周三女，吳先輝，田妍基

（寧德職業(yè)技術(shù)學(xué)院， 福建 福安 355000）

烏飯樹葉的研究新進展*

周三女，吳先輝，田妍基

（寧德職業(yè)技術(shù)學(xué)院， 福建 福安 355000）

烏飯樹葉藥食同源的歷史已久，富含多種生理活性成分，具有改善血液微循環(huán)、抗?jié)?、抗炎癥、抗疲勞、抗衰老、抗腫瘤等多種藥理活性，開發(fā)前景巨大。本文綜述了烏飯樹葉的色素提取工藝、藥理作用、開發(fā)應(yīng)用等方面的研究新進展，為深入研究烏飯樹提供了相關(guān)的依據(jù)。

烏飯樹葉；提取工藝；藥理作用；開發(fā)應(yīng)用

烏飯樹（VacciniumbracteatumThunb），別名牛筋，南燭草木，杜鵑花科植物，屬常綠灌木，多分布于福建、江蘇、安微、江西、湖南、湖北、廣東、臺灣等地。其根、葉、果實均可入藥。畬家人常于每年3月初三采集其葉，榨汁浸糯米，蒸成烏飯食用，以助陽補陰，明目壯腎，烏飯樹名也由此而得?！侗静菥V目》云：“利腸胃、補骨髓，久服，固精駐顏、輕身明目”。

1 色素提取工藝

目前，食品工業(yè)上所用的色素多為合成色素，具有對人體的累積性致畸和致癌作用，因此天然色素取代合成色素勢在必行。烏飯樹葉汁是天然黑色素，主要成分是懈皮素，還含有氨基酸、有機酸、酚類、糕質(zhì)、還原糖、多糖、蛋白質(zhì)等。烏飯樹葉色素中含有鋇、硼、鐵、錳等 種微量元素，其中許多為人體所需。李增亮等[1]從烏飯樹樹葉乙醇提取物中分離得到了柯伊利素（1）、東莨菪亭（2）、對羥基肉桂酸（3）、對羥基肉桂酸乙酯（4）、咖啡酸乙酯（5）、β-谷甾醇（6）、木犀草素（7）、槲皮素（8）、七葉亭（9）、咖啡酸（10）、異落葉松脂素-9-O-β-D-木糖苷（11），10-O-對羥基肉桂酰-雞屎藤次苷（12），其中化合物4、5、11、12為首次從越橘屬植物中分離得到，化合物1、2、9、10為首次從烏飯樹中分離得到。

杜建明[2]等對烏飯樹葉色素的提取技術(shù)及其穩(wěn)定性做了研究，得出烏飯樹葉色素的最佳浸提方法是，烏飯樹嫩葉加200%，用組織搗碎機搗碎后，加入明礬1%，在50-60℃下浸提1h。該色素水溶液 的最大吸收波長為200nm。烏飯樹葉色素在堿性條件下穩(wěn)定，呈藍黑色，在酸性條件下為暗紅色。該色素的熱穩(wěn)定性好(加熱有利于顯色)，耐還原性強，但耐氧化性較弱。

王立[3]等對烏飯樹樹葉中的黑色素定量方法進行了研究，利用NaNO2-Al(NO3)3和AlCl3 2種方法對烏飯樹葉提取出的黑色素中黃酮類物質(zhì)進行了定量測定，并且與HPLC法進行了比較，得出AlCl3比色法（390nm）測定結(jié)果與實際值較為接近，可作為其檢測方法。

烏飯樹葉色素存在于植物組織細胞內(nèi)，一般的機械破碎法很難將細胞有效地破碎，而化學(xué)破碎法則易造成提取物結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的改變。常規(guī)色素提取法存在流程復(fù)雜、時間長、能耗大等缺點，不利于提高生產(chǎn)效益。而超聲波是一種彈性機械波，利用超聲振動能量，可以改變物質(zhì)組織結(jié)構(gòu)、狀態(tài)、功能和加速這些改變的過程。若將其運用在固液萃取過程中，則可使細胞周圍和細胞內(nèi)產(chǎn)生環(huán)流，從而提高細胞壁和細胞膜的通透性，起到強化萃取過程、有利于細胞內(nèi)有效成分浸出的作用。

顧文秀[4]等用超聲波提取烏飯樹葉色素的工藝條件做了研究，發(fā)現(xiàn)在室溫下，超聲波頻率30KHz，浸提時間10min，溶劑為62%（體積分?jǐn)?shù)）乙醇，液固比為3.5:1（mL：g），浸提1次，超聲波提取法比常規(guī)提取法有明顯的優(yōu)勢，且用溶劑少，提取時間短，所得色素品質(zhì)高。素品質(zhì)更高。此外他們還對色素的穩(wěn)定性進行了實驗。烏飯樹葉色素在酸性條件及低于80℃時是穩(wěn)定的；蔗糖對色素的降解作用不明顯，而檸檬酸具有明顯的增色和護色作用；當(dāng)苯甲酸鈉和山梨酸鉀的質(zhì)量分?jǐn)?shù)高于0.01% 時對色素有明顯的降解作用。

胡志杰[5]等利用微波輻射技術(shù)，在單因素試驗的基礎(chǔ)上，采用正交試驗，對烏飯樹葉黑色素進行提取，得出固液比為1:15，提取液濃度為40%，微波功率300w和輻照時間60s，在波長286nm下測定其吸光值為0.812.黑色素粗品得率為16.4%，明顯高于傳統(tǒng)水浸提和有機溶劑浸提，且操作時間短，提取效率高。

梁紅昌[6]等通過通過包埋法對烏飯樹提取液進行處理，所得提取物的感官性質(zhì)得到了極大的改善。與對照樣品相比,在相同濕度相同時間內(nèi)其含水量差值僅為對照品的22.2%，吸潮性得到了明顯改善；所得提取物溶液色澤清澈、明亮，無異味；HPLC法檢測結(jié)果顯示，樣品總黃酮的含量為0.0172 mg. mg-1。

王曉仙[7]等采用單因素試驗和正交設(shè)計，以總黃酮的含量為指標(biāo),以提取溶劑濃度、料液比、提取時間、提取次數(shù)為試驗因素，優(yōu)化烏飯樹樹葉中總黃酮的超聲提取工藝。優(yōu)化試驗方案所得烏飯樹樹葉中總黃酮最佳提取工藝為：70%乙醇,料液比為1:40，提取時間30 min,提取次數(shù)2次。該提取工藝穩(wěn)定、可行。

大孔吸附樹脂因其具有吸附容量大、 吸附速度快、 選擇性好、 再生處理簡單等優(yōu)點，而且它在提取的同時也有一定的純化作用，所以在天然產(chǎn)物的提取中被廣泛使用[8-10]。利用大孔吸附樹脂提取黃酮類化合物的一般方法是：將植物材料的提取溶液上吸附樹脂柱，首先用水洗脫去除其中的可溶性多糖和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，再用不同濃度的醇溶液洗出其中所吸附的黃酮類物質(zhì)，最后用濃醇洗盡[11]。

王立[12]等利用11種大孔吸附樹脂對烏飯樹樹葉黑色素進行了純化分析，得出AB-8、NKA-9和S-8型大孔吸附樹脂的靜態(tài)吸附量和解吸率較高。選擇AB-8型大孔吸附樹脂進行動態(tài)分析，得出最佳的純化條件：pH值為5.05左右，溶液濃度為0.68～1.33mg/mL，吸附流速為3mL/min。使用7倍體積的95%乙醇解吸率可以超過95%。樹脂使用3次后必須進行再生處理。

近年來為提高浸提步驟的效率和收率，逐漸引入酶解法，所謂酶解法就是用一定濃度的纖維素酶或者相關(guān)復(fù)合酶對烏飯樹葉進行破壁提取，相較普通溶劑浸提法，效率可獲得較大的提升。王立[13]等利用果膠酶和纖維素酶在緩沖液條件下對烏飯樹葉黑色素的提取做了研究，發(fā)現(xiàn)果膠酶和纖維素酶合用有利于提高黑色素的得率，當(dāng)果膠酶用量為2.5mg/g樹葉，纖維素酶用量為3.0mg. g-1樹葉時提取得率超過 33 mg. g-1原料。色素穩(wěn)定性研究結(jié)果表明 ,長時間光照色素顏色加深;酸性條件下色素較穩(wěn)定；提高溫度或延長高溫時間可以增強色素顯色；Mg2+、Na+、K+、Ca2+、Zn2+對色素影響不大,但是Cu2+和Fe3+對烏飯樹樹葉黑色素的穩(wěn)定性影響很大,所以在黑色素保藏和應(yīng)用中避免接觸。而余清[14]等利用酶法提取烏飯樹葉色素，提出纖維素酶與果膠酶配比2:1，酶解時間3h，提取時間3h；復(fù)合酶法提取工藝與傳統(tǒng)有機溶劑提取工藝相比，色素的提取率提高13.2%。

2 藥理作用

現(xiàn)代分析技術(shù)顯示，烏飯樹葉中含有極為豐富的有效成分，如花青苷類、黃酮類、酚類、單寧類等多種有效成分，具有改善血液微循環(huán)、抗?jié)?、抗炎癥、抗疲勞、抗衰老、抗腫瘤等多種藥理活性[15-17]。

劉清飛[18]等通過烏飯樹葉的醇提取物對小鼠的爬桿試驗、血尿素氮含量測定、血中乳酸含量測定及低溫生存試驗，證實其具有抗疲勞、耐寒作用，且無毒。

王立[19]等對烏飯樹葉中提取的色素進行了分離純化，分離出了4種黃酮類物質(zhì)，并且發(fā)現(xiàn)烏飯樹提取物都具有很強的清除自由基能力。王立[20]等還對分離得到的槲皮素、白楊黃素、芹黃素、山奈酚和木犀草素的抗氧化活性進行了研究，發(fā)現(xiàn)它們都具有很強的自由基清除能力，能力最強的是槲皮素。

王立[22]等研究了烏飯樹葉及其提取物對視網(wǎng)膜免受光損傷的保護功能，發(fā)現(xiàn)服用過烏飯樹葉提取物的新西蘭白兔的眼睛視網(wǎng)膜有明顯的保護作用。

王立等[23-24]研究了烏飯樹樹葉提取物（VBTL）對鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的降血糖和血脂作用，并與二甲雙胍的效果進行了比較，發(fā)現(xiàn)雖然效果沒有二甲雙胍明顯，但是用VBTL治療的小鼠較對照組相比，體重增加了61.0%，血糖降低了14.2%。血脂水平也得到了明顯的改善。所以，無論是水或是乙醇提取的烏飯樹功能性成分均能改善鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠血糖。

魏國華[25]等以發(fā)現(xiàn)烏飯樹葉精提物和粗提物的還原力和抑制脂質(zhì)過氧化能力與Vc相當(dāng)，清除DPPH·自由基能力是Vc的1.4倍。閆賦琴等[23]研究發(fā)現(xiàn)烏飯樹樹葉提取物可減輕大鼠的氧化應(yīng)激損傷。

章海燕等[26]等發(fā)現(xiàn)烏飯樹葉提取物對細菌的抑制作用明顯，但對霉菌和酵母的抑菌效果不明顯。除烏飯樹葉粗多糖對枯草桿菌的抑菌效果不明顯外，對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌等有害細菌抑制效果較好。此外，熱處理會降低烏飯樹樹葉水提物和醇提物的抑菌效果，而會改善烏飯樹樹葉粗多糖的抑菌效果。

余清[27]等發(fā)現(xiàn)烏飯樹葉乙醇提取物對小鼠宮頸癌細胞株的生長有明顯的抑制作用，瘤重和腫瘤生長抑制率與陰性對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義，高劑量組（5g/kg）抑瘤率達28.76%。而烏飯樹葉乙醇提取物不能抑制小鼠腹水癌的生長。

程素嬌[28]以II型糖尿病小鼠為研究對象，探討了烏飯樹葉多糖提取物對小白鼠血糖血脂含量的影響，結(jié)果表明烏飯樹葉多糖降血糖機理體現(xiàn)在促進胰島素分泌、修復(fù)糖尿病小鼠受損胰島β細胞核提高糖尿病小鼠抗氧化能力3個方面。

Dore C M P G等[29]烏飯樹果實中多糖含量較高，每100g果實中含有8.4g。多糖具有免疫調(diào)節(jié)、抗癌抗病毒、降血糖、美容等生物功能。

3 開發(fā)應(yīng)用

烏飯樹葉及果實食用及藥用歷史悠久。據(jù)《本草綱目》記載：“（枝葉）苦、平、無毒。（主治）止瀉除睡，強筋益氣力。久服，輕身長年，令人不饑，變白卻老。添味補髓，消滅三蟲?！睘躏垬淙~及果實中的天然成分不但具有強身健體、減肥養(yǎng)顏、延年益壽的功效，而且用烏飯樹葉漬米做成的烏飯具有特殊的色澤，獨特的口味，并且暴露在空氣中數(shù)日不變色，不變味，不變質(zhì)，可見其具有極好的抑菌防腐作用，可作為一種新型的天然食品防腐劑，可以填補我國天然食品添加劑的空白，新昌制藥廠已在抓緊研制中[30]。

國外對烏飯樹產(chǎn)品研究開發(fā)得較早，目前已形成一系列的產(chǎn)品，例如日本已研制出烏飯樹類飲料、果實罐頭、香酒、果汁、果醋等；歐洲一些國家也用烏飯樹提取物治療眼疾。國內(nèi)對烏飯樹的研究開發(fā)較晚，產(chǎn)品相對較少，但近幾年也有一系列的產(chǎn)品問世，如江蘇省中國科學(xué)院植物研究所利用烏飯樹開發(fā)了黑色食品——青精糯；有企業(yè)開發(fā)了“烏飯葉米飯伴侶”，用此米飯伴侶粉末18g可浸泡500g糯米，加開水后放置半小時后直接蒸煮，達到烏米效果，用熱水浸泡后蒸煮效果更佳。

肖珊美[31]提出從烏飯樹葉中提取復(fù)合天然有效成分，利用現(xiàn)代制劑技術(shù)將其制成顆粒劑，并可根據(jù)不同消費者口味習(xí)慣，添加不同的調(diào)味劑，食用時沖泡成溶液即可。

馬奕春[32]以烏飯樹葉為原料，以蜂蜜等為輔料，調(diào)入適量檸檬酸和白砂糖調(diào)節(jié)飲料的酸甜度，灌裝，封口，馬氏殺菌，冷卻后即成為成品，研究開發(fā)出了一款新的烏飯樹保健飲料。

陳明婕[33]也做了烏飯樹飲料的研制，原料采用30%的烏飯樹汁、10%芹菜汁、0.15%檸檬酸、9%白砂糖、以（0.15% CMC-Na+0.2%瓊脂）為復(fù)合穩(wěn)定劑，再用（0.1%NaCl +0.02%ZnCl2）溶液對芹菜進行護綠，基于此工藝生產(chǎn)出來的飲料既有烏飯樹的清香，又有芹菜的特殊香氣，口感清爽，穩(wěn)定性較佳。

陳明婕[33]也開發(fā)了烏飯樹軟糖：選取物果膠含量1.1%，糖酸比90:1，最佳制備條件為pH4.5，凝膠溫度63℃，干燥溫度55℃，干燥時間18h，在此條件下制的軟糖外觀晶瑩、色澤均勻且富有光澤，質(zhì)地柔軟軟滑，口感宜人。

鄧梅忠[34]對水提取-超聲波萃取烏飯樹葉多糖的工藝進行考察，并對所得烏飯樹樹葉多糖進行了卷煙加香試驗，發(fā)現(xiàn)烏飯樹樹葉多糖能改善煙氣質(zhì)，改善余味。

4 小結(jié)與展望

烏飯樹具有多種有效成分，且該植物在我國南方各地均有廣泛的分布，蘊藏量非常大，無論從藥用的角度，還是從保健食療的角度均具有較廣闊的開發(fā)前景。但目前相關(guān)研究還不夠深入，市場很小，高附加值的更少。今后可采用現(xiàn)代的提純分離方法，對其中的有效成分或有效部位進行提取、分離，針對不同的需求制成相應(yīng)產(chǎn)品，方便人們的應(yīng)用；或制成一定的劑型，使其從民間食用品上升到保健食品乃至藥品，不僅可以擴大藥用資源，而且會產(chǎn)生更大的社會及經(jīng)濟效益。

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S567.2

A

1007-550X（2015）08-0037-04

10.3969/j.issn.1007-550X.2015.08.004

寧德市科技計劃項目（2009066）。

2015-07-15

周三女（1981- ），女，江西樟樹人，講師，主要從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測工作。