林江，周攀，時黎明，陶大昌

（瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗科，四川瀘州646000；1山東菏澤市立醫(yī)院檢驗科,山東菏澤274000；2四川大學(xué)華西醫(yī)院醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)研究室，四川成都610041）

62例骨髓增生異常綜合征骨髓細胞遺傳學(xué)分析及預(yù)后觀察

林江，周攀，時黎明1，陶大昌2

（瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗科，四川瀘州646000；1山東菏澤市立醫(yī)院檢驗科,山東菏澤274000；2四川大學(xué)華西醫(yī)院醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)研究室，四川成都610041）

目的：探討骨髓增生異常綜合征（Myelodysplastic syndrome，MDS）的骨髓細胞遺傳學(xué)改變及其與預(yù)后關(guān)系。方法：選擇2001年WHO發(fā)布的新的MDS分型標(biāo)準(zhǔn)診斷的患者62例，根據(jù)國際預(yù)后評分系統(tǒng)(international prognosis scoring system，IPSS)積分將患者分為不同的危險組，對其骨髓細胞采用短期培養(yǎng)法制備染色體標(biāo)本G顯帶后進行核型分析。結(jié)果：62例MDS患者中染色體核型正常24例，核型異常38例，畸變率為61.3%，包括數(shù)目異常22例，結(jié)構(gòu)異常9例。根據(jù)IPSS計算后將患者染色體核型不同分為不同的危險組，其存活期應(yīng)用Log-rank檢驗，不同危險組其總生存（OS）率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P≤0.05）。結(jié)論：染色體核型分析對MDS診斷及預(yù)后評估有重要意義。

骨髓增生異常綜合征；染色體核型；預(yù)后

骨髓增生異常綜合征（myelodysplastic syndrome，MDS）是一種獲得性的、造血功能嚴(yán)重紊亂的造血干細胞惡性克隆性疾病。異常的干細胞克隆以失調(diào)和低效的方式分化，導(dǎo)致外周血細胞數(shù)量減少，功能及形態(tài)異常，最終喪失分化成熟能力演變成急性白血病[1]。目前對MDS的診斷主要依據(jù)骨髓細胞形態(tài)學(xué)，本文通過回顧性分析由我院細胞形態(tài)學(xué)分型確診的62例MDS患者進行骨髓細胞染色體檢查，探討MDS患者遺傳學(xué)改變與其形態(tài)學(xué)分型及預(yù)后的變化。

1 對象和方法

1.1 研究對象

我院確診的MDS患者62例，其中男性35例，女性27例，年齡24～79歲，均為初診患者。所有患者按照2001年世界衛(wèi)生組織（WHO2001）分型診斷標(biāo)準(zhǔn)進行診斷分型[2]，療效標(biāo)準(zhǔn)參照《血液學(xué)診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》[3]，患者臨床治療采用我院常規(guī)方案。

1.2 方法

染色體標(biāo)本取自患者骨髓血，標(biāo)本制備均采用短期培養(yǎng)法：取新鮮標(biāo)本2 mL肝素抗凝，加0.5 mL標(biāo)本于含胎牛血清人骨髓完全培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24～48 h使細胞處于分裂中期，然后加秋水仙酰堿（終濃度為0.05 μg/mL）繼續(xù)放置37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)1 h后終止培養(yǎng),離心將細胞提取出,依次用0. 075 mol/L KCl溶液低滲以及固定液固定,制成細胞懸液，常規(guī)滴片后按G顯帶標(biāo)本制備[4]。每例至少分析20個分裂中期細胞，核型異常描述按《人類細胞遺傳學(xué)國際命名體制（ISSN）》（1995年）進行描述。根據(jù)IPSS積分，將MDS分為不同的危險組。

2 結(jié)果

2.1 細胞遺傳學(xué)分析與WHO分型比較

62例患者中染色體異常者38例，染色體正常者24例，畸變率61.3%。染色體異常核型主要表現(xiàn)為其數(shù)目異常和結(jié)構(gòu)異常等。染色體數(shù)目異常包括其數(shù)目的增加和減少，相關(guān)染色體有：單純數(shù)目異常22例（35.5%）包括-3、-7、-12、-14、-Y、+8、+9、+11；染色體結(jié)構(gòu)異常9例（14.5%）包括5q-、7q-、t(1;9)、t (3;7)、t(15;17)、t(1;7)、平行移位或部分缺失染色體；復(fù)雜染色體核型7例（11.3%）；正常核型24例（38.7%）。38例異常核型患者中難治性貧血（RA）11例（28.9%）；難治性貧血伴環(huán)形鐵粒幼細胞增多型（RAS）3例（0.08%）；難治性貧血伴多系發(fā)育異常型（RCMD）6例（15.8%）；難治性貧血伴原始細胞增多型(RAEB)18例（47.4%）多見復(fù)雜核型；5q-綜合征1例(0.03%)。

2.2 細胞遺傳學(xué)分析與預(yù)后

62例患者自確診之日起采用我院常規(guī)方案臨床治療，中位隨訪時間30個月41例死亡。根據(jù)國際預(yù)后積分系統(tǒng)IPSS計算后將染色體核型分組：①預(yù)后好：正常，-Y，5q-,20q-，中位存活期為45個月;②預(yù)后差：復(fù)雜染色體異?；?號染色體異常，中位存活期為23個月；③預(yù)后中等：其他核型異常，中位存活期為37個月。應(yīng)用Log2rank檢驗三組總生存（OS）率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

MDS是一種惡性造血干細胞克隆性疾病，臨床異質(zhì)性極大，染色體異常在MDS的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用。染色體核型異常患者在WHO分型診斷中占有一定比例，涉及染色體異常改變核型種類較多，而不像白血病具有特異性染色體改變，其中數(shù)目異常多見，高危MDS的染色體畸變率較高，低危MDS染色體畸變率較低。-7,7q-及復(fù)雜核型預(yù)后較差，5q-和正常核型預(yù)后較好，克隆性染色體異常的預(yù)后意義較大，IPSS積分將細胞遺傳的異常作為評價預(yù)后和進展的一個獨立因素[5]。本組資料顯示IPSS危險度分組與染色體核型異常有良好的相關(guān)性，染色體核型是MDS的預(yù)后評估系統(tǒng)的重要指標(biāo)，染色體預(yù)后為好、中、差的患者中位存活期依次減低，說明染色體核型分析可作為MDS患者判斷預(yù)后的因素之一。染色體核型分析可作為MDS患者判斷預(yù)后的一個獨立因素，對MDS的診斷、治療方案的制定及預(yù)后判斷均有較大意義，但由于常規(guī)染色體檢查往往不能發(fā)現(xiàn)低水平的異?？寺』驘o中期細胞分裂相而出現(xiàn)檢測失敗，因此需要染色體FISH檢測及分子生物學(xué)檢查作為必要補充。

1.王鴻利，主編.血液學(xué)和血液學(xué)檢驗[M].第二版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1997：194-197.

2.Jaffe ES,Harris NL,Stein H,et al.Pathology and genetics of tumours of haematopoietic and lymphoid tissues[M]. IARCPress,Lyon,2001:61-751

3.LEE SJ,Zahrieh D,Alyea EAP,et al.Comparison of T-cell-depleted and Non-T-cell-depleted unrelated donor transplantation for hematologic disease:clinical outcomes, quality of life,and costs[J].Blood,2002,100:2697-2702.

4.Wuzi Zhao,Liqing Cheng,Lingmin MU,et al.Modified method of chromo some G-banding in human peripheral blood[J].Jourmal of Chinical Res,2007,31(1):439-471.

5.Che B,ZHaoWL,JinJ,et al.Clinical ad cytogenetic featurers of 508 Chines patiens with myelodysplastic syndrome and comarison with those in Westem countries[J]. Br J Haema2 to 1,2000,108(2):346-356.

（2015-02-15收稿）

作者投稿系統(tǒng)http∶//xb.lzmc.edu.cn/

Cytogenetic analysis of and Prognostic observation in 62 patients with myelodysplastic syndrome

Lin Jiang，Zhou Pan，Shi Liming，Tao Dachang2
Department of Clinical Laboratory，the Affiliated Hospital Of Luzhou Medical College；1Clinical Laboratory, Heze Municipal,Shamdong Province;2Laboratory of Medical Genetics,West China Hospital of Sichuan University

Objective:To analyse cytogenetic changes in patients with myelodysplastic syndrome（MDS）and to investigate their correlation with prognosis.Methods:62 patients with MDS were selected by the new diagnostic criteria of MDS issued by WHO in 2001.These patients were divided into high,medium and low risk groups according to scores assessed by International Prognosis Scoring System(IPSS)Karyotypes of bone marrow cells were analyzed after chromosome samples had showed Giemsa banding.Results:In 62 patients with MDS. the cases of normal karyotype and abnormal karyotype were 24 and 38 respectively.The aberration rate was 61.3%,including abnormal number 22 cases and anomalous structure 9 cases.Total survival rate in different risk groups had significant difference in Log-rank test(P＜0.05).Conclusion:Karyotype analysis is an important indicator for diagnosis and prognosis of MDS.

Myelodysplastic syndrome;Karyotype;Prognosis

R551.3

A

10.3969/j.issn.1000-2669.2015.02.016

林江（1976-），女，主管技師，本科，E-mail：44192432@qq.com

陶大昌（1965-），男，副教授，本科