液在4.51 min附近無雜質(zhì)峰干擾。

2.4.5 線性試驗(yàn) 精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液1、2、4、6、8、10 mL，分別置于 100 mL 容量瓶中，加流動(dòng)相定容，超聲10 min，分別進(jìn)樣20 μL測定，以峰面積(A)對(duì)進(jìn)樣濃度(C)進(jìn)行回歸，得回歸方程A=57 595 407 C+3 775，相關(guān)系數(shù) r=0.999 98(n=5)，表明鹽酸達(dá)克羅寧濃度在 0.01～0.10 mg/mL范圍內(nèi)，濃度(C)與峰面積(A)呈良好線性關(guān)系。

2.4.6 加樣回收率試驗(yàn) 精密量取陰性對(duì)照溶液10 mL于100 mL容量瓶中，分別加入已知量的鹽酸達(dá)克羅寧對(duì)照品，加流動(dòng)相至刻度，得低、中、高3種濃度(0.217、0.434、1.084 mg/mL)溶液，分別進(jìn)樣20 μL，進(jìn)行回收率測定。平均回收率為99.58%，RSD=1.85%(n=9)，見表2。

圖2 高效液相色譜圖注:A.對(duì)照品，B.供試品，C.陰性對(duì)照;1.達(dá)克羅寧，2.輔料

表2 回收率測定結(jié)果(n=9)

2.4.7 精密度試驗(yàn) 分別配制低、中、高3種濃度(0.01、0.04、0.10 mg/mL)的對(duì)照品溶液，每種溶液在同一天內(nèi)連續(xù)進(jìn)樣5次，測定日內(nèi)精密度;分別于1、2、3、4、5 d 各進(jìn)樣 5 次進(jìn)行測定，測定日間精密度，由表3可知本方法精密度良好。

表3 精密度測定結(jié)果(n=5)

2.4.8 樣品測定 分別取對(duì)照品和供試品溶液進(jìn)樣20 μL測定，記錄峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算供試品中達(dá)克羅寧含量，結(jié)果見表4。

表4 樣品含量測定結(jié)果(n=3)

3 討論

3.1 使用卡波姆940作為凝膠基質(zhì)，制成的鹽酸達(dá)克羅寧凝膠劑，在皮膚上比洗劑或搽劑等其他制劑保留時(shí)間更長，局部濃度高，止癢效果更明顯，并且水溶性凝膠無油膩感，潤滑舒適，更容易清洗［7］。在制備凝膠基質(zhì)時(shí)，應(yīng)將卡波姆940均勻撒在水面，使其充分溶脹后攪拌，防止產(chǎn)生不溶性膠團(tuán)。

3.2 本品要求藥物溶解于基質(zhì)中，鹽酸達(dá)克羅寧在水中不易溶解，為此首先測定了鹽酸達(dá)克羅寧在一些水凝膠劑常用溶媒中的溶解度，結(jié)果表明在溶媒處方常用量下，只有乙醇和聚山梨酯-80可很好地溶解藥物。已有報(bào)道，使用乙醇作為助溶劑，由于乙醇在制劑中長期放置易于揮發(fā)而使藥物析出，因此，我們采用聚山梨酯-80為增溶劑［8］。

3.3 使用羥苯乙酯為抑菌劑，首先成本最低，相同抑菌效果下成本僅為山梨酸鉀的30%;其次用量最少，因此對(duì)人體毒副作用大幅降低;再者其抑菌范圍廣，使用的pH值范圍廣，受pH值影響小，綜合考慮其更適合用于達(dá)克羅寧凝膠。鹽酸達(dá)克羅寧不穩(wěn)定，在加熱或遇堿液易分解，因此，在配制供試品溶液時(shí)，宜選用0.05 mol/L的硫酸溶液。溶液超聲時(shí)間不宜過長，防止鹽酸達(dá)克羅寧分解，影響檢測結(jié)果。

3.4 參考已發(fā)表的鹽酸達(dá)克羅寧氧氟沙星凝膠制備的報(bào)道，使用羧甲基纖維素鈉為主要基質(zhì)時(shí)，所制得凝膠類似果凍，涂抹后容易產(chǎn)生泡沫。采用卡波姆940為基質(zhì)，比較透明澄清，制成的凝膠細(xì)膩光滑，易涂抹均勻，附著性強(qiáng)。另外，加入喹諾酮類抗菌藥物氧氟沙星，具有鎮(zhèn)痛和殺菌作用，但喹諾酮類藥物不適合兒童使用，去除處方中的氧氟沙星，擴(kuò)大了使用人群的范圍。鹽酸達(dá)克羅寧的定量方法有非水滴定、紫外分光光度計(jì)法［9］、選擇電極法［10］和高效液相法等。已報(bào)道鹽酸達(dá)克羅寧凝膠劑多采用紫外分光光度法進(jìn)行含量測定，使用HPLC法對(duì)鹽酸達(dá)克羅寧凝膠劑進(jìn)行測定少見文獻(xiàn)報(bào)道，本次質(zhì)量控制采用HPLC法測定，快速準(zhǔn)確且簡單易操作，可滿足本制劑質(zhì)量控制要求。

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