許靜云 李春麗 李園園

補(bǔ)腎中藥干預(yù)雷公藤多甙致雌性幼鼠生殖損傷的實(shí)驗(yàn)研究

許靜云 李春麗 李園園

目的研究補(bǔ)腎中藥干預(yù)雷公藤多甙(GTW)致雌性幼鼠的生殖損傷。方法取SD雌性幼鼠90只(體重均在50 g左右), 隨機(jī)分為空白組、雷公藤多苷藥組(雷公藤組)、雷公藤多苷藥物+六味地黃藥丸組(六味組), 每組30只。計(jì)算雌性大鼠受孕率、產(chǎn)仔總數(shù)、離乳存活數(shù)。結(jié)果空白組在停藥0、8周的雌鼠受孕率均為95.8%；雷公藤組在停藥0、8周的雌鼠受孕率分別為85.0%和95.0%；六味組在停藥0、8周的雌鼠受孕率分別為92.0%和100.0%；三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。空白組在停藥0周和停藥8周后的雌鼠總胎仔數(shù)分別為96.7%和96.9%；雷公藤組在停藥0周和停藥8周后的雌鼠總胎仔數(shù)分別為97.0%和97.1%；六味組在停藥0周和停藥8周后的雌鼠總胎仔數(shù)分別為98.0%和97.3%；三組差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。連續(xù)用藥12周, 空白組的大鼠受孕率最高(95.9%),其次是六味組(91.0%), 最后是雷公藤組(80.0%), 組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。連續(xù)用藥12周后, 雷公藤組的總胎仔數(shù)及胎仔離乳存活數(shù)最低, 六味組數(shù)量最多, 組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論大鼠性成熟前使用雷公藤多苷對(duì)于受孕、產(chǎn)子及后代的發(fā)育無影響, 補(bǔ)腎中藥能很好的恢復(fù)雷公藤多苷對(duì)生育能力的影響。

近年來, 雷公藤在治療各個(gè)系統(tǒng)疾病的顯著療效越來越受到人們的關(guān)注。它具有祛風(fēng)除濕、消腫止痛的作用, 可用于治療免疫系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、皮膚病、內(nèi)分泌等多個(gè)系統(tǒng)疾病[1], 具有強(qiáng)大的免疫抑制、抗炎、抗腫瘤、抗菌等作用, 療效明顯, 尤其在治療兒科腎臟疾病中發(fā)揮著重要的作用, 如過敏性紫癜、腎病綜合征、紫癜性腎炎、乙肝腎炎、紅斑狼瘡、狼瘡性腎炎、難治性腎病、幼兒類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病。雷公藤多苷治療效果顯著, 但是, 其副作用也不容忽視, 如性腺損傷、皮膚黏膜損害、胃腸道反應(yīng)、骨髓抑制、肝功損害等。近年來, 長(zhǎng)期服藥后可能出現(xiàn)的生殖損傷越來越受到關(guān)注。

補(bǔ)腎中藥(例如六味地黃丸、菟絲子、熟地等中藥)干預(yù)雷公藤多苷所致生殖損害臨床報(bào)道較多。中藥復(fù)方(熟地、山藥、枸杞子等)具有對(duì)抗GTW所致的大鼠子宮重量下降的作用[2]。羅雪芹等[3]發(fā)現(xiàn)五子衍宗丸、益氣活血方對(duì)服用雷公藤多苷致的卵巢萎縮有明顯的修復(fù)作用。省中醫(yī)學(xué)院一附院兒科院長(zhǎng)、名老中醫(yī)丁櫻教授運(yùn)用雷公藤多苷片治療小兒腎臟疾病已三十余年, 在用藥原則、用藥劑量、用藥療程以及用藥禁忌等方面積累了豐富的臨床經(jīng)驗(yàn), 得出一些補(bǔ)腎中藥在保護(hù)雷公藤多苷損傷性腺方面有明顯的療效, 但是缺乏客觀指標(biāo)。本院借鑒丁櫻教授的寶貴經(jīng)驗(yàn), 以此為切入點(diǎn), 選擇六味地黃丸為補(bǔ)腎中藥, 以雌性幼鼠的生仔情況為觀察點(diǎn), 了解補(bǔ)腎中藥保護(hù)雷公藤多苷致生殖系統(tǒng)損傷的作用, 為臨床安全應(yīng)用雷公藤多苷提供依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物 雷公藤多苷粉末：泰州制藥有限公司提供。六味地黃丸：北京同仁堂有限公司,9 g/丸。聚陰離子纖維素等。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分組：SD雌性幼年大鼠90只,3.5周齡, 平均體重(40±5)g。購(gòu)置于開封市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。5只/籠, 實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)環(huán)境溫度20～25℃, 濕度45%～60%, 飼料為實(shí)驗(yàn)大鼠顆粒飼料。適應(yīng)1周后, 開始試驗(yàn)。將其隨機(jī)分為三組：空白組、雷公藤多苷藥組(雷公藤組)、雷公藤多苷藥物+六味地黃藥丸組(六味組),30只/組,6只/籠。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 給藥量 雷公藤組：劑量按照臨床常用劑量1.0 mg/(kg·d),換算成大鼠服用劑量約為6 mg/(kg·d)。六味組：劑量按照臨床成人用量1丸/次,3次/d, 換算出大鼠用量約為0.9 g/(kg·d),按照1 g/(kg·d)給藥。

1.2.2 給藥方法 空白組：灌服聚陰離子纖維素(PAC), 0.3 ml/50 g, q.d.。雷公藤組：使用時(shí)用0.5% PAC液配制成每毫升含生藥1.5 mg的混懸溶液, 每次0.3 ml/100 g灌胃, q.d.。六味組：六味地黃丸粉碎后研成粉劑, 密閉保存, 防潮。灌胃前使用0.5%PAC配制成每1 ml含生藥0.2 g的混懸液, 每次0.3 ml/100 g灌胃, q.d.。再灌服雷公藤多苷液, 劑量同雷公藤多苷組。每周稱重1次, 調(diào)整劑量。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處理 喂藥4周后, 開始第1次合籠, 將所有大鼠分籠喂養(yǎng),2只/籠, 按照2:1比例放入健康成年雄性大鼠1只,2周后取出雄性大鼠(大鼠的性動(dòng)周期為4～5 d,經(jīng)歷3個(gè)周期)。將未受孕的雌鼠與生育能力較強(qiáng)的雄性大鼠于停藥4周后開始第2次合籠。將第2次未受孕的雌性大鼠繼續(xù)與生育能力較強(qiáng)的雄性大鼠于停藥8周后開始第3次合籠,3次合籠均需觀察雌性成年大鼠有無受孕、有無產(chǎn)仔及小仔存活情況, 仔鼠觀察至分娩后21 d。詳細(xì)記錄各組雌性大鼠產(chǎn)仔情況、產(chǎn)仔的數(shù)量、離乳存活數(shù)量。

1.2.4 計(jì)算雌性大鼠受孕率、產(chǎn)仔總數(shù)、離乳存活數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組實(shí)驗(yàn)雌鼠受孕率 空白組在停藥0、8周的雌鼠受孕率均為95.8%；雷公藤組在停藥0、8周的雌鼠受孕率分別為85.0%和95.0%；六味組在停藥0、8周的雌鼠受孕率分別為92.0%和100.0%；三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2.2 三組實(shí)驗(yàn)雌鼠產(chǎn)仔總數(shù)及離乳存活數(shù) 空白組在停藥0周和停藥8周后的雌鼠總胎仔數(shù)分別為96.7%和96.9%；雷公藤組在停藥0周和停藥8周后的雌鼠總胎仔數(shù)分別為97.0%和97.1%；六味組在停藥0周和停藥8周后的雌鼠總胎仔數(shù)分別為98.0%和97.3%；三組差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。連續(xù)用藥12周, 空白組的大鼠受孕率最高(95.9%),其次是六味組(91.0%), 最后是雷公藤組(80.0%), 組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。連續(xù)用藥12周后, 雷公藤組的總胎仔數(shù)及胎仔離乳存活數(shù)最低, 六味組數(shù)量最多, 組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 小結(jié)

連續(xù)用藥12周, 空白組的大鼠受孕率最高(95.9%), 其次是六味組(91.0%), 最后是雷公藤組(80.0%), 組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；證明雷公藤多苷對(duì)性腺損傷是可逆的。

連續(xù)用藥12周后, 雷公藤組的總胎仔數(shù)及胎仔離乳存活數(shù)最低, 六味組數(shù)量最多, 組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),證明雷公藤多苷對(duì)性腺損傷是可逆的。從各組數(shù)據(jù)仍可以清楚的看出雷公藤多苷具有影響雌鼠生育能力的作用, 在停藥8周后, 雷公藤組的雌鼠受孕率及總胎仔數(shù)及胎仔離乳存活數(shù)較停藥0周時(shí)增多, 由以上統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)可以看出六味地黃丸對(duì)雷公藤多苷致生殖能力的損傷有修復(fù)作用, 提示六味地黃丸恢復(fù)雌性幼鼠生育能力效果特別顯著。

綜上所述, 在大鼠性成熟前使用雷公藤多苷對(duì)于受孕、產(chǎn)子及后代的發(fā)育無影響, 補(bǔ)腎中藥能很好的恢復(fù)雷公藤多苷對(duì)生育能力的影響。

[1]蘇維廣, 孟江.雷公藤的臨床應(yīng)用.遼寧中醫(yī)雜志,2003,30(10):845.

[2]粱文波, 黃彩云, 張學(xué)梅, 等.復(fù)方雷公藤多苷對(duì)雌性大鼠生殖系統(tǒng)的影響.中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué),1999,4(4):319-320.

[3]羅雪芹, 劉家玉, 陳東輝, 等.對(duì)雷公藤的減毒增效作用研究.中藥藥理與臨床,2002,18(1):17-18.

Experimental research of tonifying kidney traditional Chinese medicine in intervention of female immature rat reproductive impairment induced by glucosidorum tripterygll totorum

XU Jing-yun, LI Chun-li, LI Yuan-yuan. Kaifeng City Children's Hospital, Kaifeng475000, China

ObjectiveTo research tonifying kidney traditional Chinese medicine in intervention of female immature rat reproductive impairment induced by glucosidorum tripterygll totorum.MethodsA total of90 SD female rats (weight50 g) were randomly divided into blank group, glucosidorum tripterygll totorum group (glucosidorum group), and glucosidorum tripterygll totorum group + Liuwei Dihuang pills group (Liuwei group), with30 cases in each group. Calculation was made on pregnancy rate, total parturition number, and ablactation survival number.ResultsPregnancy rates in 0 and8 weeks of drug withdrawal were all95.8% in the blank group,85.0% and95.0% in the glucosidorum group,92.0% and100.0% in the Liuwei group. There was no statistically significant difference in the three groups (P＞0.05). Total parturition number in 0 and8 weeks of drug withdrawal were96.7% and96.9% in the blank group,97.0% and97.1% in the glucosidorum group,98.0% and97.3% in the Liuwei group. There was no statistically significant difference in the three groups (P＞0.05). After continuous drug administration for12 weeks, the blank group had the highest pregnancy rate (95.9%), followed by the Liuwei group (91.0%) and the glucosidorum group (80.0%). The differences across the three groups had statistical significance (P＜0.05). After continuous drug administration for12 weeks, the glucosidorum group had the lowest total parturition number and ablactation survival number, while those were at the highest level in the Liuwei group. The differences had statistical significance (P＜0.05).ConclusionImplement of glucosidorum tripterygll totorum before sexual maturity of rats has no influences on pregnancy, delivery, and development of offspring. Meanwhile, tonifying kidney traditional Chinese medicine can remarkably restore effected fertility by glucosidorum tripterygll totorum.

Tonifying kidney traditional Chinese medicine; Glucosidorum tripterygll totorum; Female immature rat reproductive impairment

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.16.191

2015-03-16]

475000 開封市兒童醫(yī)院PICU2

【關(guān)鍵詞】補(bǔ)腎中藥；雷公藤多甙；雌性幼鼠生殖損傷