金 鵬，楊 波，張 舒江蘇省淮安市食品藥品檢驗(yàn)所，淮安 3300；江蘇省淮安市食品藥品監(jiān)督管理局，淮安 3300

泰能真?zhèn)蔚目焖勹b別

金 鵬1，楊 波2，張 舒1
1江蘇省淮安市食品藥品檢驗(yàn)所，淮安 223300；2江蘇省淮安市食品藥品監(jiān)督管理局，淮安 223300

目的：運(yùn)用藥品檢測車所載儀器快速鑒別泰能的真?zhèn)?。方法：研究建立泰能外觀鑒別法；采集泰能真品和假冒品的近紅外圖譜（NIR），對圖譜進(jìn)行比對分析，并建立相關(guān)系數(shù)模型。結(jié)果：泰能真品與假冒品的外觀和光譜行為存在明顯差別，利用外觀鑒別法、圖譜比對法和相關(guān)系數(shù)分析法作綜合判斷。結(jié)論：藥品檢測車裝備的藥品快速鑒別儀器，對進(jìn)口藥品的初篩發(fā)揮著很大的優(yōu)勢，能有效保證進(jìn)口藥品現(xiàn)場監(jiān)督的質(zhì)量。

藥品檢測車；泰能；外觀鑒別；近紅外分析

泰能（注射用亞胺培南西司他丁鈉）為美國默克公司于1979年研制的世界上第一個(gè)碳青霉烯類抗生素，具有抗菌譜廣、抗菌作用強(qiáng)及能抵抗除碳青霉烯酶以外的其他大多數(shù)β-內(nèi)酰胺酶等藥理特點(diǎn)，成為臨床上治療多重耐藥革蘭陰性桿菌感染的嚴(yán)重疾病的首選藥物，是頭孢菌素治療失敗的替換品種之一[1]。我國自1992年進(jìn)口該藥以來，一直備受矚目并廣泛應(yīng)用于臨床。近年來不法分子為牟取暴利，在市場上制售假冒的泰能，嚴(yán)重?fù)p害了患者的利益。2015年4月，江蘇省食藥監(jiān)管局公布了2014年食品藥品十大違法案件，淮安市“2·14”生產(chǎn)銷售假冒進(jìn)口高端抗生素假藥案位列其中。該案利用回收的藥瓶、外包裝非法灌裝生產(chǎn)所謂泰能，再返回合法流通渠道和使用環(huán)節(jié)，給藥品安全造成危害，這也是目前進(jìn)口藥品制假、售假新動向。我們成功運(yùn)用藥品快檢車上的精密檢測裝備，建立了泰能外觀鑒別和近紅外快速檢測方法，取得了日常打假和藥品流通驗(yàn)收的良好成效。

1 儀器與試藥

Matrix-F近紅外光譜儀，1.5 m光纖探頭，OPUS

5.0英文版分析軟件（德國布魯克公司）；GY-8型多波段光源實(shí)驗(yàn)檢測儀 （北京金劍之光公司）；SFDA_Ident軟件 （中國食品藥品檢定研究院）；XSDU205型電子分析天平 （瑞士梅特勒公司）；戴安UltiMate3000高效液相色譜儀（美國熱電公司）。

泰能真品（批號：130532、K006968、K007391，規(guī)格：亞胺培南500 mg和西司他丁500 mg）；泰能假冒品（批號：130007，規(guī)格：實(shí)含頭孢拉定0.5 g，而不含亞胺培南和西司他?。?；注射用亞胺培南西司他丁鈉 （珠海聯(lián)邦制藥股份有限公司，批號：141020804，規(guī)格：亞胺培南0.5 g和西司他丁0.5 g）；注射用頭孢拉定（悅康藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號：02320308，規(guī)格：0.5 g）；頭孢拉定對照品（中國藥品生物制品檢定所；批號：1304027-201107）；甲醇為色譜純；其余試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 外觀鑒別[2]

通過目視鑒別和在多波段光源實(shí)驗(yàn)檢測儀中檢測，泰能真品和假冒品主要區(qū)別如下：

2.1.1 外包裝盒 在紫外365 nm光源下檢測，真品上封口防偽標(biāo)貼有淡綠色熒光，下封口防偽標(biāo)貼有淡紅色熒光；假冒品上封口防偽標(biāo)貼有淡綠色熒光，下封口防偽標(biāo)貼則沒有淡紅色熒光。

2.1.2 內(nèi)包裝玻璃瓶 真品鋁蓋無損傷、封口光滑平整，假冒品鋁蓋有損傷、下封口不平整；真品鋁蓋上的“DILUTE WITH 100 ML”打印字字號適中、顏色為藍(lán)色，假冒品打印字字號偏大、顏色為深藍(lán)色；真品塑料蓋表面光滑、蓋底圖案清晰，假冒品塑料蓋表面較為粗糙、蓋底圖案模糊。

2.2 近紅外鑒別[3-4]

2.2.1 光譜采集 用固體測樣光纖抵住玻璃瓶底直接采集樣品近紅外圖譜，光譜掃描范圍為12000～4000 cm-1，掃描次數(shù)為32，分辨率為8 cm-1，采樣模式為漫反射方式。真、假樣品掃描結(jié)果見圖1。

圖1 泰能真品與假冒品原始光譜圖比較

2.2.2 圖譜直觀分析 從圖1看出，泰能真品與假冒品的光譜行為差異較大，在10000～9000 cm-1、7000～4000 cm-1譜段吸收特征明顯不同，可以通過圖譜比對的直觀分析方法區(qū)別真、假泰能。

2.2.3 推測假冒品活性成分 近紅外光譜主要是含C-H、N-H、O-H等含氫基團(tuán)的倍頻和合頻吸收帶。假冒品在活性成分敏感譜段7000～4200 cm-1有明顯的吸收峰，利用藥品檢測車所載近紅外光譜儀軟件SFDA_Ident數(shù)據(jù)庫中的常用抗生素定性模型，來判斷假冒品可能含有的活性成分，當(dāng)選用注射用頭孢拉定定性模型時(shí)，分析報(bào)告顯示假冒品的定性結(jié)果為通過；用OPUS軟件進(jìn)一步分析假冒品和注射用頭孢拉定的近紅外光譜圖（見圖2），可以看出泰能假冒品與注射用頭孢拉定的光譜行為基本一致。初步推測假冒品的活性成分為頭孢拉定。

圖2 泰能假冒品與注射用頭孢拉定的原始光譜圖比較

2.2.4 相似系數(shù)分析法 通過在國家食品藥品監(jiān)督管理總局?jǐn)?shù)據(jù)庫查詢，目前國內(nèi)共有5家生產(chǎn)企業(yè)取得注射用亞胺培南西司他丁鈉批準(zhǔn)文號，為使泰能的近紅外鑒別方法更具專屬性，建立泰能近紅外相關(guān)系數(shù)模型。

方法原理[4]：利用近紅外光譜的指紋特性，以真品藥品的光譜為參考光譜，選擇典型的對活性成分和輔料變化均敏感的光譜指紋區(qū)域，比較流通領(lǐng)域中的藥品與參考光譜的差異，通過設(shè)定合理的閾值，判斷仿冒藥品。

建模參數(shù)條件：在OPUS軟件中對泰能真品和珠海聯(lián)邦制藥股份有限公司生產(chǎn)的注射用亞胺培南西司他丁鈉的近紅外光譜進(jìn)行一階導(dǎo)數(shù)和矢量歸一化（平滑點(diǎn)數(shù)17）預(yù)處理后，作分段比較，尋找有明顯區(qū)別的譜段。從圖3看出，兩者在7200～6500 cm-1和5500～4500 cm-1譜段有明顯差別，故設(shè)置建模參數(shù)如下：譜段為7200～6500 cm-1和5500～4500 cm-1，光譜預(yù)處理方法為一階導(dǎo)數(shù)化、17個(gè)平滑點(diǎn)，設(shè)定閾值97%。參考光譜為泰能真品（批號：K006968）3張?jiān)脊庾V的平均光譜。

圖3 泰能真品與國產(chǎn)注射用亞胺培南西司他丁鈉光譜圖比較

模型驗(yàn)證：運(yùn)用建立的泰能近紅外相關(guān)系數(shù)模型，分別檢測泰能真品（批號：K007391）、泰能假冒品和珠海聯(lián)邦制藥股份有限公司生產(chǎn)的注射用亞胺培南西司他丁鈉，檢測顯示：泰能真品的定性結(jié)果為通過，相似系數(shù)99.79%；泰能假冒品和國產(chǎn)注射用亞胺培南西司他丁鈉定性結(jié)果均為不通過，相似系數(shù)分別為23.03%、90.60%。說明通過相關(guān)系數(shù)分析法可以區(qū)分上述三者。

2.3 實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證

參照注射用頭孢拉定現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)[4]中的高效液相色譜法，對泰能假冒品的活性成分作進(jìn)一步驗(yàn)證。

2.3.1 色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.027mol·L-1磷酸氫二鈉溶液（含0.027mol· L-1辛烷磺酸鈉用磷酸調(diào)節(jié)pH值至8.0）-甲醇 （75∶25）為流動相；采用二極管陣列檢測器檢測，檢測波長為206 nm。

2.3.2 測定方法 精密稱取泰能假冒品適量，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；精密稱取頭孢拉定對照品適量，加水溶解并定量稀釋制成每毫升中含頭孢拉定0.3 mg的溶液作為對照品溶液。精密量取對照品溶液和供試品溶各10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖（見圖4）；使用二極管陣列檢測器在200～400 nm范圍內(nèi)掃描，記錄紫外吸收圖譜（見圖5）。

2.3.3 檢測結(jié)果 從圖4、圖5看出，泰能假冒品檢出與頭孢拉定對照品色譜保留時(shí)間相同的色譜峰，且色譜峰在200～400 nm波長范圍的吸收光譜一致。

圖4 頭孢拉定對照品和泰能假冒品液相色譜圖

圖5 頭孢拉定對照品和泰能假冒品紫外吸收圖譜

3 討 論

3.1 藥品外觀鑒別方法是通過人的感覺器官，運(yùn)用比較法對藥品防偽包裝、包裝相關(guān)物及藥物性狀進(jìn)行鑒別，以分析藥品真?zhèn)蔚某醪借b定技術(shù)，其特點(diǎn)是快速、簡便[2]。本次市場上發(fā)現(xiàn)的泰能假冒品就是不法分子利用回收的泰能真品包裝重新灌裝低值藥品進(jìn)行制假、售假，但只要掌握產(chǎn)品不易被仿制的關(guān)鍵外觀特征，就能快速作出判斷。

3.2 近紅外（NIR）圖譜反映的是制劑中活性成分和輔料的綜合信息，各企業(yè)產(chǎn)品即使處方相同，但原輔料來源、生產(chǎn)工藝等各不相同，NIR圖譜也會有所不同。

3.3 我國對上市后進(jìn)口藥品和國產(chǎn)藥品的監(jiān)督檢驗(yàn)存在著很多差別，如《藥品管理法》[5]未明確進(jìn)口藥品要對其進(jìn)行計(jì)劃抽驗(yàn)或日常監(jiān)督抽驗(yàn)，由此導(dǎo)致產(chǎn)生監(jiān)管盲區(qū)；進(jìn)口藥品的注冊檢驗(yàn)僅限于口岸藥檢所管理，因標(biāo)準(zhǔn)和對照品問題，其他藥檢所無法進(jìn)行監(jiān)督檢驗(yàn)，造成進(jìn)口藥品在流通使用過程中的質(zhì)量監(jiān)督普遍缺失[6-7]。這就給不法分子提供了可乘之機(jī)，以各種方式進(jìn)行制假、售假，牟取暴利。藥品檢測車中裝備的“藥品信息查詢系統(tǒng)”和“藥品快速篩查系統(tǒng)” 對進(jìn)口藥品的初篩發(fā)揮著很大的優(yōu)勢，能達(dá)到“取樣量少、快速篩選、靶向抽樣、目標(biāo)檢驗(yàn)”的目的。

3.4 目前國家食藥監(jiān)管總局統(tǒng)一裝載到藥品檢測車系統(tǒng)上的進(jìn)口藥品近紅外一致性檢驗(yàn)?zāi)Ｐ蛢H100多個(gè)，遠(yuǎn)不能滿足基層藥品檢測車對進(jìn)口藥品的快速篩查要求。建議由口岸藥檢所負(fù)責(zé)采集進(jìn)口藥品的近紅外光譜圖并建立適宜的近紅外模型，將其驗(yàn)證后裝載到全國各藥品檢測車系統(tǒng)，進(jìn)而隨著模型數(shù)量的增加實(shí)現(xiàn)對進(jìn)口藥品流通過程的全程跟蹤，豐富基層藥品監(jiān)管部門對進(jìn)口藥品的監(jiān)督檢查手段。

[1] 易超亮，黃 偉.碳青霉烯類抗生素經(jīng)典藥物泰能[J].醫(yī)藥前沿，2012，2（6）：385.

[2] 易紅兵.外觀鑒別假冒藥品經(jīng)驗(yàn)介紹 [J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2010，17（15）：34-6.

[3] 李 昂，胡 翮.近紅外光譜快速鑒別米非司酮片的真?zhèn)蝃J].中國藥師，2010，13（7）：1048-9.

[4] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典 [S].二部.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：197-8.

[5] 藥品管理法[S].中華人民共和國主席令第45號，2001.

[6] 藥品管理法實(shí)施條例 [S].中華人民共和國國務(wù)院令第360號，2002.

[7] 胡昌勤，馮艷春.近紅外光譜法快速分析藥品[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2009：309-10.

Rapid Identification of Counterfeit Tienam with Mobile Labs

JIN Peng1,YANG Bo2,ZHANG Shu1
1Jiangsu Huaian Institute for Food and Drug Control,Huaian 223300;2Jiangsu Huaian Food and Drug Administration,Huaian 223300

Objective:Torapidly identifycounterfeitTienamTMwith mobilelabs.Methods:The appearance identification method was established for Tienam;Near infrared (NIR)spectra of authentic and counterfeit Tienam were collected and compared to establish the correlation coefficient model.Results:There are significant differences in appearance and NIR spectra between authentic and counterfeit Tienam, the appearance identification method,NIR spectra comparison method and correlation coefficient analysis method can accurately distinguish the counterfeit Tienam.Conclusions:Drug identification system of the mobile labs can effectively improve the quality of site supervision of imported drugs.

Mobile labs;Tienam;Package identification;Near-infrared

R927

A

1673-7806（2015）06-549-03

金鵬，男，副主任藥師，研究方向：化學(xué)藥品質(zhì)量分析E-mail：jcx7912@163.com

2015-04-23

2015-06-01