黃玉平 陳志忠 陳 紅

(南京軍區(qū)福州總醫(yī)院第地一附屬醫(yī)院<九五醫(yī)院>，福州，351100)

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血必凈對(duì)燒傷合并急性腎損傷中的臨療效及部分機(jī)制探析

黃玉平 陳志忠 陳 紅

(南京軍區(qū)福州總醫(yī)院第地一附屬醫(yī)院<九五醫(yī)院>，福州，351100)

目的:觀察血必凈對(duì)燒傷合并急性腎損傷的臨床作用,并探析相關(guān)作用機(jī)制。方法:對(duì)本院2012年9月至2015年9月85例不同程度燒傷患者資料進(jìn)行回顧性分析,根據(jù)不同是否使用血必凈將85例患者分為治療組(使用血必凈)39例,余下46例設(shè)為常規(guī)組(未使用血必凈),同時(shí)將25例健康體檢者設(shè)為對(duì)照組,分別采集3組尿液和血液,檢測(cè)尿KIM-1及NAG水平及血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平。結(jié)果:1)與健康對(duì)照組相比,燒傷合并腎損傷患者BUN及Cr明顯升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療組和常規(guī)組,治療前BUN及Cr比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),經(jīng)過(guò)治療后治療組BUN及Cr下降的趨勢(shì)較常規(guī)組明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2)治療前相比，治療后治療組和常規(guī)治療組患者尿KIM-1及NAG水平均有明顯下降(P<0.01)，其中治療組上述指標(biāo)均顯著低于常規(guī)治療組(P<0.05)。3)尿KIM-1與BUN、Cr均呈正相關(guān)關(guān)系;尿NAG與BUN、Cr亦呈正相關(guān)關(guān)系,尿KIM-1與尿NAG也具有正相關(guān)性,結(jié)論:血必凈對(duì)燒傷患者合并急性腎損傷具有理想療效,其機(jī)制可能與降低尿KIM-1和NAG的表達(dá)有關(guān)。

燒傷;急性腎損傷;腎損傷因子-1;N-乙酰-β-葡萄糖苷酶；血必凈注射液

急性腎衰竭是嚴(yán)重?zé)齻牟l(fā)癥并導(dǎo)致死亡率增加的重要因素之一[1],根據(jù)急性腎損傷國(guó)際組織(AKIN)診斷標(biāo)準(zhǔn)對(duì)AKI的診斷標(biāo)準(zhǔn):48 h內(nèi)Cr水平升高≥0.3mg/dl(≥26.5 μmol/L)或超過(guò)基礎(chǔ)值的1.5倍及以上,且明確或經(jīng)推斷上述情況發(fā)生在7 d之內(nèi)或持續(xù)6 h尿量<0.5 mL/(kg·h)[2]。由于影響Cr結(jié)果因素較多,為了緩解燒傷患者的癥狀,早期發(fā)現(xiàn)及早干預(yù)以延緩甚至逆轉(zhuǎn)腎功能損害尤為重要。KIM-1是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種新的跨膜糖蛋白,在正常肝、腎、脾微量表達(dá),而在缺血及腎毒性損傷后的腎去分化近曲小管上皮細(xì)胞中表達(dá)顯著增強(qiáng)[3-4]。NAG是腎小管損害的指標(biāo),也是小管功能改變的指標(biāo),研究發(fā)現(xiàn)尿NAG比其他指標(biāo)有更高的特異性及敏感性[5-6]。

血必凈由赤芍、川芎、丹參、紅花及當(dāng)歸五種中藥組合而成,具有活血化瘀、疏通經(jīng)絡(luò)、潰散毒邪,據(jù)目前研究可知血必凈具有明顯抗內(nèi)毒素作用,臨床中我們發(fā)現(xiàn)血必凈對(duì)燒傷合并腎損傷患者具有明顯的腎功能保護(hù)作用,可明顯降低患者的Cr水平,有文獻(xiàn)認(rèn)為血必凈作用途徑與多種細(xì)胞因子相關(guān),因此我們提出設(shè)想:血必凈發(fā)揮腎保護(hù)療效是否通過(guò)KIM-1及NAG進(jìn)行橋接？本文將檢測(cè)不同程度燒傷患者尿中KIM-1和NAG水平,進(jìn)一步研究血必凈治療AKI的療效及部分機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2012年10月至2014年9月在我院就診的85例燒傷合并AKI的患者的資料進(jìn)行回顧性分析,根據(jù)不同是否使用血必凈將85例患者分為治療組(使用血必凈)39例,余下46例設(shè)為常規(guī)組(未使用血必凈),其中男46例,女39例,平均年齡(35.8±6.7)歲。同時(shí)將25例健康體檢者設(shè)為對(duì)照組,其中男15例,女10例,平均年齡(36.3±6.4)歲,均無(wú)肝、腎、心血管、血液及內(nèi)分泌系統(tǒng)病史。2組患者在性別、年齡等一般情況方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn):1)燙傷原因均為熱水燙傷火焰燒傷;2)燒傷后至入院時(shí)間不超過(guò)6 h;3)年齡在12～60歲。排除標(biāo)準(zhǔn):1)化學(xué)試劑等燒傷;2)燒傷后入院時(shí)間超過(guò)6 h;3)年齡小于12歲或大于60歲;4)既往有心臟病、肝腎功能不全者;5)入院前接受血必凈治療者。

1.3 治療方法 2組治療組患者均接受常規(guī)抗感染、清創(chuàng)、營(yíng)養(yǎng)支持、補(bǔ)液等處理,治療組患者在常規(guī)處理方案基礎(chǔ)上加用血必凈注射液(天津紅日藥業(yè)股份有限公司,批號(hào)為06072101)50 mL+0.9%氯化鈉注射液100 mL,靜脈滴注,3次/d,連續(xù)使用7 d。

1.4 方法

1.4.1 標(biāo)本采集 患者入院收集尿液(中間段)10 mL,以1 500 r/min離心10 min,取上清2 mL置于EP管中,保存于-20 ℃,集中測(cè)定KIM-1和NAG。同時(shí)采集血液做血常規(guī)檢查,主要檢查指標(biāo)為血BUN、SCr、WBC、ALT、AST等。

1.4.2 檢測(cè)方法 收集健康對(duì)照組,治療組及常規(guī)組患者治療前及治療后連續(xù)24 h尿液,在4 ℃ 14 000 prn條件下離心5 min,用高壓槍頭吸取離心后的上清液,使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行檢測(cè),人腎損傷分子-1酶聯(lián)免疫分析試劑盒(上海聯(lián)碩生物科技有限公司,貨號(hào)BS-1140),N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)ELISA檢測(cè)試劑盒(上海酶聯(lián)實(shí)業(yè)有限公司,貨號(hào)ELISA-05271),操作步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行,試劑盒由廣州達(dá)安基因股份有限公司提供,顯色后采用492 nm波長(zhǎng),TMB反應(yīng)產(chǎn)物檢測(cè)需要450 nm波長(zhǎng)。檢測(cè)時(shí)一定要首先進(jìn)行空白孔系統(tǒng)調(diào)零,用測(cè)定標(biāo)本孔的吸收值與一組陰性標(biāo)本測(cè)定孔平均值的比值(P/N)表示。以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。

2 結(jié)果

2.1 血生化指標(biāo) 治療組患者、對(duì)照組的BUN值分別為(4.94±1.96)mmoI/L和(4.24±0.78)mmoI/L,Cr值分別為(105.88±21.93)μmoI/L及(18.73±5.62)μmoI/L,結(jié)果顯示,與健康對(duì)照組相比,燒傷合并腎損傷患者BUN及Cr明顯升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療組和常規(guī)組,治療前BUN及Cr比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),經(jīng)過(guò)治療后治療組BUN及Cr下降的趨勢(shì)較常規(guī)組明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果見表1。

表1 各組BUN、Cr測(cè)定結(jié)果

注:*表示與健康對(duì)照組比較P<0.05;△表示與常規(guī)組治療后比較P<0.05。

2.2 尿KIM-1和NAG水平 對(duì)不同治療組患者24 h尿液中KIM-1和NAG進(jìn)行ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示:2組治療組患者治療前尿液中中KIM-1和NAG表達(dá)無(wú)明顯差異,但與健康對(duì)照組相比,治療組患者治療前的KIM-1(43.20±8.89)pg/mL vs(16.81±3.01)pg/mL,|t|=5.24,P=0.002 4<0.05)、NAG(102.99±20.39)pg/mL vs(42.91±6.49) pg/mL,|t|=4.67,p=0.001 1<0.05),表達(dá)均明顯增加;經(jīng)過(guò)血必凈注射液治療后治療組的KIM-1(25.59±4.79)pg/mL vs(43.20±8.89)pg/mL,|t|=8.92,P=0.000 9<0.001)、NAG(49.33±9.67)pg/mL vs(102.99±20.39)pg/mL,|t|=6.67,P=0.000 8<0.001),表達(dá)顯著低于治療前,也低于常規(guī)組治療后(P<0.05)見圖1及圖2。

圖1 不同治療組患者24 h尿液中KIM-1對(duì)比

圖2 不同治療組患者24 h尿液中NAG對(duì)比

2.3 燒傷合并腎損傷患者尿KIM-1和NAG與BUN、Cr相關(guān)性分析 尿KIM-1與BUN、Cr均呈正相關(guān)關(guān)系;尿NAG與BUN、Cr亦呈正相關(guān)關(guān)系,尿KIM-1與尿NAG也具有正相關(guān)性,結(jié)果見表2及圖1。

3 討論

隨著血必凈在90年代的問(wèn)世,更為凸顯活血化瘀法在治療燒傷及其合并癥的優(yōu)勢(shì),血必凈是經(jīng)典方血府逐瘀湯的現(xiàn)代合成,其主要成分是赤芍、川芎、丹參、紅花及當(dāng)歸,均具有顯著的活血化瘀之功。腎臟是嚴(yán)重?zé)齻蟛l(fā)的多器官衰竭的主要受損靶器官之一,病理學(xué)認(rèn)為燒傷后由于微血管的血流變學(xué)發(fā)生變化、舒縮功能減弱、血管通透性增高,以及炎性反應(yīng)、燒傷引起的休克所致的重要器官的缺血等原因,均可引起AKI。Colpaert K[7-10]等認(rèn)為由于燒傷后自身產(chǎn)生的毒素如肌紅蛋白等、腎毒性物質(zhì)以及機(jī)體急性代謝障礙、感染和氧自由基損傷等引起腎臟損傷,導(dǎo)致急性腎衰竭?，F(xiàn)代藥理學(xué)發(fā)現(xiàn)[11-13]:活血化瘀的中藥能夠通過(guò)減弱血小板的黏附聚集功能,抑制成纖維細(xì)胞合成膠原而明顯改善微循環(huán),可以通過(guò)改變通過(guò)改變毛細(xì)血管的通透性,減少促炎遞質(zhì)的分泌,促進(jìn)炎性物質(zhì)的吸收,于此同時(shí),活血化瘀類中藥可通過(guò)增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞吞噬和吸附炎性反應(yīng)因子的能力而發(fā)揮修復(fù)受損組織的功能。因此血必凈可以通過(guò)改善微循環(huán)、清除燒傷后產(chǎn)生的毒害物質(zhì),降低燒傷所致的病理性損傷,從而對(duì)機(jī)體的腎臟發(fā)揮保護(hù)作用。

表2 燒傷合并腎損傷患者KIM-1和NAG與BUN、Cr相關(guān)性分析

注：*在0.05水平(雙側(cè))上顯著相關(guān);**在0.01水平(雙側(cè))上顯著相關(guān)。

圖3 尿KIM-1與NAG相關(guān)性分析

一般情況下,腎功能檢查基本以Cr、BUN以及尿液為主,但由于腎臟具有強(qiáng)大的貯備功能,這些常用的指標(biāo)升高的較晚,不能充分診斷患者的腎功能損傷情況。近幾年研究發(fā)現(xiàn)[14-15],在病理組織學(xué)發(fā)現(xiàn)腎毒性改變之前尿KIM-1即表現(xiàn)出高表達(dá),順鉑、葉酸造影劑等引起急性腎小管壞死發(fā)現(xiàn)均能使KIM-1的表達(dá)升高,這些研究表明,KIM作為腎小管近曲小管上皮細(xì)胞的一種跨膜蛋白,可能更早的參與到腎臟損傷與修復(fù)中,更有利于早期診斷AKI,其應(yīng)用價(jià)值優(yōu)于BUN和Cr。NAG作為近年來(lái)研究比較多的一個(gè)檢測(cè)腎臟病變的酶,是一種細(xì)胞內(nèi)溶酶體酶,以腎近曲小管含量最高,正常情況下一般不易被腎小管濾過(guò),當(dāng)近曲小管上皮細(xì)胞受損時(shí),溶酶體破裂釋放NAG,是反映腎小管損害的特異性敏感指標(biāo)[15-16]。本研究表明,在燒傷合并腎損傷患者中,NAG水平明顯上升。因此我們認(rèn)為尿液中KIM-1及NAG對(duì)于腎功能的評(píng)估具有較強(qiáng)的敏感性,我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)燒傷合并腎損傷患者尿液中KIM-1及NAG均明顯高于健康對(duì)照組,經(jīng)過(guò)治療干預(yù)后患者KIM-1及NAG在尿液中的濃度均有所下降,其中使用血必凈的治療組下降的趨勢(shì)較常規(guī)組明顯。因此我們認(rèn)為血必凈可明顯抑制燒傷導(dǎo)致的瀑布樣效應(yīng),抑制炎性反應(yīng)遞質(zhì)的產(chǎn)生,抑制異常增加的血管通透性,修復(fù)受損的組織細(xì)胞及器官。

研究中我們對(duì)KIM-1和NAG與BUN、Cr進(jìn)行了相關(guān)性分析,結(jié)果表明,KIM-1和NAG與BUN、Cr呈正相關(guān),對(duì)KIM-1和NAG也做了相關(guān)性分析,二者之間的相關(guān)性系數(shù)達(dá)0.796,P<0.01,提示兩者可以聯(lián)合使用作為急性腎損傷早期的評(píng)估指標(biāo),且血必凈對(duì)燒傷患者合并急性腎損傷具有理想療效,其機(jī)制可能與降低尿KIM-1和NAG的表達(dá)有關(guān)。

[1]Lopes JA,JorgeS,NevesFC,et al.Acute renal failure in severelyburned patients[J].Resuscitation,2007,73(2):318.

[2]Van Biesen W,Vanholder R,Lameire N.Defining acute renal failure:RIFLE and beyond[J].Clin J Am SocNephrol,2006,1(6):1314-1319.

[3]Vaidya VS,Ramirez V,IchimuraT,et al.Urinary kidney injurymolecule-1:a sensitive quantitative biomarker for early detectionof kidney tubular injury[J].Am JPhysiol Renal Physiol,2009,290(2):517-529.

[4]van TimmerenMM,van den HeuvelMC,BaillyV,et al.Tubularkidney injury molecule-1(KIM-1)in human renal disease[J].JPathol,2007,212(2):209-217.

[5]Gilbert RE,CooperME.Thetubuloinerstitum in progressive diabetic kidney disease:more than all afermath of glomemlar injury[J].KidneyInt,1999,56(5):1627-1637.

[6]姜疆,劉毅.嚴(yán)重?zé)齻竽I功能與損傷機(jī)制的研究進(jìn)展[J].臨床軍醫(yī)雜志,2007,35(3):456-459.

[7]Colpaert K,Hoste E A.Acute kidney injury in burns:a story of volume and inflammation[J].Crit Care,2008,12(6):192.

[8]Palmieri T,Lavrentieva A,Greenhalgh DG.Acute kidney injury in critically ill burn patients.Risk factors,progression and impact on mortality[J].Burns,2010,36(2):205-211.

[9]Coca SG,Bauling P,Schifftner T,et al.Contribution of acute kidney injury toward morbidity and mortality in burns:a contemporary analysis[J].Am J Kidney Dis,2007,49(4):517-523.

[10]蔡曉燕,林聯(lián)鐸,馮裕董,等.急性腎損傷RIFLE與AKIN標(biāo)準(zhǔn)在重度燒傷患者中的對(duì)比研究[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2013,29(19):3191-3193.

[11]詹冰,朱家潭.束斌.等,血必凈注舯液對(duì)嚴(yán)重?zé)齻颊吲K器功能的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合急救雜志,2007,14(1):14-16.

[12]吳月艷.血必凈對(duì)嚴(yán)重?zé)齻颊吣δ艿谋Ｗo(hù)作用[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2011,5(5):113-114.

[13]陳明,陳謇璇,黃勇波.血越凈注射淀聯(lián)合抗生素治療外科感染性疾病46例[J].中國(guó)藥業(yè),2010,19(9):63-65.

[14]Palmieri T,Lavrentieva A,Greenhalgh DG.Acute kidney injury incritically ill burn patients.Risk factors,progression and impact onmortality[J].Burns，2010,36(2):205-211.

[15]Waikar SS,Bonventre JV.Biomarkers for the diagnosis of acutekidney injury[J].Nephron ClinPract,2008,109(4):c192-197.

(2015-08-16收稿 責(zé)任編輯：王明)

Curative Effect and Mechanism of Xuebijing Injection on Burn Injury Complicated with Acute Kidney Injury

Huang Yuping, Chen Zhizhong, Chen Hong

(FirstAffiliatedHospitaltoFuzhouGeneralHospitalofNanjingMilitaryCommand,Nanjing351100,China)

Objective:To observe the curative effect and mechanism of Xuebijing injection in burn injury complicated with acute kidney injury.Methods:A total of 85 patients(enrolled during September 2012 to September 2015) with different degrees of burning were retrospectively analyzed, and were divided into observation group(used Xuebijing injection, 39 cases) and conventional group (unused Xuebijing injection, 49 cases). Also, 25 healthy people were set as control group. To collect urine and blood, detect urine KIM-1, NAG levels and blood urea nitrogen (BUN), and creatinine (Cr) levels in the three groups.Results:1) compared with healthy group, BUN and Cr increased significantly in patients with burning injury complicated with renal injury, (P<0.05). Before treatment, BUN and Cr were of no statistical difference in the observation group and conventional group, (P>0.05). After treatment, the downward trend of BUN and Cr in the observation group were more obvious than than of the healthy group, and the differences were with statistically significance (P<0.05). 2) after treatment, urinary KIM-1 and NAG levels were significantly decreased in the observation group and conventional group(P<0.01), and the indexes of observation group were significantly lower than that of the conventional treatment group (P<0.05); 3) urine KIM-1 were both positive correlated with BUN and Cr, and also, urine NAG had positive correlation with BUN and Cr, and urine NAG also had positive correlation with urine KIM-1.Conclusion:Xuebijing injection has an ideal curative effect for patients with burns and acute kidney injury. This might be related to its inhibition on the expression of urine NAG and KIM-1.

Burns; Acute kidney injury; Kidney injury molecule-1; N-acetyl-beta-glycosidase; Xuebijing injection

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):30973690)

黃玉平(1984.1—),女,大學(xué)本科,醫(yī)師,研究方向:常見腎臟疾病的治療,E-mail:124343112@qq.com

R278;R259

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2015.12.015