王宗平(重慶市萬州食品藥品檢驗所 404000)
植物油主要是從植物種子、果肉以及其它部分提取所得的脂肪酯[1],由脂肪酸和甘油化合而成的一種天然高分子化合物。食用植物油常見的種類有花生油、菜籽油、大豆油、棉籽油、以及香油等。目前,一些不法商家將地溝油按照一定的比例添加入新鮮的食用植物油,從而獲取暴利,使消費者的健康受到嚴(yán)重的威脅。食用油脂是人們?nèi)粘I钪械闹匾匦杵?。市場上食用植物油摻假主要有兩種類型:第一種類型是將非食用油、甚至有毒植物油摻入食用植物油[2]。第二種類型是食用植物油摻入低附加值食用油。其中,前者是食用植物油摻假的主要方式。
本次實驗的材料主要有動物組織:豬、羊、馬、雞、鴨、鵝、魚和狗。植物種子主要包括常見的油料作物玉米、花生、大豆。油菜籽以及葵花籽等。制備樣品有地溝油、豬油、花生油以及大豆油等。
適量的無水乙醇、石油醚、氫氧化鉀、無水硫酸鈉、膽固醇標(biāo)準(zhǔn)儲備液。
(1)氣相色譜儀儀器條件
氣相色譜儀是由美國的PerkinElmer公司生產(chǎn)[3]。色譜柱的規(guī)格為H P-5毛細(xì)血管:30mX0.32umX0.25um。柱溫的起始溫度為150攝氏度,柱箱的起始溫度為160攝氏度,分別保持1分鐘。然后,程序開始逐漸地升溫,直至290攝氏度。同時,進樣口的溫度應(yīng)該為290攝氏度。以氮氣為載氣,試驗人員要保證總流速度為60ml/min,尾吹氣的流速為20ml/min,氫氣的流速為3060ml/min,空氣的流速為39060ml/min。進樣量為3ul。
(2)氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀儀器條件
氣相色譜條件:本次實驗選擇的是D B-4M S色譜柱:30mX0.25umX0.25um毛細(xì)管柱。進樣口的溫度為290攝氏度,進樣的體積為3.0ul,流速為3.0ml/min,載氣為N2。經(jīng)過程序不斷升溫之后,150攝氏度恒定一分鐘。
首先,實驗人員分別將膽固醇標(biāo)準(zhǔn)儲存液用適量比例的乙醇溶液進行稀釋,然后上機進行測定,并繪制成標(biāo)準(zhǔn)的工作曲線(如下圖1所示)。
注:本次實驗中膽固醇的標(biāo)準(zhǔn)儲存液選定量為1.0000mg/ml,稀釋后的濃度系列分別為 0.0200mg/ml、0.0400mg/ml、0.0800mg/ml、0.1000mg/ml、0.1600mg/ml,線性方程為 R2=0.9997,Y=1810.8X-0.2252。
圖1:膽固醇標(biāo)準(zhǔn)工作曲線
其次,實驗人員抽取0.5油樣放置于100毫升的容量瓶中,然后用比例為4:3乙醇溶液進行稀釋溶解,振搖1分鐘左右,然后再次加入1.0ml的水,靜置20分鐘使之明顯分層抽取上層液注入色譜儀中,并保留時間的定性。根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)《食品衛(wèi)生檢驗方法理化部分總則》,色譜儀的最低響應(yīng)值為3,得出檢出限=S/B(其中,S表示的是最低響應(yīng)值,B表示的是標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程中的斜率)。由此可知,氣相色譜儀法檢測膽固醇加標(biāo)的回收率結(jié)果(如下表1所示)
表1:氣相色譜儀法檢測膽固醇加標(biāo)的回收率結(jié)果
最后,實驗人員對氣相色譜法測定膽固醇的方法進行分析。從上表1可知,加標(biāo)回收率最低為86.4%,最高為94.9%,表明該檢測方法具有良好的準(zhǔn)確性。膽固醇的濃度最小為0.002mg/ml,最大為0.5mg/ml,正好與色譜峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系
樣品油中膽固醇含量測定數(shù)據(jù)以及實驗觀察結(jié)果如下表2所示,其中地溝油中膽固醇的含量為100.6,且明顯高于菜籽油、玉米油以及大豆油。
表2:樣品油中膽固醇含量測定數(shù)據(jù)以及實驗觀察結(jié)果
從以上研究結(jié)果表明,相對于地溝油,各種類型的食用植物油中膽固醇的含量極少。同時,由于不同的油樣會直接地影響摻偽檢驗定量與定性的準(zhǔn)確性,因此需要對不同的油種中的膽固醇含量與資料中的相應(yīng)膽固醇的含量進行仔細(xì)地對比,經(jīng)過配對檢驗,差異不具有顯著性。
由此可知,筆者認(rèn)為氣相色譜法是一種能夠?qū)⒑袆游镉椭氖秤弥参镉团c正常的食用植物油有效區(qū)分的檢測方法。其中,動物油脂中常常含有大量的膽固醇,并且一些餐飲廢棄物中提取的地溝油也因為含量一定的動物油脂,因而也具有一定量的膽固醇。相反,正常食用植物油中所含有的膽固醇極少。
綜上所述,氣相色譜法是鑒別食用植物油是否摻入動物油脂的有效途徑。
[1]陳初良,張惠琴,甘云娟.高肅君食用植物油摻入動物油脂鑒別方法的研究.糧油食品科技.2009(05).
[2]趙琳娜,王丹,胡鳳月,吳鵬,韓月貝,楊紅蓮.食用植物油中動物源性成分PCR檢測方法的建立.現(xiàn)代食品科技.2012(15).
[3]王立平,劉曉莉,曹悅,張帆.PCR法檢測食用植物油中動物源性成分.食品工業(yè).2013(03).