徐玉萍,徐嬋娟,徐金林
(安徽省廬江縣中醫(yī)院,安徽 廬江 231500)
瀉痢固腸丸對在體和離體小腸蠕動功能的影響
徐玉萍,徐嬋娟,徐金林
(安徽省廬江縣中醫(yī)院,安徽 廬江 231500)
[目的]:觀察瀉痢固腸丸(XLGCW)對在體和離體小腸蠕動功能的影響。[方法]: 采用炭末推進法,觀察XLGCW對小鼠小腸炭末推進百分率的影響;制備XLGCW含藥血清,觀察其對大鼠離體小腸和硝酸毛果蕓香堿致興奮大鼠離體小腸蠕動功能影響。[結(jié)果]:XLGCW能降低小鼠小腸碳末推進率,降低大鼠離體小腸和毛果蕓香堿致興奮大鼠離體小腸的收縮頻率和收縮張力。[結(jié)論]:XLGCW能夠抑制小腸蠕動功能。
瀉痢固腸丸;在體小腸;離體小腸;蠕動功能
瀉痢固腸丸(XLGCW)為中醫(yī)經(jīng)典驗方,由人參、白術(shù)、茯苓、甘草、陳皮、肉豆蔻、白芍、罌粟殼、訶子肉等九味中藥組成,具有健脾化濕,益氣固腸之功效[1]。當(dāng)前有關(guān)瀉痢固腸丸對小腸蠕動功能的影響尚未見研究報道,本實驗采用小鼠小腸炭末推進法,觀察XLGCW對小鼠在體小腸蠕動功能的影響;給大鼠灌服XLGCW,制備含藥血清,觀察XLGCW含藥血清對正常大鼠離體小腸和毛果蕓香堿致興奮大鼠離體小腸蠕動功能的影響,為瀉痢固腸丸臨床用于治療久痢久瀉提供實驗依據(jù)。
1.1 試驗動物
雄性昆明種小鼠,體重(20±2)g;雄性Wistar大鼠,體重(240±20)g,購自安徽長臨河醫(yī)藥有限公司。
1.2 藥品與試劑
瀉痢固腸丸(XLGCW),北京同仁堂藥業(yè)有限公司,批號:8083039;四神丸,山西康威制藥有限責(zé)任公司,批號:3001602;硝酸毛果蕓香堿注射液,沈陽圣元藥業(yè)有限公司,批號:08060507;中華墨水,上海精細(xì)文化用品有限公司。
1.3 實驗儀器
DL-5低速大容量離心機,上海安亭儀器有限公司;FA2104B型電子天平,上海精密科學(xué)儀器有限公司;BL-420S生物機能實驗系統(tǒng),成都泰盟科技有限公司;HW-400E恒溫平滑肌槽,成都泰盟生物科技有限公司;KQ-250DE型數(shù)控超聲波清洗器,昆山市超聲儀器有限公司。
2.1 XLGCW對小鼠小腸碳末推進率的影響
參照文獻(xiàn)方法[2-4],取小鼠50只,隨機分為5組,即XLGCW高、中、低劑量組(劑量分別為2.0、1.0、0.5 g/kg),四神丸組(0.9 g/kg)和空白對照組,每組10只。灌胃給藥,連續(xù)5d,給藥容量均為0.2 mL·10 g-1體重。空白對照組給等容量的生理鹽水。末次給藥前禁食不禁水12 h,末次給藥后30 min,給各組小鼠灌服5%的碳末混懸液0.2 mL·10 g-1,20 min后,頸椎脫臼處死小鼠,打開腹腔,剪取幽門至回盲部小腸,分離腸系膜,測量小腸全長(cm)和炭末在小腸內(nèi)的推進距離(cm),計算炭末推進率。碳末推進率(%)=(碳末推進距離/小腸全長)×100%。
2.2 XLGCW對大鼠離體小蠕動功能的影響
2.2.1 XLGCW含藥血清的制備 取健康wistar 大鼠12只,隨機分為四組,分別為 XGW高、中、低劑量組(劑量分別為2.0、1.0、0.5 g/kg)劑量組和空白對照組。各組大鼠連續(xù)給藥5d,末次給藥1h后,眶后靜脈叢采血,3600rpm/min離心15min,分離血清,56℃ 30min滅活,一次性微孔濾膜過濾,-20℃儲藏備用。
2.2.2 臺氏液的配制 稱取NaCl 8.0 g,KCl 0.2 g,CaCl20.2 g,NaHCO31.0 g,NaH2PO40.05 g,MgCl20.1 g,葡萄糖1.0 g,加蒸餾水至1000 mL,溶解備用。
2.2.3 大鼠離體小腸的制備及處理 參照文獻(xiàn)方法[5],實驗前大鼠禁食不禁水12 h,實驗時用木棒敲擊小鼠頭部致昏迷,打開腹腔,剪取近回盲部小腸6 cm置氧飽和的臺氏液中,除去腸系膜,用臺式液沖洗凈小腸內(nèi)容物,剪成約2 cm長的腸段備用。將數(shù)顯恒溫平滑肌槽中溫度設(shè)定為37℃,待溫度恒定后,將小腸一端固定于L型鉤上,放置于離體平滑肌槽中,另一端通過張力換能器連接BL-420F生物機能實驗系統(tǒng)。固定小腸前先給予2 g的前負(fù)荷,固定后以每秒1~2個氣泡的速度持續(xù)通入空氣。
2.2.4 XLGCW含藥血清對大鼠離體小腸蠕動活動的影響 采用“2.2.3”方法,將離體小腸段固定于離體平滑肌槽后,穩(wěn)定5 min后,記錄正常情況下小腸蠕動的頻率和振幅。分別加入空白血清和含藥血清0.4mL,觀察XLGCW含藥血清對大鼠離體小腸平滑肌收縮活動的影響。試驗共重復(fù)5次。
2.2.5 XLGCW含藥血清對硝酸毛果蕓香堿激動離體小腸蠕動功能的影響 參照“2.2.3”方法,將小腸段固定離體平滑肌槽后,穩(wěn)定5min,加入1%的硝酸毛果蕓香堿0.05 mL,記錄腸管蠕動波。10 min后,再分別向槽中加入血清0.4 mL,觀察加入血清后小腸蠕動波形的變化。
2.3 數(shù)據(jù)處理與分析
3.1 XLGCW對小鼠小腸碳末推進率的影響
表1 XLGCW對小鼠小腸碳末推進率的影響
注:與空白對照組比較:*P<0.05,**P<0.01
由表1可知,XLGCW高、中、低劑量組小鼠小腸炭末推進百分率均比空白對照組低,其中XLGCW高、中劑量組小鼠小腸炭末推進百分率顯著低于空白對照組(P<0.01)。說明XLGCW能抑制小鼠小腸的推進性蠕動。四神丸亦能抑制小鼠小腸的推進性蠕動。
3.2 XLGCW含藥血清對大鼠離體小腸蠕動功能的影響
由表2表明,XLGCW高、中、低劑量組小鼠小腸收縮頻率均低于空白對照組,其中XLGCW高、中劑量組小鼠小腸收縮頻率顯著低于空白對照組(P<0.05或P<0.01);XLGCW高、中、低劑量組小鼠小腸收縮張力均小于空白對照組,其中XLGCW高劑量組小鼠小腸收縮張力顯著小于空白對照組(P<0.01)。說明XLGCW含藥血清能抑制大鼠離體小腸的蠕動功能。
表2 XLGCW含藥血清對大鼠離體小腸蠕動功能的影響
注:與空白對照組比較:*P<0.05,**P<0.01
3.3 XLGCW
含藥血清對毛果蕓香堿致興奮大鼠離體小腸蠕動功能的影響 由表3表明,XLGCW高、中、低劑量組小鼠小腸收縮頻率均低于空白對照組,其中XLGCW高、中劑量組小鼠小腸收縮頻率顯著低于空白對照組(P<0.01);XLGCW高、中、低劑量組小鼠小腸收縮張力均小于空白對照組,其中XLGCW高、中劑量組小鼠小腸收縮張力顯著小于空白對照組(P<0.01)。說明XLGCW含藥血清能抑制毛果蕓香堿致興奮大鼠離體小腸的蠕動功能。
表3 XLGCW含藥血清對毛果蕓香堿致興奮大鼠離體小腸蠕動功能的影響±s,n = 10)
目前國內(nèi)外未見有關(guān)XLGCW對小腸蠕動功能影響的研究報道,本研究以在體小腸和離體小腸為研究對象,觀察了XLGCW對小腸蠕動功能的影響。
在體試驗研究結(jié)果表明,XLGCW能夠顯著降低碳末在小鼠小腸內(nèi)的推進距離,說明XLGCW能抑制在體小腸的推進性蠕動。在離體試驗中,運用中藥血清藥理學(xué)的方法,觀察了XLGCW對大鼠離體小腸和毛果蕓香堿致興奮大鼠離體小腸蠕動功能的影響,試驗結(jié)果表明XLGCW不僅能降低大鼠離體小腸的收縮頻率和收縮張力,還能顯著降低毛果蕓香堿致興奮大鼠離體小腸的收縮頻率和收縮張力。說明XLGCW能抑制在體和離體小腸的蠕動功能,機制是否與拮抗M受體有關(guān)有待于進一步深入研究。
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(責(zé)任編輯:竇 鵬)
Effect of Xieliguchangwan on Function of Intestinal Motility of Small intestine in Vivo and in Vitro
XU Yu-ping,XU Chan-juan,XU Jin-lin
(Lujiang Hospital of Traditional Chinese Medicine, Lujiang 231500, China)
Objective:To study the effect of Xieliguchangwan(XLGCW) on the function of intestinal motility of small intestine in vivo and in vitro.Methods: Effect of XLGCW on rate of small intestine facilitation in normal mice was observed.Preparing drug serum of XLGCW, contraction frequency and contraction tension of normal small intestine and excited small intestine by pilocarpine nitrate in vitro were observed. Results: XLGCW could decrease the rate of small intestine facilitation in normal mice,and also could decrease contraction frequency and contraction tension in normal small intestine and excite small intestine by pilocarpine nitrate in vitro. Conclusion: XLGCW could inhibite the function of intestinal motility.
XLGCW;Small intestine in vivo;Small intestine in vitro;Function of intestinal motility
2014-10-26
徐玉萍(1973-),女,安徽省廬江縣人,學(xué)士,副主任中藥師,主要從事藥品使用管理研究。
R289.5
A
1673-8772(2015)01-0044-03