唐 云， 郭志華*， 李 雅， 孫 濤， 吳剛強(qiáng)， 劉 梨， 鄧 杰

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南長沙410007；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南長沙410208）

益心泰顆粒對慢性心衰兔超聲心動圖指標(biāo)及血清腦鈉肽的影響

唐 云1， 郭志華1*， 李 雅2， 孫 濤1， 吳剛強(qiáng)1， 劉 梨1， 鄧 杰1

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南長沙410007；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南長沙410208）

目的探討益心泰顆粒對慢性心衰兔超聲心動圖指標(biāo)及血清腦鈉肽 （BNP）的影響。方法阿霉素耳緣靜脈注射建立慢性心衰兔模型，將造模成功的家兔分為模型組、益心泰低、中、高劑量組和呋塞米組；另設(shè)正常對照組。灌胃4周，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后檢測超聲心動圖指標(biāo)及血清腦鈉肽 （BNP）的水平。結(jié)果（1）治療后益心泰各劑量組左心室舒張末期內(nèi)徑（LVIDd）、左心室收縮末期內(nèi)徑（LVIDs）及血清BNP水平均降低（P＜0.05），而LVEF、E/A明顯升高（P＜0.01）。（2）與模型組比較，益心泰各劑量組LVIDd、LVIDs及血清BNP水平均降低（P＜0.05），而LVEF、E/A明顯升高 （P＜0.01）；與低劑量組比較，中、高劑量組改善超聲心動圖指標(biāo)和血清BNP水平更明顯 （P＜0.05）。結(jié)論益心泰顆?？梢悦黠@改善慢性心衰兔左室結(jié)構(gòu)和功能、降低血清BNP水平，且中、高劑量組療效優(yōu)于低劑量組。

益心泰顆粒；慢性心衰；超聲心動圖；BNP

慢性心衰（chronic heart failure，CHF）是指心臟的射血功能受損時，心排血量不能滿足機(jī)體代謝需要的一種臨床綜合征，也是導(dǎo)致死亡的重要原因之一［1-2］。據(jù)美國心臟協(xié)會報道，其發(fā)病率為1%，且繼續(xù)逐年增長，在老年人群中尤其明顯［3］。超聲心動圖和腦鈉肽（brain natriuretic peptide，BNP）是目前診斷及判定慢性心衰療效的最可靠指標(biāo)，本研究采用阿霉素耳緣靜脈注射致慢性心衰兔模型，檢測超聲心動圖指標(biāo)和血清BNP，深入探討益心泰顆粒對慢性心衰兔左室結(jié)構(gòu)、功能及血清BNP的影響，為益心泰顆粒的臨床推廣應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 成年健康普通級新西蘭兔80只，雌雄各半，體質(zhì)量1.5～2.0 kg，動物許可證批號SCXK（湘）2009-0012。

1.2 主要實(shí)驗(yàn)藥品及試劑 益心泰顆粒，由黃芪、丹參、紅花、澤瀉、豬苓組成 （湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥劑科）；呋塞米片 （江蘇亞邦愛普森藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H3202148）；注射用鹽酸多柔比星，主要成分鹽酸阿霉素 （深圳萬樂藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H44024361）；腦鈉肽Elisa試劑盒（美國RD公司）。

1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備 飛利浦iE33彩色多普勒超聲診斷儀（荷蘭Philips公司生產(chǎn)，湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院B超室提供）。

1.4 分組及模型制備 參照文獻(xiàn) ［4］報道造模，隨機(jī)抽取10只為正常對照組，70只為模型組。將10mg注射用鹽酸多柔比星溶于10 mL生理鹽水中，配制成質(zhì)量濃度為1 mg/mL的溶液，每次注射前用75%乙醇消毒耳緣靜脈局部皮膚，注射藥量為1 mg/kg，每周2次，連續(xù)8周，即累計(jì)給藥量至16 mg/kg。

1.5 動物分組及給藥方法 將造模成功兔按LVEF值分層后隨機(jī)分為5組，分別為模型組、益心泰低、中、高劑量組和呋塞米組，另加正常對照組。實(shí)驗(yàn)第9周開始灌胃，正常對照組和模型組均予以等容積的生理鹽水，低、中、高劑量組分別予以2.1、4.2、8.4 g/kg益心泰，呋塞米組予以2 mg/kg呋塞米。灌胃共4周，1次/d，呋塞米組如體質(zhì)量穩(wěn)定后隔日1次，灌胃容積為10 mL/kg。

1.6 檢測指標(biāo)及方法

1.6.1 超聲心動圖指標(biāo) 造模及治療后稱定質(zhì)量，烏拉坦溶液麻醉，將探頭置于已脫毛的心前區(qū)，觀察左心室收縮末期內(nèi)徑（LVIDs）、左心室舒張末期內(nèi)徑（LVIDd）、左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、E峰與A峰的比值（E/A）。

1.6.2 血清BNP水平檢測 采用ELISA法檢測，造模及治療后，分別于耳緣靜脈采血3 mL，檢測血清BNP水平，具體操作步驟按試劑盒說明進(jìn)行。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，計(jì)量資料均以 （x±s）表示。組內(nèi)前后比較，采用配對t檢驗(yàn)；兩組間比較，采用成組t檢驗(yàn)；不符合正態(tài)性和方差齊性者，采用秩和檢驗(yàn)；多個樣本間的均數(shù)比較，采用方差分析。

2 結(jié)果

2.1 造模后超聲心動圖指標(biāo)及血清BNP水平的變化 與對照組比較，造模后LVIDs、LVIDd及血清BNP水平明顯升高（P＜0.01），LVEF、E/A比值明顯降低（P＜0.01），見表1和圖1。

表1 造模后兩組超聲心動圖指標(biāo)及血清BNP水平的變化(x±s)

圖1 造模后兩組實(shí)驗(yàn)兔超聲心動圖

2.2 治療后各組超聲心動圖指標(biāo)及血清BNP水平的變化

與治療前比較，治療后對照組與模型組超聲心動圖指標(biāo)及血清BNP水平均無明顯變化 （P＞0.05），低、中、高劑量組及呋塞米組LVIDd、LVIDs及血清BNP水平顯著下降（P＜0.05或P＜0.01），LVEF、E/A值明顯升高（P＜0.01）。

與對照組比較，模型組LVIDd、LVIDs及血清BNP水平均明顯升高（P＜0.01），LVEF、E/A值顯著下降（P＜0.01）；與模型組比較，各治療組LVIDd、LVIDs及血清BNP水平均明顯降低（P＜0.05或P＜0.01），LVEF、E/A值顯著升高 （P＜0.01）；與低劑量組比較，中劑量組LVIDd、LVIDs及E/A值無顯著差異（P＞0.05），LVEF明顯升高 （P＜0.01），血清BNP水平顯著下降 （P＜0.01），高劑量組和呋塞米組LVIDd、LVIDs及血清BNP水平均顯著降低（P＜0.05或P＜0.01），LVEF、E/A值均明顯升高（P＜0.05或P＜0.01）；中、高劑量組與呋塞米組LVIDd、LVIDs、LVEF、LVFS及血清BNP水平均無顯著差異（P＞0.05），見表2。

表2 治療后超聲心動圖指標(biāo)及血清BNP水平的變化(x±s)

3 討論

慢性心衰動物模型的制備方法有多種，但鹽酸多柔比星 （ADR）耳緣靜脈注射致慢性心衰兔模型具有操作簡單、死亡率低等特點(diǎn)，是一種成功的慢性心衰模型的造模方法［5］。ADR致慢性心衰的作用機(jī)制大致有以下幾點(diǎn)：①氧化應(yīng)激ADR能導(dǎo)致自由基的大量積累，最終破壞心肌細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能［6］。②鈣超載ADR所致慢性心衰與鈣功能障礙造有關(guān)［7］。ADR可激活Ryanodine受體，導(dǎo)致鈣庫開放，大量鈣離子外流，形成鈣超載，引發(fā)心律失常。③細(xì)胞凋亡和死亡，這是ADR導(dǎo)致心臟毒性發(fā)生的另一個非常重要的機(jī)制［8］。ADR可直接抑制脫氧核糖核酸（DNA）和抑制核糖核酸 （RNA）的合成，從而引起細(xì)胞釋放出大量凋亡誘導(dǎo)因子，加速心肌細(xì)胞的凋亡和壞死。

本實(shí)驗(yàn)造模后，LVEF、LVFS、E/A比值明顯降低（P＜0.01）；LVIDs、LVIDd顯著升高（P＜0.01），血清BNP水平明顯升高 （P＜0.01），提示造模后兔的心室腔增大、心功能明顯減退，呈現(xiàn)明顯的慢性心衰結(jié)構(gòu)和功能改變。但是，與治療前比較時發(fā)現(xiàn)，治療后模型組的上述指標(biāo)未發(fā)生明顯變化 （P＞0.05），說明此模型未因注射藥物的停止而逐漸恢復(fù)，是一種穩(wěn)定的模型。綜上可知，ADR耳緣靜脈注射 （每次1 mg/kg，每周2次，連續(xù)8周，累計(jì)劑量為16mg/kg）致的CHF兔模型是一種成功的復(fù)制慢性心衰模型方法。

慢性心衰按照其證候?qū)W特征，屬于 “心悸”、“水腫”、“心痹”等范圍。中醫(yī)認(rèn)為，其總病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)，本虛以氣虛、陽虛為主，而標(biāo)實(shí)以瘀血、水飲居多［9］，益心泰顆粒正是基于此理論而研制出的。方中黃芪既可補(bǔ)氣，又可利水消腫，故本方著重用黃芪為君藥；丹參、紅花為活血化瘀要藥，配黃芪可使氣旺血行，瘀去絡(luò)通，共為臣藥；澤瀉、豬苓為利水滲濕要藥，善于宣通內(nèi)臟之濕，可直達(dá)腎與膀胱，俱為佐藥；紅花入心經(jīng)，在此方中兼作使藥。全方共奏益氣活血利水之效。現(xiàn)代研究［10-12］表明，黃芪可提高阿霉素所致心衰大鼠的存活率，能抑制慢性心衰大鼠血清中IL-6和TNF-α水平，減少心肌細(xì)胞凋亡，改善慢性心衰；丹參能增加冠狀動脈血流，降低血清BNP水平，保護(hù)心?。?3］；紅花可降低血液黏稠度，形成抗血栓，并產(chǎn)生抗氧化和抗凋亡作用［14］；澤瀉、豬苓均可利尿，有抗腎炎活性，具有細(xì)胞毒活性［15-16］。

實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，治療后益心泰各劑量組LVEF、LVFSE/A值均升高，LVIDd、LVIDs與血清BNP水平均降低，與模型組有顯著差異 （P＜0.05或P＜0.01），提示益心泰顆粒可以明顯改善超聲心動圖指標(biāo)，并能下降血清BNP水平。為考察益心泰不同劑量的區(qū)別，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行進(jìn)一步研究，發(fā)現(xiàn)中、高劑量組對超聲心動圖指標(biāo)和血清BNP的改善程度均優(yōu)于低劑量組 （P＜0.05或P＜0.01），說明益心泰顆粒治療慢性心衰中、高劑量藥物療效明顯優(yōu)于低劑量。另外，中、高劑量組對超聲心動圖指標(biāo)和血清BNP改善程度相當(dāng)，說明隨著藥物濃度的進(jìn)一步增加，其療效不再上升，藥物作用已達(dá)峰值。綜上所述，益心泰顆?？梢悦黠@改善超聲心動圖指標(biāo)，并能下降血清BNP水平，且中、高劑量組療效明顯優(yōu)于低劑量組。

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R285.5

：B

：1001-1528（2015）07-1565-03

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.07.037

2014-07-12

湖南省中醫(yī)藥科研計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目 （201306）

唐 云 （1987—），男，碩士，醫(yī)師，從事中醫(yī)和中西醫(yī)結(jié)合治療心血管病研究。E-mail：tangyun109@163.com

*通信作者：郭志華 （1964—），男，博士，教授，從事中醫(yī)和中西醫(yī)結(jié)合治療心血管病研究。E-mail：Guozhihua112@163.com