梁 萍

云南省紅河州食品藥品檢驗所，云南 蒙自 661199

HPLC法測定復方氨林巴比妥注射液中安替比林的含量

梁 萍

云南省紅河州食品藥品檢驗所，云南 蒙自 661199

目的:建立HPLC法測定復方氨林巴比妥注射液中安替比林含量的方法。方法:采用sinochrom ODS-AP(4.6mm×200mm，5μm)色譜柱；流動相：甲醇-1%醋酸溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.7)(45∶55);流速：0.8ml/min；檢測波長：259nm；柱溫：40℃；進樣體積：10μl。結(jié)果:安替比林濃度在0.4～2μg/ml時，線性關(guān)系良好(r=0.9999)；平均加樣回收率為98.95%(n=9)。結(jié)論:該法簡便、快速、專屬性強、準確度高，適用于復方氨林巴比妥注射液中安替比林的含量測定。

高效液相色譜法；安替比林；含量

復方氨林巴比妥注射液收載于《國家藥品標準》化學藥品地方標準上升國家標準第十四冊，由氨基比林、安替比林、巴比妥和注射用水組成，為解熱鎮(zhèn)痛藥，臨床用于急性高熱時的緊急退熱，對發(fā)熱時的頭痛癥狀也有緩解作用。本文通過實驗，建立了高效液相色譜法測定復方氨林巴比妥注射液中安替比林的含量測定方法，并對方法進行了驗證[1]。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 1260高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)；BP211D電子天平(北京賽多利斯天平有限公司)。

1.2 試藥 安替比林對照品(批號：100506-200301，中國藥品生物制品檢定所)；復方氨林巴比妥注射液(批號：1401212A、1401014A ，鄭州某藥業(yè)有限公司生產(chǎn)；批號：13091904，貴州某藥業(yè)有限公司);甲醇為色譜純；水為超純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Sinochrom ODS-AP (4.6mm×200mm，5μm)；流動相：甲醇-1%醋酸溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.7)(45∶55)；流速：0.8ml/min；檢測波長：259nm；柱溫：40℃；進樣體積：10μl。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取安替比林對照品10.49mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 精密量取復方氨林巴比妥注射液1ml，置200ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.2.3 陰性樣品溶液的制備 按復方氨林巴比妥注射液處方，不加安替比林制成陰性對照，同“2.2.2”項下的制備方法制成陰性樣品溶液。

2.3 陰性對照試驗 取對照品溶液、樣品溶液和陰性溶液，在上述色譜條件下準確進樣10μl，分別記錄色譜圖，色譜圖見圖1。結(jié)果表明，安替比林的測定不受其他雜質(zhì)峰的干擾。

2.4 線性關(guān)系試驗 分別精密量取上述對照品溶液各4、8、12、16、20μl，在上述色譜條件下進樣，記錄峰面積，以峰面積A為縱坐標，濃度C(μg/ml)為橫坐標進行線性回歸，得回歸方程為Y=3.57748C+1.16032，r=0.9999，安替比林在濃度0.4～2μg/ml的范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.5 精密度試驗 取上述對照品溶液，準確進樣10μl，連續(xù)進樣6次，分別測定峰面積，RSD為0.30%。表示儀器的精密度良好。

2.6 重復性試驗 精密量取同一批號樣品(批號：1401212A)，按“2.2.2”項下的方法配制溶液，在上述色譜條件下，依法測定，記錄峰面積，6份樣品按標示量計算的平均含量為99.04%，RSD為0.35%(n=6)。表明該方法重現(xiàn)性較好。

2.7 穩(wěn)定性試驗 取重復性試驗項下的第一份樣品分別于0、2、4、8、12、24h取樣測定，結(jié)果安替比林的RSD為0.81%(n=6)。表明該樣品在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 加樣回收率試驗 精密量取已知含量的樣品(批號：1401212A ) 4、5、6ml各3份分別置10ml量瓶中，精密加入“2.2.1”的對照溶液各6、6、6、5、5、5、4、4、4ml，搖勻。照上述色譜條件，進樣測定9份，結(jié)果平均回收率為98.95%，RSD為0.72%(n=9)。

2.9 樣品中安替比林的含量測定 精密稱取安替比林對照品適量，照“2.2.1”項下方法制備對照品溶液，另取復方氨林巴比妥注射液三批，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液。精密量取對照品溶液和供試品溶液各10μl，在上述色譜條件下，注入液相色譜儀，記錄峰面積，按外標法計算，結(jié)果見表1。

表1 復方氨林巴比妥注射液中安替比林的含量測定(n=3)

3 討論

3.1 《國家藥品標準》化學藥品地方標準上升國家標準第十四冊中，安替比林的含量測定采用紫外法進行定量分析[2]，其操作繁瑣，反應時間長。本實驗采用HPLC法測定其含量，具有操作簡便、專屬性強、結(jié)果準確的特點，有利于在實際工作中對藥品質(zhì)量的控制。

3.2 檢測波長的選擇 精密量取對照品溶液適量，用水溶解并稀釋制成0.1mg/ml的溶液，以水為空白，用TU-1901紫外-可見分光光度計在200～300nm的波長范圍內(nèi)分別掃描其紫外吸收圖譜，在259nm的波長處有最大吸收，所以確定其為檢測波長。

3.3 經(jīng)試驗，流動相用甲醇-1%醋酸溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.7)(45∶55)[3]，流速為0.8ml/min；柱溫為40℃時，安替比林峰的保留時間適宜(5.7min)，理論版數(shù)按安替比林峰計算達到7093 。

[1]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典(二部)[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:附錄194-195.

[2]國家藥典委員會．國家藥品標準(第十四冊)[S].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010:81.

[3]國家藥典委員會. 國家藥品標準(第十六冊)[S].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010:396.

Determination of antipyrine compound Amionprine and Antipyrine injection by HPLC method

LIANG Ping

Honghe prefecture institute for food and drug control,Mengzi 661199,China

Objective:To establish an HPLC method for determination of antipyrine Compound Amionprine and Antipyrine injection.Method: An sinochrom ODS-AP column(4.6mm×200mm，5μm)was used with the temperature of 40℃.The mobile phase consisted of methanol:1%acetic acid solution(adjusted to pH 3.7 with TriethyLamine)(45∶55)and the flow rate was 0.8ml/min.The detection wavelength was 259nm,sample amount to 10μl.Results： the linearity was good in the range of 0.4～2μg/ml(r=0.9999);The average sample recovery rate was 98.8% (n=9).Conclusion： This Method is simple,rapid,specific and accurate ,and can be used for determination of compound Amionprine and Antipyrine injection.

HPLC；antipyrine；content

梁萍,E-mail: 634144277@qq.com

R927.2

A

1007-8517(2015)09-0010-02

2015.01.29)