姚安慶　項(xiàng)蘭斌　彭迎霞　等

摘要：殺蟲劑的劑量轉(zhuǎn)移模式是決定其毒力表達(dá)的基礎(chǔ)，當(dāng)藥劑和測(cè)定對(duì)象不變時(shí)，其毒力因不同的處理方法而異。試驗(yàn)采用點(diǎn)滴法、離體噴霧法、在體噴霧法和浸葉法測(cè)定溴氰蟲酰胺和甲維鹽對(duì)斜紋夜蛾（Spodptera litura Fabricius）的毒力，探討其劑量轉(zhuǎn)移模式對(duì)毒力表達(dá)的影響。結(jié)果表明，點(diǎn)滴法測(cè)得的LC50分別為32.22、34.39 mg/L；離體噴霧法測(cè)得的LC50分別為142.02、28.56 mg/L；在體噴霧法測(cè)得的LC50分別為1 14.99、45.46 mg/L；浸葉法測(cè)得LC50分別為1 616.66、1.24 mg/L。可見因殺蟲劑的劑量轉(zhuǎn)移模式不同，其毒力可以相差50倍以上。此結(jié)論對(duì)昆蟲的抗性測(cè)定方法的選擇具有重要的啟示作用。

關(guān)鍵詞：劑量轉(zhuǎn)移模式；測(cè)定方法；溴氰蟲酰胺；甲維鹽；斜紋夜蛾（Spodptera litura Fabricius）

中圖分類號(hào)：S482.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）22-5424-03

生物測(cè)定是評(píng)價(jià)和檢測(cè)農(nóng)藥生物活性及其變化（抗性檢測(cè)）最常用的方法。生物測(cè)定方法的合理性和科學(xué)性是決定生物測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確的前提。同種藥劑對(duì)同種測(cè)定對(duì)象的毒力可因測(cè)定方法的不同而出現(xiàn)非規(guī)律性變化，其毒力的比值可以達(dá)到數(shù)十倍甚至數(shù)百倍[1，2]。測(cè)定結(jié)果的可變性顯然給藥劑的活性評(píng)價(jià)尤其是抗性檢測(cè)結(jié)果帶來不確定性。針對(duì)這一問題，國內(nèi)學(xué)者就某些重要的害蟲種類提出了新的抗性測(cè)定方法[3-6]，以確?？剐詼y(cè)定結(jié)果符合田間種群的抗性水平。明確引起同種藥劑和測(cè)定對(duì)象的毒力變化的原因，對(duì)于選擇合理的測(cè)定方案具有重要的理論和實(shí)踐意義。

基于殺蟲劑毒理學(xué)的一般原理，姚安慶等[7]提出殺蟲劑劑量轉(zhuǎn)移生物學(xué)的理論，以此闡明殺蟲劑測(cè)定方法與毒力測(cè)定結(jié)果關(guān)系的一般規(guī)律，即毒力的表達(dá)過程是殺蟲劑釋放于一個(gè)特定的生態(tài)體系（寄主和昆蟲）后所發(fā)生的一系列劑量轉(zhuǎn)移行為的結(jié)果。其劑量轉(zhuǎn)移顯然受到藥劑的作用方式、寄主生理以及昆蟲行為的制約。試驗(yàn)以溴氰蟲酰胺和甲維鹽為藥劑，采用點(diǎn)滴法、離體噴霧法、在體噴霧法和浸葉法4種方法測(cè)定其對(duì)斜紋夜蛾（Spodptera litura Fabricius）3齡幼蟲的毒力，探討殺蟲劑劑量轉(zhuǎn)移模式[8]對(duì)殺蟲活性的影響，并分析殺蟲劑的作用方式與劑量轉(zhuǎn)移模式間的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試藥劑 19%溴氰蟲酰胺懸浮劑，美國杜邦公司生產(chǎn)；5%甲維鹽水分散粒劑，山西奇星農(nóng)藥有限公司生產(chǎn)。

1.1.2 供試?yán)ハx 從戶外荷葉上采集斜紋夜蛾幼蟲于室內(nèi)飼養(yǎng)，每天喂食新鮮荷葉，灑水保濕，待其老熟化蛹，將已化蛹的昆蟲置于濕度適宜的砂土中，待其羽化后喂食蜂蜜水，放入專用產(chǎn)卵紙供其產(chǎn)卵，卵孵化后養(yǎng)至3齡幼蟲供毒力測(cè)定。

1.2 測(cè)定方法

采用4種不同測(cè)試方法，具體用藥劑量見表1、表2。

1.2.1 點(diǎn)滴法 用丙酮將19%溴氰蟲酰胺和5%甲維鹽分別稀釋成5個(gè)不同濃度，并設(shè)丙酮為空白對(duì)照，每個(gè)濃度選取3齡斜紋夜蛾30頭。用微量點(diǎn)滴儀點(diǎn)滴藥液于前胸背板上，待藥液揮發(fā)后，將試蟲置于培養(yǎng)皿中（直徑18 cm），加入適量荷葉葉片飼養(yǎng)，48 h后檢查死亡情況。

1.2.2 離體噴霧法 將19%溴氰蟲酰胺和5%甲維鹽分別用清水稀釋5個(gè)濃度梯度，并設(shè)清水對(duì)照。選取3齡幼蟲30頭，置于干燥的培養(yǎng)皿內(nèi)，使用Potter噴霧塔處理（噴霧壓力1.47×105 Pa），然后放入適量荷葉葉片，48 h后檢查昆蟲的存活率及死亡頭數(shù)。

1.2..3 在體噴霧法 將19%溴氰蟲酰胺和5%甲維鹽分別用清水按等比法稀釋5個(gè)濃度梯度，并設(shè)清水對(duì)照。將荷葉葉片放在鋪有一層濕潤濾紙的培養(yǎng)皿中，選取3齡幼蟲30頭，使用Potter噴霧塔處理（噴霧壓力1.47×105 Pa），48 h后檢查昆蟲死亡頭數(shù)。

1.2.4 浸葉法 用19%氯蟲苯甲酰胺、5%甲維鹽用清水配制成5個(gè)不同濃度，并設(shè)清水對(duì)照。將荷葉葉片分別投入藥液中浸漬10 s后取出，晾去浮水后放在鋪有一層濕潤濾紙的培養(yǎng)皿中，選取3齡幼蟲30頭，放入處理過的葉片飼喂，48 h后檢查試蟲的死亡頭數(shù)。

1.3 數(shù)據(jù)分析

統(tǒng)計(jì)處理死亡率，以藥劑濃度的對(duì)數(shù)值作為橫坐標(biāo)，以死亡率的幾率值為縱坐標(biāo)，用DPS軟件計(jì)算毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)、LC50。

2 結(jié)果與分析

溴氰蟲酰胺和甲維鹽在不同的生物測(cè)定方法中殺蟲效果見表3和表4。對(duì)48 h的死亡率幾率值和濃度的對(duì)數(shù)值進(jìn)行回歸分析，得出農(nóng)藥在不同的生物測(cè)定方法中的毒力回歸方程、LC50以及相關(guān)系數(shù)r（表5、表6）。

可見，溴氰蟲酰胺采用點(diǎn)滴法測(cè)定時(shí)，殺蟲活性最好，浸葉法殺蟲活性最差，說明該藥劑以昆蟲體壁劑量轉(zhuǎn)移模式為主，而經(jīng)口劑量轉(zhuǎn)移模式不是很重要，這與已有的研究結(jié)果有所差異[6]，這顯然與測(cè)試對(duì)象的行為生物學(xué)差異密切相關(guān)。因?yàn)橐延械难芯拷Y(jié)論是基于二化螟的室內(nèi)活性試驗(yàn)，不僅是2種生物的取食習(xí)性存在很大差異，且藥劑在水稻植株和荷葉上的行為學(xué)模式也相去甚遠(yuǎn)[9]。由此可以看出殺蟲劑的劑量轉(zhuǎn)移模式不僅受制于化合物的作用方式，同時(shí)也與靶標(biāo)害蟲的行為生物學(xué)及寄主生物學(xué)關(guān)系密切。溴氰蟲酰胺離體和在體噴霧法的LC50分別為142.02和114.99 mg/L，即2種方法處理的活性差異不明顯，說明該化合物從昆蟲跗節(jié)和體壁的劑量轉(zhuǎn)移模式在總的轉(zhuǎn)移模式中的權(quán)重相近。與溴氰蟲酰胺相反，甲維鹽采用浸葉法測(cè)定時(shí)活性最好，也就是說此化合物以經(jīng)口劑量轉(zhuǎn)移模式為主，這點(diǎn)也可以從在體活性高于離體活性得到證明。

由此可見，化合物的劑量轉(zhuǎn)移模式受到化合物的分子結(jié)構(gòu)特征和測(cè)試對(duì)象的行為生物學(xué)特性的共同影響，而劑量轉(zhuǎn)移模式是影響化合物生物活性評(píng)價(jià)方法的關(guān)鍵因素，也是決定昆蟲抗藥性機(jī)理形成的前提條件，這對(duì)昆蟲抗藥性測(cè)定方法的選擇顯然具有重要的指導(dǎo)意義。事實(shí)上，一些室內(nèi)抗性測(cè)定結(jié)果與田間昆蟲敏感性不一致性，究其本質(zhì)，是測(cè)定方法不能真實(shí)地反映化合物的劑量轉(zhuǎn)移模式所致[4，10]。

3 小結(jié)與討論

同一種藥劑對(duì)某一種特定的靶標(biāo)昆蟲的活性隨測(cè)定方法的不同而出現(xiàn)較大的差異，這種現(xiàn)象與藥劑的作用方式以及昆蟲的行為生物學(xué)特性密切相關(guān)，事實(shí)上寄主植物的生物學(xué)特性也會(huì)對(duì)殺蟲劑劑量轉(zhuǎn)移模式產(chǎn)生重要影響。研究藥劑進(jìn)入昆蟲體內(nèi)的途徑與其作用方式、靶標(biāo)昆蟲行為生物學(xué)、藥劑劑量轉(zhuǎn)移生物學(xué)是制定殺蟲劑生物活性評(píng)價(jià)方案尤其是抗性檢測(cè)方法的前提。當(dāng)測(cè)定方法越符合化合物劑量轉(zhuǎn)移生物學(xué)的原理時(shí)，其測(cè)定結(jié)果就越符合化合物在田間條件下實(shí)際的生物活性水平。也就是說一個(gè)特定的抗性測(cè)定方法中藥劑的劑量轉(zhuǎn)移模式與該藥劑在田間條件下完全一致時(shí)，所獲得的測(cè)定結(jié)果才能夠準(zhǔn)確反映昆蟲抗性水平，否則就可能高估或低估其抗藥性。這可能就是吳益東等[10]用點(diǎn)滴法和浸葉法分別測(cè)定棉鈴蟲對(duì)久效磷和氯氰菊酯的抗藥性時(shí)，只有后者的檢測(cè)結(jié)果符合田間抗性水平的原因。

參考文獻(xiàn)：

[1] 楊 健，王 真，姚安慶.昆蟲抗藥性測(cè)定與殺蟲劑穿透生物學(xué)[J].應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào)，2011，48（2）：421-425.

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[3] 鄧業(yè)成，龍麗萍，林明珍，等.褐飛虱抗藥性測(cè)定方法研究[J].廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，1998（2）：75-77.

[4] 陳年春，李永平，覃柳祥，等.棉蚜抗性測(cè)定方法的研究[A].中國化學(xué)工業(yè)學(xué)會(huì)農(nóng)藥專業(yè)委員會(huì)第八屆年會(huì)論文集[C].北京：中國化工出版社，1996.

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[8] 姚安慶，孫明文，黃日林.吡蚜酮兩種處理方式對(duì)竹莖扁蚜的毒力測(cè)定比較[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013（11）：82-84.

[9] 屠豫欽.農(nóng)藥劑型和制劑與農(nóng)藥的劑量轉(zhuǎn)移[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，1999，1（1）：1-6.

[10] 吳益東，沈晉良，陳 進(jìn)，等.用點(diǎn)滴法和浸葉法監(jiān)測(cè)棉鈴蟲抗藥性的比較[J].植物保護(hù)，1996，22（5）：3-6.

（責(zé)任編輯 陳 焰）

3 小結(jié)與討論

同一種藥劑對(duì)某一種特定的靶標(biāo)昆蟲的活性隨測(cè)定方法的不同而出現(xiàn)較大的差異，這種現(xiàn)象與藥劑的作用方式以及昆蟲的行為生物學(xué)特性密切相關(guān)，事實(shí)上寄主植物的生物學(xué)特性也會(huì)對(duì)殺蟲劑劑量轉(zhuǎn)移模式產(chǎn)生重要影響。研究藥劑進(jìn)入昆蟲體內(nèi)的途徑與其作用方式、靶標(biāo)昆蟲行為生物學(xué)、藥劑劑量轉(zhuǎn)移生物學(xué)是制定殺蟲劑生物活性評(píng)價(jià)方案尤其是抗性檢測(cè)方法的前提。當(dāng)測(cè)定方法越符合化合物劑量轉(zhuǎn)移生物學(xué)的原理時(shí)，其測(cè)定結(jié)果就越符合化合物在田間條件下實(shí)際的生物活性水平。也就是說一個(gè)特定的抗性測(cè)定方法中藥劑的劑量轉(zhuǎn)移模式與該藥劑在田間條件下完全一致時(shí)，所獲得的測(cè)定結(jié)果才能夠準(zhǔn)確反映昆蟲抗性水平，否則就可能高估或低估其抗藥性。這可能就是吳益東等[10]用點(diǎn)滴法和浸葉法分別測(cè)定棉鈴蟲對(duì)久效磷和氯氰菊酯的抗藥性時(shí)，只有后者的檢測(cè)結(jié)果符合田間抗性水平的原因。

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[10] 吳益東，沈晉良，陳 進(jìn)，等.用點(diǎn)滴法和浸葉法監(jiān)測(cè)棉鈴蟲抗藥性的比較[J].植物保護(hù)，1996，22（5）：3-6.

（責(zé)任編輯 陳 焰）

3 小結(jié)與討論

同一種藥劑對(duì)某一種特定的靶標(biāo)昆蟲的活性隨測(cè)定方法的不同而出現(xiàn)較大的差異，這種現(xiàn)象與藥劑的作用方式以及昆蟲的行為生物學(xué)特性密切相關(guān)，事實(shí)上寄主植物的生物學(xué)特性也會(huì)對(duì)殺蟲劑劑量轉(zhuǎn)移模式產(chǎn)生重要影響。研究藥劑進(jìn)入昆蟲體內(nèi)的途徑與其作用方式、靶標(biāo)昆蟲行為生物學(xué)、藥劑劑量轉(zhuǎn)移生物學(xué)是制定殺蟲劑生物活性評(píng)價(jià)方案尤其是抗性檢測(cè)方法的前提。當(dāng)測(cè)定方法越符合化合物劑量轉(zhuǎn)移生物學(xué)的原理時(shí)，其測(cè)定結(jié)果就越符合化合物在田間條件下實(shí)際的生物活性水平。也就是說一個(gè)特定的抗性測(cè)定方法中藥劑的劑量轉(zhuǎn)移模式與該藥劑在田間條件下完全一致時(shí)，所獲得的測(cè)定結(jié)果才能夠準(zhǔn)確反映昆蟲抗性水平，否則就可能高估或低估其抗藥性。這可能就是吳益東等[10]用點(diǎn)滴法和浸葉法分別測(cè)定棉鈴蟲對(duì)久效磷和氯氰菊酯的抗藥性時(shí)，只有后者的檢測(cè)結(jié)果符合田間抗性水平的原因。

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[6] 吳 敏，張真真，高聰芬.水稻二化螟抗藥性監(jiān)測(cè)方法[J].應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào)，2013，50（2）：548-552.

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[8] 姚安慶，孫明文，黃日林.吡蚜酮兩種處理方式對(duì)竹莖扁蚜的毒力測(cè)定比較[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013（11）：82-84.

[9] 屠豫欽.農(nóng)藥劑型和制劑與農(nóng)藥的劑量轉(zhuǎn)移[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，1999，1（1）：1-6.

[10] 吳益東，沈晉良，陳 進(jìn)，等.用點(diǎn)滴法和浸葉法監(jiān)測(cè)棉鈴蟲抗藥性的比較[J].植物保護(hù)，1996，22（5）：3-6.

（責(zé)任編輯 陳 焰）