章小東，黃文彩，王彩紅，鄭穗瑾，羅紅英，付文金，尹麗明，彭蘭芬，曾見(jiàn)芬，劉亮廣東醫(yī)學(xué)院附屬厚街醫(yī)院(東莞，523945)

妊娠期高血壓(hypertensive disordercomplicating pregnancy，HDCP)是指患者在妊娠期發(fā)生血壓升高，同時(shí)排除原有高血壓合并妊娠患者，簡(jiǎn)稱(chēng)妊高癥，常導(dǎo)致流產(chǎn)，嚴(yán)重者造成產(chǎn)婦及圍產(chǎn)兒死亡，同時(shí)部分患者遺傳給胎兒，造成先天性高血壓，給患者生存質(zhì)量帶來(lái)重要的影響［1］。相關(guān)研究統(tǒng)計(jì)，妊高癥在我國(guó)發(fā)病率約為9.4%［2］。隨著生活水平的不斷提高，生活模式現(xiàn)代化及社會(huì)老齡化，妊娠期高血壓疾病(HDCP)的發(fā)病率逐年增加。但其病因和發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚。妊娠期高血壓疾病的病因至今不明，給早期診斷和治療帶來(lái)困難，如何尋找一種靈敏、特異、準(zhǔn)確的早期診斷妊高癥的指標(biāo)，有利于預(yù)防妊高癥，降低發(fā)病率和死亡率。核因子(NF－KB)是一種重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，是炎癥早期的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子［2］，其與心血管疾病的關(guān)系日益得到重視。血漿五聚素3(PTX3)是由血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在白細(xì)胞介素－1(IL－1)、腫瘤壞死因子(TNF)作用下分泌的組織原型長(zhǎng)鏈pentraxin分子，有一定的心血管保護(hù)作用。本研究旨在探討妊娠期高血壓疾病(HDCP)患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)核因子－KB(NF－KB)活性與與炎癥因子五聚素3(PTX3)水平的相關(guān)性，為早期防治妊娠高血壓心臟靶器官損害提供實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。

1 資料與方法

1.1 病例選擇

選取我院2012年3月～2014年12月收治的妊娠期高血壓疾病患者60例作為觀(guān)察組，其中妊娠期高血壓20例，輕度子癇前期20例，重度子癇前期20例 ，年齡25.8±7.0歲，孕38.5±3.5周;選取同期入院正常晚期妊娠婦女20例作為對(duì)照組，年齡25.6±7.3歲，孕38.9 ±3.7 周。觀(guān)察組研究對(duì)象均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)婦產(chǎn)科分會(huì)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］，同時(shí)排除心臟、肝腎功能不全，高血脂癥，糖尿病和其他器質(zhì)性疾病者，除外近三個(gè)月內(nèi)有感染者，排除白細(xì)胞計(jì)數(shù)＞10000/μL或＜4000/μL者及不愿參與研究者。同時(shí)選取本院入院正常妊娠婦女健康者20例作為正常對(duì)照組，術(shù)前相關(guān)檢查均在正常范圍。

1.2 觀(guān)察指標(biāo)

1.2.1 PBMC的NF-KB活性測(cè)定 妊娠高血壓患者入院后12 h、健康對(duì)照組晨起空腹采集靜脈血10mL，置肝素抗凝管。2 h內(nèi)采用密度梯度離心法分離人PBMC，提取PBMC的核蛋白。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)核蛋白NF－KB活性，ELISA試劑盒由上海藍(lán)基生物公司提供。

1.2.2 血漿PTX3測(cè)定 乙二胺四乙酸抗凝管采集HDCP患者空腹及健康對(duì)照組晨起空腹外周靜脈血2mL，4℃離心后取血漿，分管置于－80℃ 冰箱中待用，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，并嚴(yán)格按照試劑盒操作步驟，檢測(cè)血清PTX3濃度。試劑盒購(gòu)自上海滬尚生物科技有限公司，由美國(guó)GBD有限公司生產(chǎn)。以ELISA法測(cè)定NF－KB活性、PTX3等水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用方差分析檢驗(yàn)、pearson直線(xiàn)相關(guān)分析比較，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組NF－KB活性和血漿PTX3水平測(cè)定，見(jiàn)表1.重度子癇前期患者NF－KB最高，而PTX3最低，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 NF-KB活性和血漿PTX3水平測(cè)定Tab.1 Determination of NF-KB and plasma PTX3 level

2.2 兩組 NF－KB活性和血漿PTX3水平的相關(guān)性，見(jiàn)表2.重度子癇前期，重度子癇前期和妊娠期高血壓患者兩種指標(biāo)相關(guān)系數(shù)分別為0.521，0.366和－0.397，P均小于0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

妊娠期高血壓(hypertensive disordercomplicating pregnancy，HDCP)是指患者在妊娠期發(fā)生血壓升高，同時(shí)排除原有高血壓合并妊娠患者，簡(jiǎn)稱(chēng)妊高癥，常導(dǎo)致流產(chǎn)，嚴(yán)重者造成產(chǎn)婦及圍產(chǎn)兒死亡，同時(shí)部分患者遺傳給胎兒，造成先天性高血壓，給患者生存質(zhì)量帶來(lái)重要的影響［1，3］。國(guó)內(nèi)目前對(duì)妊娠高血壓疾病非傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素的轉(zhuǎn)歸及發(fā)展因素并無(wú)報(bào)道，而國(guó)外研究也只處于起始階段。對(duì)許多炎癥因子如白介素6、白介素1及C反應(yīng)蛋白與妊娠高血壓疾病心血管損害的關(guān)系國(guó)內(nèi)外已有一定的研究，但多在聯(lián)合應(yīng)用對(duì)妊娠高血壓疾病檢測(cè)及意義，而對(duì)HDCP患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)NF－κB 活性與 PBMC的關(guān)系，并與炎癥因子五聚素3(pentraxin3，PTX3)作比較均未見(jiàn)報(bào)道［4－5］。妊娠期高血壓的發(fā)病原因和機(jī)制目前尚未闡明，相關(guān)研究指出，妊高癥的發(fā)生和發(fā)展主要有以下幾種學(xué)說(shuō)，如免疫失衡、血流動(dòng)力學(xué)紊亂、氧化應(yīng)激反應(yīng)及遺傳學(xué)說(shuō)等，Kkadyrov M等［6］研究發(fā)現(xiàn)，妊娠早期滋養(yǎng)細(xì)胞可侵蝕子宮螺旋動(dòng)脈，使動(dòng)脈栓塞，導(dǎo)致胎盤(pán)供血不足、組織缺氧，從而發(fā)生妊高癥。尋找一種在早孕期(10～14周)預(yù)測(cè)妊高癥的方法，是學(xué)界的研究熱點(diǎn)之一。近年來(lái)，非傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素，如微炎癥狀態(tài)等在妊娠期高血壓疾病發(fā)病中的作用越來(lái)越受到重視。研究表明［7］，許多炎癥因子，如白介素6、白介素1及C反應(yīng)蛋白等對(duì)心血管具有損害作用?；诖耍覀?cè)O(shè)計(jì)了本研究，旨在探討炎癥因子血漿五聚素3在妊高癥中的作用及相關(guān)機(jī)制。

在本研究中，我們檢測(cè)了外周單個(gè)核細(xì)胞核因子(NF－KB)水平及TX3水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，妊娠高血壓患者NF－KB水平明顯高于正常人，且兩者呈負(fù)相關(guān)。采用NF－KB相關(guān)抑制劑后，TX3水平下降，說(shuō)明TX3是NF－KB介導(dǎo)的信號(hào)通路的下游效應(yīng)分子。核因子(NF－KB)是一種重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，靜息狀態(tài)下與其抑制單位(inhibitor of κB，IκB)相結(jié)合形成復(fù)合體，以無(wú)活性狀態(tài)存在于胞質(zhì)中。當(dāng)細(xì)胞受到外界刺激時(shí)，NF－KB暴露出核定位信號(hào)并進(jìn)入核內(nèi)，使其具有生物活性?；罨腘F－KB可以在轉(zhuǎn)錄水平上激活多種與炎癥有關(guān)的細(xì)胞因子、黏附分子，如細(xì)胞間黏附分子－1(intercellular adhesion molecule－1，ICAM－1)、E－選擇素、血管細(xì)胞黏附分子－1(vascular cell adhesion molecule－1，VCAM－1)、白細(xì)胞介素(interleukin，IL)－1、IL－8、IL－6、腫瘤壞死因子－α(tumor necrosis factor－α，TNF－α)和環(huán)氧合酶－2(cyclooxygenase－2，COX－2)，是炎癥早期的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子［2］，其與心血管疾病的關(guān)系日益得到重視。PTX3是由血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在白細(xì)胞介素－1(IL－1)、腫瘤壞死因子(TNF)作用下分泌的組織原型長(zhǎng)鏈分子，其由顆粒型白細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及成纖維細(xì)胞等合成的［8］。Jenny等［9］發(fā)現(xiàn)，PTX3 增高與心血管死亡及全因死亡密切相關(guān)，為獨(dú)立于年齡、高血壓、糖尿病、高血脂、吸煙、CRP等的危險(xiǎn)因素。Latini等［10］以724例急性ST段抬高患者為研究對(duì)象，隨訪(fǎng)觀(guān)察3個(gè)月，發(fā)現(xiàn)PTX3的升高水平可以用來(lái)預(yù)測(cè)心梗后心衰及死亡率，并且優(yōu)于其他心肌標(biāo)志物如CRP、N末端腦鈉肽前體(NT－proBNP)、肌鈣蛋白(TnT)、肌酸激酶(CK)。Norata等［11］利用基因敲除模型研究小鼠發(fā)現(xiàn)，缺乏PTX3的小鼠更易出現(xiàn)為血管炎癥及動(dòng)脈粥樣硬化，從而推斷PTX3在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程的免疫應(yīng)答中起到一定的積極保護(hù)作用。這與本研究結(jié)果是一致的。

綜上所述，PTX3不僅是一種反映血管炎癥的炎性標(biāo)志物，可作為局部血管炎癥和心血管系統(tǒng)損傷的標(biāo)志物［13］，并對(duì)妊娠高血壓患者具有一定的保護(hù)作用，是臨床研究的焦點(diǎn)之一。

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