矯 正，張鐵剛

(黑龍江省家畜遺傳資源保護中心，哈爾濱150069)

奶牛真菌性乳房炎在世界范圍內廣泛存在，而且發(fā)病率有上升的趨勢。一般認為，在慢性頑固性乳房炎中真菌性乳房炎發(fā)病率普遍高于在急性型乳房炎中的發(fā)病率。但是目前仍沒有確切的數據來證明，也很少有關于真菌性乳房炎發(fā)病率與其影響因子之間關系的研究。因此，本研究的目的在于調查真菌性乳房炎的流行率、與影響因素(包括飼養(yǎng)方式、氣候條件和病程長短) 之間的關系，以期為真菌性乳房炎的防治提供理論依據。

1 材料和方法

1.1 樣品采集

于2007年7月至2013年7月，以哈爾濱市、齊齊哈爾市、牡丹江市和大慶市等地周邊地區(qū)為主采集樣本。樣本采集按照Thrusfield(2005) 的要求進行。共采集樣本600 份，包括集約化飼養(yǎng)場和個體養(yǎng)殖戶。所有樣本均采自表現出臨床型乳房炎癥狀且經過連續(xù)10 d 以上治療的奶牛。

1.2 樣本分類

對飼養(yǎng)方式(散養(yǎng)戶和集約化牛場)，發(fā)病季節(jié)(11月至次年3月和4 ～10月)，病程，牛的品種和胎次對奶牛真菌性乳房炎發(fā)病率的影響進行調查。

表1 采集的臨床型乳房炎樣本地區(qū)分布情況

表2 奶牛樣本分類及數量情況

1.3 酵母樣真菌和細菌分離鑒定

由黑龍江八一農墾大學動物科技學院出具的分析報告數據為參照依據。

1.4 記錄采樣牛主要癥狀

采集樣本時對臨床型乳房炎的發(fā)病牛進行詳細的臨床癥狀觀察，便于對真菌性乳房炎病例進行臨床癥狀的查核分析。檢查的主要癥狀包括，有癥狀乳區(qū)數量和位置，硬結的有無及數量，熱痛，乳汁顏色及性狀。

1.5 數據分析

使用Epi Info 3.3.2(TM)軟件進行數據統(tǒng)計與分析。

2 結果

具有真菌感染的臨床型乳房炎病牛特征性癥狀包括以下幾方面: (1) 乳區(qū)彌散性腫脹，感覺像面團樣或稍稍有些堅實。(2) 乳房根部像粗大的樹枝狀腫大，用手觸摸感覺非常硬。(3) 乳汁多數分層有乳清析出，半透明狀，奶絮或者奶瓣沉淀于試管底部。(4)很少出現血乳，除非有葡萄球菌或者鏈球菌混合感染。(5)乳房腫脹熱痛幾乎都有，有的出現垂乳現象。

2.1 真菌性乳房炎的地區(qū)分布情況

將采集自不同地區(qū)奶牛乳房炎樣本的真菌分離率進行統(tǒng)計分析，結果發(fā)現，大慶地區(qū)真菌性乳房炎發(fā)病率最高達到44.8%(74/165)。這可能與該地區(qū)散養(yǎng)戶中采集的樣本占多數有關，而且養(yǎng)殖戶治療時間也比較長，多數都在30 d 左右。齊齊哈爾地區(qū)真菌性乳房炎發(fā)病率相對較低34.3%(49/143)，詳見表3。

表3 不同地區(qū)奶牛真菌性乳房炎發(fā)病率情況

2.2 真菌性乳房炎病因分析

表4 表明，病程不到30 d 的病例中，真菌性乳房炎感染率不到20%。然而，對于那些病程超過一個月的病例，這個比例有所增加，當病程為60 d 左右時，真菌性乳房炎陽性率達到最高。我們的調查結果表明，通過流行病學方法分析，病程與真菌性乳腺炎發(fā)病率之間有著動態(tài)關系。這個結果對牛真菌性乳房炎的臨床診斷至關重要。此外還說明，發(fā)現乳腺炎病例應該及時采取有效治療手段，以防它演變?yōu)檎婢匀榉垦锥鴮е聡乐氐慕洕鷵p失和對公眾健康造成危害。

本次所調查的600 例臨床乳腺炎病例中，真菌和酵母樣真菌感染率占39.8%，細菌感染率為59.5%，細菌混合感染的發(fā)生率為18%，酵母菌和酵母樣真菌混合感染的發(fā)生率占7.8%。當病程延長到45 ～60 d 時，酵母菌和酵母樣真菌感染的發(fā)病率最高，為53.3%。然而病程為10 ～20 d 時，細菌感染率87.5%。詳見表4。

表4 不同的病原引起的奶牛乳腺炎發(fā)病率和病程關系

通過病原學方法檢測為酵母菌和酵母樣真菌感染的239 頭具有臨床乳房炎癥狀病牛。統(tǒng)計結果表明，飼養(yǎng)方式、環(huán)境溫度和病程長短明顯影響真菌性乳房炎發(fā)生率。當環(huán)境溫度在15 ～35 ℃(56.3%)和0 ～15 ℃(27.5%) 時，發(fā)病率明顯高于環(huán)境溫度小于0 ℃(15.0%)(P≤0.05)。病程超過45 d(50.8%) 和30 ～45 d(40%) 的發(fā)生率也高于10 ～30 d (14.3%) (P ≤0.05)。在 散 養(yǎng)(47.7%)和集約化飼養(yǎng)(33%) 之間具有統(tǒng)計學顯著差異(P≤0.05)。荷斯坦奶牛和澳牛之間的真菌性乳房炎發(fā)病率差異不顯著(P ＞0.05)。1 ～3 胎和大于3 胎的真菌性乳房炎發(fā)病率差異也不顯著(P＞0.05)。說明奶牛真菌性乳房炎發(fā)病率與牛的品種和生產胎次之間沒有直接的聯系。

3 討論

調查表明，飼養(yǎng)方式能夠影響真菌性乳房炎發(fā)病率。散養(yǎng)飼養(yǎng)方式具有更高的感染率(47.7%)。在國內，散養(yǎng)環(huán)境(擠奶操作不衛(wèi)生和擠奶設備消毒不嚴格) 和動物個體衛(wèi)生狀況遠不如集約化飼養(yǎng)。它可能是兩者之間真菌性乳房炎的發(fā)病率在統(tǒng)計上具有顯著差異的原因。通常，酵母和酵母樣真菌是條件致病菌，當動物機體抵抗力下降時會引起感染而發(fā)病。真菌在自然界隨處可見，比如乳腺、手、土壤和水里，而且在18 ～30 ℃很容易生長，這是它們比其他微生物更容易引起感染的主要原因。另外觀察到，奶牛在環(huán)境溫度15 ～35 ℃比15 ℃以下具有更高的陽性率。因此，在黑龍江省晚春和初秋期間(15 ～35 ℃) 真菌性乳房炎發(fā)病率(56.3%)比較高。

表4 表明，病程不到一個月的病例中，真菌性乳房炎感染率不到15%。然而，對于那些病程超過一個月的病例，這個比例有所增加，當病程達到60 d 左右時，真菌性乳房炎陽性率驟然增加。我們的調查結果表明，通過流行病學方法分析，病程對于真菌性乳腺炎發(fā)病率之間有著動態(tài)關系。這個結果對牛真菌性乳房炎的臨床診斷有重要的參考意義。病程45 d 以上的奶牛乳房炎病例由酵母菌或者酵母樣真菌感染的機率非常高，治療時可以嘗試按照真菌性乳房炎采取措施。此外還說明，發(fā)現乳腺炎病例應該及時治療。

總之，慢性乳房炎在具有臨床癥狀的情況下，發(fā)生真菌感染的機率可高達39.8%。假絲酵母菌(68.2%)是黑龍江省真菌性乳房炎的主要病原體，其中克魯斯念珠菌(29.6%) 和白色念珠菌(12.4%)是真菌性乳房炎的主要流行病原體。我們發(fā)現，散養(yǎng)方式飼養(yǎng)、環(huán)境溫度高(15 ～35 ℃)和疾病病程長(超過30 d) 是霉菌性乳房炎重要的風險因素(OR ＞1)，但是與奶牛品種和胎次沒有必然聯系。然而，我們的研究也有不足之處，比如樣本數量不夠大以及采樣地點不夠豐富。因此，我們將繼續(xù)在更廣泛地區(qū)收集更多的樣本，對我們的結論進一步驗證。