陳爽　龐雨樵

摘要：目的 了解高濃度水樣，樣品稀釋對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的影響情況。方法 以水中高濃度亞硝酸鹽氮能力驗(yàn)證考核樣為例，水樣經(jīng)不同倍數(shù)稀釋后進(jìn)行檢測(cè)分析。結(jié)果 樣品經(jīng)50倍與100倍稀釋后測(cè)得結(jié)果相對(duì)偏差僅為0.5%，經(jīng)75倍稀釋后測(cè)得結(jié)果與50倍稀釋相比，相對(duì)偏差達(dá)到6%。采用環(huán)境標(biāo)樣和加標(biāo)回收兩種質(zhì)控手段進(jìn)行質(zhì)控，回收率在98%～102%。結(jié)論 對(duì)于濃度高的樣品，稀釋倍數(shù)對(duì)檢測(cè)結(jié)果有較為明顯的影響。在檢測(cè)時(shí)，進(jìn)行合適倍數(shù)稀釋測(cè)定，可以得到準(zhǔn)確可靠的結(jié)果。

關(guān)鍵詞：亞硝酸鹽氮；分光光度；質(zhì)量控制

能力驗(yàn)證是評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)能力的重要依據(jù)之一，滿意的能力驗(yàn)證結(jié)果可作為實(shí)驗(yàn)室持續(xù)保持其技術(shù)能力的證據(jù)[1]。通常能力驗(yàn)證和樣品復(fù)測(cè)都是以具有參考值的盲樣為判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行確認(rèn)的[2]，在做能力驗(yàn)證樣品時(shí)，通常主要控制的是實(shí)驗(yàn)時(shí)間、實(shí)驗(yàn)溫度、標(biāo)準(zhǔn)曲線、樣品精密度及質(zhì)量控制等方面的實(shí)驗(yàn)條件。然而，對(duì)于濃度高的樣品，樣品的高倍數(shù)稀釋往往會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生較大的影響，而這一方面的影響往往會(huì)被檢測(cè)人員所忽視，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度下降，可能不能達(dá)到滿意甚至不合格。

本文以參加全國(guó)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可委的水中亞硝酸鹽氮能力考核項(xiàng)目為例，水樣經(jīng)不同倍數(shù)稀釋，進(jìn)行檢測(cè)分析，對(duì)檢測(cè)活動(dòng)中盲樣測(cè)試工作具有一定的指導(dǎo)和借鑒意義。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1對(duì)象與方法 方法依據(jù)：GB/T 5750.5-2006重氮偶合分光光度法；樣品：水樣考核樣品，編號(hào)為IERM T13-04-052a；水質(zhì)：亞硝酸鹽環(huán)境標(biāo)樣GSBZ50006-88。

1.2儀器和試劑 VIS-723N可見(jiàn)分光光度計(jì)；水中亞硝酸鹽氮溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）080223；對(duì)氨基苯磺酰胺（AR）；鹽酸N-（1-萘）-乙二胺（AR）。

1.3操作步驟

1.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備移取10.00ml100μg/ml亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)溶液定容至100ml，從中吸取1.00ml，定容至100ml，得到標(biāo)準(zhǔn)使用液濃度為0.10μg/ml，分別吸取0.00、0.50、1.00、2.50、5.00、7.50、10.00、12.50ml標(biāo)準(zhǔn)使用液于50.0ml比色管中，加純水至刻度。測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列吸光度。

1.3.2樣品預(yù)實(shí)驗(yàn) 按考核樣的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)，移取10.00ml水樣定容至250ml，比色測(cè)定?？鄢瞻孜舛華=8.625，此吸光度值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線上1.250μg所對(duì)應(yīng)吸光值0.275，樣品需要進(jìn)行稀釋。假設(shè)標(biāo)準(zhǔn)曲線為一條直線，將8.625帶入曲線，計(jì)算得出，水樣應(yīng)稀釋75倍。

1.3.3水樣樣品的測(cè)定 對(duì)水樣進(jìn)行75倍稀釋：量取1.3.2水樣6.67ml定容至500ml，測(cè)定。為驗(yàn)證水樣經(jīng)75倍稀釋后結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時(shí)對(duì)水樣進(jìn)行50倍稀釋，移取1.3.2水樣10.00ml定容至500 ml，測(cè)定。

1.3.4質(zhì)控樣的測(cè)定

1.3.4.1環(huán)境標(biāo)樣的測(cè)定 按亞硝酸鹽氮環(huán)境標(biāo)樣證書(shū)，移取10.00ml于250ml容量瓶，用純水定容。環(huán)境標(biāo)樣的濃度標(biāo)準(zhǔn)值為0.0816mg/L?，F(xiàn)移取環(huán)境標(biāo)樣50.0ml于250ml容量瓶，定容，制備成濃度為0.01632mg/L，即經(jīng)5倍稀釋的環(huán)境標(biāo)樣溶液。量取75.0ml于500ml容量瓶，定容，制備成濃度為0.01223mg/L，即經(jīng)6.67倍稀釋的環(huán)境標(biāo)樣溶液。分別測(cè)定吸光度。

1.3.4.2加標(biāo)回收的測(cè)定 移取經(jīng)5倍稀釋的環(huán)境標(biāo)樣溶液和經(jīng)50倍稀釋水樣各25.00ml于50.0ml比色管中，混勻后測(cè)定。移取經(jīng)6.67倍稀釋的環(huán)境標(biāo)樣溶液和經(jīng)75倍稀釋水樣各25.00ml于50.0ml比色管中，混勻后測(cè)定。

2 結(jié)果

2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線 亞硝酸鹽氮準(zhǔn)系列測(cè)定數(shù)據(jù)：空白吸光度為0.003，0.003，空白吸光度值很低，接近于0.000。a=0.0004，b=0.2208，r=0.9998，見(jiàn)表1。

2.2樣品的稀釋與測(cè)定 經(jīng)計(jì)算，樣品經(jīng)50倍和75倍稀釋后檢測(cè)結(jié)果所得濃度值的相對(duì)偏差為6%，見(jiàn)表2。

2.3質(zhì)控樣品的測(cè)定

2.3.1環(huán)境標(biāo)樣樣品的測(cè)定 環(huán)境標(biāo)樣的檢測(cè)值都在理論值的標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍之內(nèi)，見(jiàn)表3。

2.3.2加標(biāo)回收的測(cè)定 樣品制備液經(jīng)50倍與75倍稀釋后水樣的加標(biāo)回收率都很不錯(cuò)，見(jiàn)表4。

3 討論

3.1樣品經(jīng)50倍和75倍稀釋后檢測(cè)結(jié)果所得濃度值差別較大。而從表3和表4可以看出，環(huán)境標(biāo)樣和加標(biāo)回收結(jié)果都在允許范圍之內(nèi)。從質(zhì)控方面不能體現(xiàn)出樣品經(jīng)50倍與75倍稀釋測(cè)定結(jié)果哪個(gè)更為準(zhǔn)確。因此，為了能夠確定樣品的準(zhǔn)確值，將樣品稀釋100倍后進(jìn)行測(cè)定，水樣經(jīng)100倍稀釋后濃度值與50倍稀釋后濃度值很接近，相對(duì)偏差為0.5%，見(jiàn)表5。

3.2質(zhì)控樣品 控制樣品中被測(cè)組分的含量應(yīng)與被測(cè)樣品中被測(cè)組分的含量相近[3]。本文以水樣經(jīng)50倍與75倍稀釋后水樣濃度為參照水平，質(zhì)控樣品濃度與稀釋后水樣濃度盡量相一致。

3.2.1環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)樣品 根據(jù)證書(shū)，GSBZ50006-88的理論值為81.6μg/L，即0.0816mg/L。據(jù)計(jì)算，環(huán)標(biāo)稀釋5倍的理論值為0.01632mg/L，與樣品稀釋50倍值（0.0144mg/L）相近。環(huán)標(biāo)稀釋6.67倍的理論值為0.01223mg/L，與樣品稀釋75倍值（0.0101mg/L）相近。因此，環(huán)標(biāo)選則稀釋倍數(shù)為5倍、6.67倍。

3.2.2加標(biāo)回收 添加物濃度水平應(yīng)接近分析物濃度，加入的添加物總量不應(yīng)顯著改變樣品基體[4]。加環(huán)境標(biāo)樣的濃度采用分別與水樣經(jīng)50倍稀釋后和樣經(jīng)75倍稀釋后的濃度相近的濃度，加入體積與水樣稀釋后溶液體積相等。既考慮基體效應(yīng)對(duì)樣品濃度的干擾影響，又沒(méi)有體積的變化，還體現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)各個(gè)因素對(duì)同等濃度亞硝酸鹽氮的影響。

4 結(jié)論

4.1IERMT13-04-052a最終結(jié)果報(bào)樣品經(jīng)50倍和100倍稀釋后測(cè)得的結(jié)果的平均值0.718mg/L（以N計(jì)），換算為以NO2-計(jì)為2.36mg/L，樣品中位值為2.33mg/L，結(jié)果滿意。

4.2采取好的質(zhì)量控制方法和方式，能體現(xiàn)出檢測(cè)結(jié)果是否有系統(tǒng)誤差，得出比較合理可靠的測(cè)定結(jié)果。本文采用環(huán)境標(biāo)樣樣品和加標(biāo)回收兩種質(zhì)控手段進(jìn)行質(zhì)控，如實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有環(huán)境標(biāo)樣用來(lái)質(zhì)控，也可以用標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制與樣品值相近的濃度來(lái)做質(zhì)控，也能得到很好的質(zhì)控效果。

4.3在做能力驗(yàn)證樣時(shí)，當(dāng)水樣樣品濃度過(guò)高，需要稀釋倍數(shù)較大時(shí)，進(jìn)行不同倍數(shù)的稀釋、測(cè)定，可以得到更可靠的結(jié)果。

4.4從理論上來(lái)說(shuō)，樣品稀釋不同的倍數(shù)，所得最終結(jié)果應(yīng)一致，但實(shí)際操作時(shí)，發(fā)現(xiàn)對(duì)于濃度高的樣品，稀釋倍數(shù)對(duì)檢測(cè)結(jié)果有較為明顯的影響，產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因，可能是由于不同倍數(shù)稀釋，對(duì)應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線上的位置不同造成的。

參考文獻(xiàn)：

[1]吳月仙.從實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制談如何提高能力比對(duì)結(jié)果的滿意度[J].現(xiàn)代測(cè)定與實(shí)驗(yàn)室管理，2013，6：42.

[2]李趙相，魏國(guó)威，趙躍.淺談實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可中甲醛盲樣的測(cè)定[J].質(zhì)量論壇，2013，10. [3]GB/T27404-2008，實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)[S].

[4]CNAS-CL10，檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則在化學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用說(shuō)明[S].

編輯/成森