喬 里， 汪石麗， 李勇軍， 劉俊宏， 王永林， 劉麗娜**

(1.貴陽醫(yī)學院 藥學院 貴州省藥物制劑重點實驗室， 貴州 貴陽 550004；2.貴陽醫(yī)學院附院 臨床醫(yī)學研究中心, 貴州 貴陽 550004；3.貴陽醫(yī)學院 民族藥與中藥開發(fā)應(yīng)用教育部工程研究中心， 貴州 貴陽 550004；4.貴州省骨科醫(yī)院 藥劑科， 貴州 貴陽 550004)

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山梔茶化學成分的研究*

喬 里1,2， 汪石麗3，4， 李勇軍3， 劉俊宏3， 王永林1， 劉麗娜1**

(1.貴陽醫(yī)學院 藥學院 貴州省藥物制劑重點實驗室， 貴州 貴陽 550004；2.貴陽醫(yī)學院附院 臨床醫(yī)學研究中心, 貴州 貴陽 550004；3.貴陽醫(yī)學院 民族藥與中藥開發(fā)應(yīng)用教育部工程研究中心， 貴州 貴陽 550004；4.貴州省骨科醫(yī)院 藥劑科， 貴州 貴陽 550004)

目的： 對山梔茶的化學成分進行研究。方法： 應(yīng)用正、反相硅膠和Sephadex LH-20等柱層析方法分離純化山梔茶，根據(jù)化合物的理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)進行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果： 從山梔茶中分離得到7個化合物，分別鑒定為(1)丁香脂素-4,4′-雙-O-β-D-葡萄糖苷、(2)紫丁香苷、(3)3, 4, 5-三甲氧基苯-1-O-β-D-呋喃芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷、(4)丁香脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、(5)異落葉松樹脂醇-9′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、(6)南燭木樹脂酚-9′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、(7)芥子醛葡萄糖苷。結(jié)論： 化合物(2), (4),(5), (7)為首次從該植物中分離得到，為山梔茶質(zhì)量控制指標性成分的選擇提供了依據(jù)。

化學成分；結(jié)構(gòu)鑒定；海桐花科；山梔茶

山梔茶為海桐花科海桐花屬植物光葉海桐(PittosporumglabratumLindl.)的干燥根，收載于2003年版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標準》中，具有鎮(zhèn)靜、散瘀、止痛等作用，常用于神經(jīng)衰弱，風濕性關(guān)節(jié)炎等癥的治療[1-2]。山梔茶主產(chǎn)地為貴州、廣東、廣西、湖南等，另外香港的大帽山和嘉道理農(nóng)場暨植物園也有少量分布[3]。文獻報道山梔茶以三萜、木脂素、環(huán)烯醚萜及其苷類為主要成分，其醇提取物具有鎮(zhèn)痛和降壓作用[4-7]。為了開發(fā)我國的植物資源，尋找新的有效藥物，對山梔茶不同極性部位進行了鎮(zhèn)痛活性篩選，結(jié)果顯示在大孔樹脂柱層析水洗脫、70%乙醇洗脫和95%乙醇洗脫3個部位中，70%乙醇洗脫部位對醋酸引起的疼痛和熱板引起的疼痛抑制作用較為明顯，為山梔茶鎮(zhèn)痛有效組分，但其化學成分未知。本文對該鎮(zhèn)痛有效組分進行類化學成分研究，從中分離得到了7個化合物，發(fā)現(xiàn)了一個鎮(zhèn)痛作用較為突出的化合物，其中有4種化合物為首次從該植物中分離得到，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

RUDOLPH型自動旋光測定儀(A201102)，JEOL ECX 500MHz核磁共振波譜儀(日本電子株式會社)，ACQUITY-TQD串聯(lián)質(zhì)譜儀，ACQUITY UPLC 超高液相色譜儀(美國沃特世公司)。D101大孔樹脂(青島海洋化工廠)，色譜用硅膠(200～300目)及硅膠GF254預(yù)制板為青島海洋化工廠產(chǎn)品，MCI 75～150 (m為日本三菱化學公司產(chǎn)品；Sephadex LH-20為瑞士Pharmacia Biotech公司產(chǎn)品；其他化學試劑均為分析純。山梔茶藥材采收于貴州省，經(jīng)貴陽中醫(yī)學院生藥學教研室王世清教授鑒定為海桐花科海桐花屬植物光葉海桐的根。

1.2 提取與分離

取山梔茶藥材粗粉11 kg，用70%乙醇回流提取3次，合并提取液，減壓回收溶劑，濃縮至浸膏，浸膏用水混懸，上D101大孔樹脂層析柱，依次用水、70%乙醇、95%乙醇洗脫，分別用水洗脫、70%乙醇洗脫、95%乙醇洗脫3個部位。取70%乙醇洗脫部位400 g，經(jīng)硅膠柱層析以乙酸乙酯-甲醇(10∶0→6∶4，加0.1%醋酸)進行梯度洗脫，得組分S1～S3。組分S3經(jīng)RP-18、Sephadex LH-20、正相硅膠等反復(fù)柱層析分離純化后，得到化合物1(87 mg)、2(20 mg)、3(60 mg)、4(85 mg)、5(7 mg)及6(15 mg)。S1依次經(jīng)MCI、Sephadex LH-20、硅膠等柱層析分離純化得到化合物7 (30 mg)。

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物(1) 白色粉末, ESI-MSm/z：741.3[M-H]-.1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ6.92 (4H, s, H-2, 6, 2′, 6′), 4.88 (2H, d,J= 3.0 Hz, H-7, 7′), 3.12 (2H, m, H-8, 8′), 4.00 (2H, dd,J= 9.0, 3.0 Hz, H-9a, 9′a), 4.15 (2H, m, H-9b, 9′b), 3.76 (12H, s, 3, 3′, OCH3-5,5′), 5.78 (2H, d,J= 6.6 Hz, Glc-H-1, 1′), 4.30-4.39 (12H, m, 葡萄糖2～6位質(zhì)子信號)。13C-NMR (150 MHz, CD3OD) δ 153.8 (C-3,5,3′,5′), 139.1 (C-4,4′), 134.7 (C-1,1′), 105.0 (C-2,2′), 105.0 (Glc-C-1,1′), 104.4 (C-6,6′), 86.7 (C-7,7′), 77.5 (Glc-C-5,5′) ,77.0 (Glc-C-3,3′), 74.9 (Glc-C-2,2′), 72.7 (C-9,9′),70.5 (Glc-C-4,4′), 61.7 (Glc-C-6,6′), 57.4 (OCH3-3,3′,5,5′), 54.7 (C-8,8′)。所得數(shù)據(jù)與文獻[8]報道的丁香脂素-4,4′-雙-O-β-D-葡萄糖苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為丁香脂素-4,4′-雙-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物(2) 白色粉末, ESI-MSm/z: 417.1 [M+HCOO]-.1H-NMR (600 MHz，CD3OD) δ 6.75 (2H, s, H-3, 5) , 6.55 (1H, d,J= 15.9 Hz,H-7) , 6.33 (1H, d, t,J= 15.9, 5.5 Hz, H-8), 4.23 (2H, d,J= 5.5 Hz, H-2,9), 3.86 (6H, s, OCH3-2), 3.35～3.70 (6H, m, 葡萄糖2～6位質(zhì)子信號)。13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 154.1 (C-2), 154.1 (C-6), 135.7 (C-1), 135.1 (C-4), 131.1 (C-8), 129.8 (C-7), 105.2 (C-3), 105.2 (C-5), 63.4 (C-9), 56.8 (2-OCH3) , 105.1 (Glc-1), 78.2 (Glc-5), 77.6 (Glc-3), 75.5 (Glc-2), 71.4 (Glc-4), 62.4 (Glc-6)。所得數(shù)據(jù)與文獻[9]報道的紫丁香苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為紫丁香苷。

化合物(3) 無色粉末, ESI-MSm/z: 477.2 [M-H]-.1H-NMR (600 MHz, CD3OD) δ 6.46 (2H, s, H-2, H-6), 4.96 (1H, d,J= 2.6 Hz, H-1″) , 4.79 (1H, d,J= 7.5 Hz, H-10), 4.02 (2H, d,J= 9.2 Hz, H-6′), 3.94 (1H, d,J= 9.6 Hz, H-4″), 3.87 (1H, d,J= 2.6 Hz, H-2″), 3.81 (6H, s, OCH3-3, 5), 3.75 (1H, d,J= 9.5 Hz, H-4″), 3.70 (3H, s, OCH3-4), 3.63～3.53 (4H, m, 葡萄糖2～6位質(zhì)子信號), 3.42 (2H, s, H-5″)。13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ156.0 (C-1),154.8 (C-3, C-5), 134.5 (C-4), 110.8 (C-1″), 103.1 (C-1′), 96.2 (C-2, C-6), 80.5 (C-3″), 77.9 (C-3′), 77.8 (C-2″), 77.0 (C-4″), 74.9 (C-2′, C-5′), 71.6 (C-4′), 68.8 (C-6′), 65.3 (C-5″), 61.2 (OCH3-4), 56.7 (OCH3-3, 5)。 所得數(shù)據(jù)與文獻[10]報道的3,4,5-三甲氧基苯-1-O-β-D-呋喃芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為3,4,5-三甲氧基苯-1-O-β-D-呋喃芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物(4) 無色粉末, ESI-MSm/z: 579.2 [M-H]-.1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.69 (2H, d, H = 2, 6), 6.63 (2H, d, H-2′, 6′) , 4.86 (1H, d,J= 7.2 Hz, Glc-H-1″), 4.74 (1H, m, H-7), 4.69 (1H, m, H-7′), 4.25 (2H, m, H-9a, 9′a), 3.88 (2H, m, H-9b, 9′b), 3.81～3.83 (12H, m, OCH3-3, 5, 3′, 5′), 3.75 (1H, m, Glc-H-6″a), 3.64 (1H, m, Glc-H-6″b), 3.44 (1H, m, Glc-H-2″), 3.38 (2H, m, Glc-H-3″, 4″), 3.33 (1H, m, Glc-H-5″, 3.28 (2H, m, H-8, 8′)。13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ 154.4 (C-3, 5), 149.3 (C-3′, 5′), 139.5 (C-1), 136.1 (C-4′), 135.5 (C-4), 133.0 (C-1′), 105.3 (Glc-C-1″), 104.8 (C-2, 6), 104.5 (C-2′, 6′), 87.6 (C-7′), 87.1 (C-7), 78.3 (Glc-C-5″), 77.8 (Glc-C-3″),75.7 (Glc-C-2″), 72.9 (C-9, 9′), 71.3 (Glc-C-4″), 62.5 (Glc-C-6″), 57.0 (OCH3-3′, 5′), 56.8 (OCH3-3, 5), 55.7 (C-8′), 55.5 (C-8)。所得數(shù)據(jù)與文獻[11]報道的丁香脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為丁香脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物(5) 無色粉末, ESI-MSm/z: 521.2 [M-H]-.1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.77 (1H, d,J= 1.5Hz, H-2′), 6.72 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.62 (1H, s, H-2), 6.61 (1H, d,J= 1.5 Hz, H-6′), 6.15 (1H, s, H-5), 4.09 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-1″), 3.82 (1H, m, H-8′), 3.78 (6H, s, OCH3-3, 3′), 3.63 (2H, m, H-9), 3.33 (2H, m, H-9′), 3.30～3.20 (6H，葡萄糖2 ～6位質(zhì)子信號), 2.80 (2H, m, H-7), 2.04 (1H, m, H-8), 1.77 (1H, m, H-7′)。13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ 148.9 (C-3), 147.1 (C-3′), 145.8 (C-4), 145.1 (C-4′), 138.7 (C-1′), 134.4 (C-6), 129.1 (C-1), 123.1 (C-6′), 117.4 (C-5), 116.1 (C-5′), 114.3 (C-2′), 112.3 (C-2), 105.2 (C-1″), 78.1 (C-5″), 77.9 (C-3″), 75.2 (C-2″), 71.6 (C-4″), 69.5 (C-9′), 65.2 (C-9), 62.8 (C-6″), 56.4 (OCH3-3, 3′), 47.9 (C-8′), 45.9 (C-7′), 39.5 (C-8), 33.9 (C-7)。所得數(shù)據(jù)與文獻[12]報道的異落葉松樹脂醇-9′-O-β-D-葡萄糖苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為異落葉松樹脂醇-9′-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物(6) 無色粉末， ESI-MSm/z:587.2 [M-H]-.1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.56 (1H, brs, H-8), 6.41 (2H, brs, H-2,6), 4.41 (1H, d,J= 5.9 Hz, H-4), 4.22 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-1″), 3.83 (1H, m, H-3′a), 3.79 (3H, s, OCH3-7), 3.82 (1H, m, Glc-H-6a), 3.72 (6H, s, OCH3-3′,5′), 3.63 (2H, Glc-H-6b, H-2′a), 3.54 (1H, dd,J= 7.7, 14.7 Hz, H-2′b), 3.43 (1H, d,J= 6Hz, H-3′b), 3.33 (3H, s, OCH3-5), 3.30～3.20 (6H，葡萄糖2 ～6位質(zhì)子信號), 2.70 (1H, dd,J= 4.0, 15.1 Hz, H-1a), 2.60 (1H, dd,J= 11.8, 14.5 Hz, H-1b), 2.05 (1H, brs, H-3), 1.69 (1H, brs, H-2)。13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ 148.9 (C-3′, 5′), 148.6 (C-7),147.5 (C-5), 139.4 (C-6), 138.9 (C-1′), 134.4 (C-4′), 130.1 (C-9), 126.4 (C-10), 107.8 (C-8) , 106.8 (C-2′, 6′), 104.8 (Glc-C-1), 78.2 (Glc-C-5), 77.9 (Glc-C-3), 75.2 (Glc-C-2), 71.6 (C-3′), 71.3 (Glc-C-4), 66.1 (C-2′), 62.8 (Glc-C-6), 60.1 (OCH3-5), 56.8 (OCH3-3′,5′), 56.5 (OCH3-3), 46.7 (C-3), 42.8 (C-4), 40.5 (C-2), 33.9 (C-1)。所得數(shù)據(jù)與文獻[13]報道的南燭木樹脂酚-9′-O-β-D-葡萄糖苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為南燭木樹脂酚-9′-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物(7) 無色粉末， ESI-MSm/z: 415.1 [M+HCOO]-.1H-NMR (400 MHz, C5D5N) δ 9.86 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-9), 7.49 (1H, d,J= 15.8 Hz, H-7), 7.04 (2H, s, H-2, 6) , 6.95 (1H, dd,J= 7.8, 15.8 Hz, H-8), 4.54～4.21 (6H, m, 葡萄糖2～6位質(zhì)子信號), 4.02 (1H, m, 糖上OH), 3.81 (6H, OCH3-2), 糖上的端基質(zhì)子信號被吡啶溶劑峰覆蓋。13C-NMR (100 MHz, C5D5N) δ 193.7 (C-9), 153.9 (C-7), 153.2 (C-3, 5), 138.5 (C-4), 130.2 (C-1), 128.4 (C-8), 107.4 (C-2, 6), 104.2 (C-1′), 79.1 (C-3′), 78.5 (C-5′), 76.1 (C-2′), 71.6 (C-4′), 62.6 (C-6′), 56.6 (OCH3-2)。 所得數(shù)據(jù)與文獻[14]報道的芥子醛葡萄糖苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為芥子醛葡萄糖苷。

3 討論

通過對山梔茶鎮(zhèn)痛有效組分進行了化學成分研究，從中分離鑒定得到7個化合物。其中，據(jù)Jung等[15]報道，以5、10 mg/kg口服給藥后，丁香脂素-4,4′-雙-O-β-D-葡萄糖苷(1)在醋酸扭體法和熱板法兩個模型中均顯示出較強的鎮(zhèn)痛活性。故認為山梔茶鎮(zhèn)痛有效組分的鎮(zhèn)痛作用與丁香脂素-4,4′-雙-O-β-D-葡萄糖苷(1)的存在有關(guān)。由于未見相關(guān)報道，其余化合物是否具有鎮(zhèn)痛活性尚待進一步研究。本論文為尋找山梔茶的鎮(zhèn)痛活性成分、確定山梔茶及其相關(guān)制劑的質(zhì)量控制方法奠定了實驗基礎(chǔ)。

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(2015-02-09收稿，2015-03-14修回)

中文編輯： 周 凌；英文編輯： 劉 華

Research On the Chemical Constituents ofPittosporumglabratum

QIAO Li1,2, WANG Shili3,4, LI Yongjun3, LIU Junhong3, WANG Yonglin1, LIU Lina1

(1.GuizhouProvincialKeyLaboratoryofPharmaceutics,SchoolofPharmacy,GuiyangMedicalCollege,Guiyang550004,Guizhou,China; 2.ClinicalResearchCenter,theAffiliatedHospitalofGuiyangMedicalCollege,Guiyang550004,Guizhou,China; 3.EngineeringResearchCenterofMinistryofEducationforDevelopmentandApplicationofEthnicMedicineandTCM,GuiyangMedicalCollege,Guiyang550004,Guizhou,China; 4.PharmaceuticalPreparationSection,OsteologicalHospitalofGuizhouProvince,Guiyang550004,Guizhou,China)

Objective: To study the chemical constituents of the root ofPittosporumglabratum. Methods: Various column chromatographic techniques including silica gel column chromatography (CC), reversed phase C18 CC and Sephadex LH-20 CC were used to isolate the constituents ofP.Glabratum, whose structures were determined by physicochemical property and spectroscopic analysis. Results: Seven compounds were isolated fromP.glabratumand their structures were identified as (1)syringaresinol-4,4'-bis -O-β-D-glucopyranoside, (2)syringin, (3)3,4,5-trimethoxyphenol-1-O-β-D-apiofuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside, (4)syringaresinol-4-O-β-D-glucopyranoside, (5)isolariciresinol 9′-O-β-D-glucopyranoside, (6)lyoniresinol 9′-O-β-D-glucopyranoside and (7)sinapaldehyde glucoside. Conclusions: Compounds (2), (4), (5), and (7) are isolated fromP.glabratumfor the first time and can be regarded as the chemical markers forP.Glabratumt'squality control．

chemical constituents; structural determination;Pittosporaceae;Pittosporumglabratum

國家科技支撐計劃課題(2013BAI11B01); 貴州省科學技術(shù)基金項目(20102217); 貴州省中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)研究開發(fā)專項基金黔科合重G字(2013) 4001); 貴陽醫(yī)學院院基金(2012021號)

時間：2015-05-21

http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20150521.1251.017.html

R284.1

A

1000-2707(2015)05-0447-03

**通信作者 E-mail:yylln815@126.com