宋萍
摘 要:圓二色儀器常用于手性蛋白質(zhì)的測定,然而隨著生物、材料手性大分子的研究,常規(guī)的圓二色儀器已經(jīng)滿足不了科研工作的需要,本文旨在對AVIV410圓二色光譜儀控溫裝置進行改裝,提出設(shè)計思想,以期能實現(xiàn)高溫(>100 ℃)及低溫(<-10 ℃)條件下的測試。在保證儀器正常運行條件下,主要對儀器的樣品室進行改裝:低溫由低溫冷浴箱實現(xiàn),高溫由電熱絲加熱獲得。電控系統(tǒng)(包括繼電器,模數(shù)轉(zhuǎn)換器及探針等配件)控制樣品溫度。該裝置簡潔,容易安裝,便于移動。
關(guān)鍵詞:圓二色 光譜 控溫 改裝設(shè)計
中圖分類號:TH744 文獻標(biāo)識碼:A 文章編號:1672-3791(2014)10(a)-0045-02
1 圓二色光譜原理及應(yīng)用
圓二色光譜是光學(xué)活性分子對左右圓偏振光吸收不同而產(chǎn)生的特征光譜。圓二色光譜是研究物質(zhì)光學(xué)活性的重要工具,最早在1969年,Greenfield利用圓二色譜分析了蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)[1]。作為檢測生物大分子手性結(jié)構(gòu)的重要測試手段,通過圓二色光譜可獲得物質(zhì)的二級結(jié)構(gòu),因此被廣泛用于有機化學(xué),物理化學(xué),藥物化學(xué),生物化學(xué)特別是蛋白質(zhì)折疊及構(gòu)象研究,DNA/RNA反應(yīng),酶動力學(xué)等方面科學(xué)研究[2-3]。
2 AVIV410圓二色光譜儀結(jié)構(gòu)
圓二色譜儀的基本組成結(jié)構(gòu)如圖。主要部件包括光源,起偏器,調(diào)制解調(diào)器,樣品室及檢測器等裝置(圖1)[4]。
光源:AVIV410采用高穩(wěn)定恒流直流電源控制150W透明石英氙燈。氙燈開啟時必須有穩(wěn)定流速氮氣保護。
單色器:使光源發(fā)出的光成為單一波長光波。
起偏鏡:將單色光轉(zhuǎn)化為平面偏振光。
光電調(diào)制器:將透過光變?yōu)樽?、右圓偏振光。AVIV410圓二色光譜儀調(diào)制器由MgFI2晶片兩面鍍電極后,當(dāng)所加交變電壓按照50 Hz頻率周期性變化時,晶片的厚度也隨之變化,從而交替地獲得左、右旋圓偏振光。
樣品室:配套尺寸0.01 μm~10 mm,具有攪拌功能及-10℃~75℃溫控功能。
檢測器:經(jīng)過樣品以后所得圓偏振光信號通過放大器及相敏檢測器分別得到直流及交流分量,最后經(jīng)由運算單元進行計算,輸出數(shù)據(jù)。
3 局限性
圓二色儀器常用于手性蛋白質(zhì)的測定,然而,隨著生物、材料手性大分子的研究,常規(guī)的圓二色光譜儀已經(jīng)滿足不了科研工作的需要。AVIV410雖然設(shè)置有控溫裝置,但對于某些特殊光學(xué)活性物質(zhì)圓二色譜測試,例如低溫(<-10 ℃)或高溫(>100 ℃)條件下監(jiān)控反應(yīng)過程中物質(zhì)圓二色性的變化,僅僅利用原機附帶的控溫裝置是無法達到測試目的的(原機附帶-10~75 ℃溫控功能)。除此以外,由于外界與反應(yīng)體系的熱量交換,很難保證設(shè)定溫度與實際測試溫度一致,并且溫度也很難準(zhǔn)確控制。因此本文的出發(fā)點是希望在不影響機器正常運行下對該樣品室進行改裝,希望能拓寬機器測試范圍,并為科學(xué)工作者提供一些有益的參考[5]。
4 樣品室控溫系統(tǒng)改裝設(shè)想
考慮到實驗中有光路通過樣品,因此為了在測量中準(zhǔn)確獲取樣品室內(nèi)溫度,設(shè)計具有探針及磁力攪拌。
低溫裝置內(nèi)設(shè)冷凍液或液氮冷卻系統(tǒng)。如圖組件包括冷卻液套管,冷卻液進口,出口,樣品室,樣品室探針,電控系統(tǒng),低溫冷浴箱(圖2,圖3)。該裝置的優(yōu)點是結(jié)構(gòu)簡單,移動方便,溫度最低可達-160 ℃。溫度由電控系統(tǒng)及低溫冷浴箱控制,樣品溫度由探針測得,探針與模數(shù)轉(zhuǎn)換器(A/D轉(zhuǎn)換器)相連。如圖,信號到達單片機后顯示實測溫度,當(dāng)實測溫度未達到設(shè)定溫度時,繼電器開始工作,使冷浴箱繼續(xù)工作。當(dāng)溫度到達設(shè)定溫度時,系統(tǒng)自動切斷降溫裝置電源。為了提高控溫精度,可在冷卻液套管中增設(shè)電加熱器進行補償,這樣冷卻液溫度可以被控制在設(shè)定溫度0.5 ℃[6]。
加熱裝置則相對更簡潔,升溫裝置溫度由電熱絲及溫度電控系統(tǒng)控制:當(dāng)溫度未達到設(shè)定溫度時,電熱絲開始工作。樣品溫度到達設(shè)定溫度時,繼電器斷開觸頭,電熱絲停止加熱[7]。
為了避免外界光線及溫度對測試的影響,建議在改裝的溫控裝置外配有遮光隔熱層,最簡易的辦法是使用銀膠布將溫控裝置覆蓋。
5 結(jié)論
圓二色光譜是研究物質(zhì)光學(xué)活性的重要工具,而普通的圓二色譜儀控溫裝置并不能滿足實際測試要求,為了使儀器能在更廣溫度范圍內(nèi)正常工作,該文提出了AVIV410圓二色光譜儀控溫裝置改裝設(shè)計方案,該設(shè)計結(jié)構(gòu)簡單,移動方便,具有一定的科學(xué)性和實用性。
參考文獻
[1] 曲世鳴,張魯殷,薛玉章.園二色性對旋光現(xiàn)象的影響[J].大學(xué)物理,2001,20(12):18-19.
[2] 趙藻藩,周性堯,張悟銘,等.儀器分析[M].北京:高等教育出版社,2001.
[3] 丁曉嵐,高紅旗.圓二色光譜在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用[J].實驗技術(shù)與管理,2008,25(10):48-52.
[4] 陳木子,方魏,王梅.AVIV410型圓二色光譜儀的使用及維護[J].分析儀器,2013(1):91-93.
[5] 段金友,方積年.圓二色譜在糖類化合物結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2004,16(1):48-52.
[6] 時陽,朱興旺,張保國.低溫液體冷卻循環(huán)器的研究與開發(fā)[J].低溫工程,2003,131(1):56-60.
[7] 朱江,李耀會,李小定.X射線低溫衍射裝置液氮輸入器[J].分析儀器,1992(1):62-63.