彭肇強(qiáng) 秦立強(qiáng)

1.蘇州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生系，江蘇蘇州 215123；2.國藥集團(tuán)致君（蘇州）制藥有限公司，江蘇蘇州 215400

頭孢呋辛鈉為第二代頭孢菌素類抗生素，分裝而成的注射用頭孢呋辛鈉治療范圍廣、副反應(yīng)少，廣泛應(yīng)用于臨床[1]。但是該品穩(wěn)定性差[2]，在全國藥品評價抽檢試驗中，注射用頭孢呋辛鈉不符合要求的主要項目為溶液顏色，在各類終端市場反饋中，注射用頭孢呋辛鈉溶液顏色為最主要的投訴項目。

2005 版《中國藥典》規(guī)定頭孢呋辛鈉貯存條件為遮光，密封，在冷處（2～10℃）貯存；2010 版《中國藥典》規(guī)定該品貯存條件為遮光，密封，在陰涼處（≤20℃）貯存[3]。充氮可以有效保證注射用頭孢呋辛鈉穩(wěn)定性，延緩色級變化，但頭孢呋辛鈉原料充氮對延緩色級的作用沒有引起關(guān)注，該研究把頭孢呋辛鈉色級控制由制劑環(huán)節(jié)推移到前段工序進(jìn)行控制，即在原料生產(chǎn)過程中進(jìn)行充氮，同時探索不同貯存條件下，原料充氮對產(chǎn)品的色級穩(wěn)定性影響。2013年2—3月生產(chǎn)的194 批無菌原料藥每批各8 瓶分別貯存冷處和陰涼處，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

頭孢呋辛鈉無菌原料藥（純度≥99.4%）；液氮（純度≥99.995%）；EDTA-2Na（AR 級）。GS1M 型殘氧儀。

1.2 原料藥模擬

實際生產(chǎn)過程中，原料混合前脈動兩次抽真空，分裝前在鋁桶中充高純液氮，再裝藥粉，再充氮，蓋上組合蓋，盡快軋蓋密封。但該研究中無法大批量在同一批產(chǎn)品中部分桶充氮、部分桶不充氮來采集數(shù)據(jù)，因此采取模擬小包裝代替成品包裝。模擬小包裝充氮方式為在減壓閥控制壓力（0.01±0.005 MPa）下，微開小鋁瓶膠塞，將充氮軟管伸入到小鋁瓶中約1 cm，持續(xù)充高純液氮1 min，拔出軟管，立即蓋上膠塞，扣上鋁蓋，使用手動軋蓋器軋蓋，檢查小鋁蓋不能擰動為準(zhǔn)。充氮后的產(chǎn)品通過殘氧儀檢測殘氧量。

1.3 取樣以及處理

取無菌原料藥車間2013年2月和3月生產(chǎn)的頭孢呋辛鈉共194 批（批號13024001～13024067、13024201～13024253、13034001～13034040、13034201～13034234）樣品。每批取樣16 瓶（每瓶30g），8 瓶存放于陰涼庫（10～20℃），8 瓶存放于冷庫（6～10℃）。兩種貯存條件下分別在4 瓶中充氮，4 瓶中不充氮。充氮?dú)堁趿靠刂圃?%以下。存放3、6、12 個月時隨機(jī)各取1 瓶檢測顏色（每批每種條件多備有1 瓶樣品）。

1.4 色級判定

顏色判斷按《中國藥典》2010 版二部附錄ⅨA 《溶液顏色檢查法》第一法檢測[4]。取該品1.2 g，加入0.05 mol/L EDTA-2Na 溶液10 mL 使溶解，置于25 mL 納氏比色管中，另取規(guī)定色調(diào)和色號的標(biāo)準(zhǔn)比色液10 mL，置于另一25 mL 的納氏比色管中，兩管同置白色背景上，自上向下透視，或同置白色背景前，平視觀察；供試品管呈現(xiàn)的顏色與對照管比較，不得更深。為了量化分析，將色級

1.5 統(tǒng)計方法

采用SPSS17.0 軟件研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，色級以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，單因素方差分析（ANOVA）比較組間的差異，如組間存在差異，則采用LSD-t 檢驗進(jìn)行組間多重比較。

2 結(jié)果

194 批頭孢呋辛鈉原料起始顏色較淺，除一批次色級為<3，其他色級均<2。每種貯存方式色級均隨時間推移而加深。冷庫貯存色級變化慢于陰涼庫貯存，以不充氮貯存12 個月為例，冷庫貯存仍有1、2 和10 批次色級分別為<2、=2 和<3 的較淺顏色，而陰涼庫貯存只有6 批次為色級<3。充氮保存色級變化慢于不充氮保存，以冷庫貯存12 個月為例，充氮后貯存仍有21、12 和45批次色級分別為<2、=2 和<3 的較淺顏色，而不充氮貯存則分別為1、2 和10 批次（表1）。

冷庫貯存條件下，3、6 和12 個月后充氮原料藥的平均色級比不充氮低0.2、0.5 和0.7，其中6 和12 個月差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=6.46;t=7.82,P<0.01）；陰涼條件下，3、6 和12 個月充氮原料藥的平均色級比不充氮低0.6、0.8 和0.7，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=8.18;t=9.65;t=6.28,P<0.01）。另外，不充氮的情況下6 和12 個月后冷庫中原料藥色級顯著低于陰涼庫，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=7.35;t=8.54,P<0.01）；充氮情況下3、6 和12 個月后冷庫中原料藥色級顯著低于陰涼庫（t=6.14;t=10.09;t=6.93,P<0.01）。原料藥貯存在冷庫不充氮與陰涼條件充氮色級變化基本一致（見表2）。

表1 不同處理3、6 和12 個月后原料藥各色級的批次數(shù)

表2 不同處理3,6,12 個月后色級變化趨勢

3 討論

頭孢呋辛鈉穩(wěn)定性差，與原料質(zhì)量、溫度、光照、充氮等因素有關(guān)[5]。藥物顏色與規(guī)定顏色的差異能在一定程度上反映藥物的純度[6]，周穎等對國內(nèi)上市注射用頭孢呋辛鈉進(jìn)行了全面的質(zhì)量分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)169 批次中5 批次不符合規(guī)定，其中4 批次顏色超標(biāo)，因此顏色是影響該藥質(zhì)量的主要因素之一[7]。顏色測定方法有目測法[4]、紫外-可見分光光度法[8]、HPLC 法[6，9，10]等，但藥典中《溶液顏色檢查法》第一法檢測顏色檢測直觀、快速、檢測成本低，因此該研究選用顏色作為觀察指標(biāo)。

該次研究采取模擬小包裝代替成品包裝在存放的3、6、12個月時動態(tài)觀察原料生產(chǎn)階段充氮與否和貯存方式對產(chǎn)品色級的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)頭孢呋辛鈉原料充氮比不充氮色級穩(wěn)定性明顯好，溶液顏色變化較慢。周穎等采用專題調(diào)查的方法考察了不同生產(chǎn)工藝的優(yōu)劣，結(jié)合對生產(chǎn)企業(yè)提供的產(chǎn)品長期穩(wěn)定性數(shù)據(jù)的分析，得出高純氮?dú)獗Ｗo(hù)工業(yè)的樣品的穩(wěn)定性明顯高于無高純氮保護(hù)工藝的樣品，表現(xiàn)為溶液顏色較淺和頭孢呋辛鈉聚合物含量較低，該調(diào)查的結(jié)論和該研究結(jié)果一致[7]。趙龍山等采用熱分析法和差式掃描量法測定頭孢呋辛鈉在氮?dú)夂涂諝庵械臒岱纸鈩恿W(xué)參數(shù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在空氣中表觀活化能為139.2、139.3 kJ/mol，在氮?dú)庵袨?06.8、108.5 kJ/mol，因此在氮?dú)庵懈鼮榉€(wěn)定[2]。

該研究顯示原料冷處貯存比陰涼貯存色級穩(wěn)定性明顯好，溶液顏色變化較慢。饒春意等分析了頭孢呋辛鈉溶液短期放置對雜質(zhì)含量的影響，發(fā)現(xiàn)放置0、10、20、30 和60 分鐘后雜質(zhì)含量分別為0.201%、0.205%、0.219%、0.224%和0.240%，即隨時間延長穩(wěn)定性降低[6]。劉華等直接觀察了頭孢呋辛鈉在不同溫度下對色級的影響，5℃貯存30 d 色級為1，10℃、20℃、30℃和40℃下色級分別為1、1、3 和7[5]。盡管在10℃、20℃的陰涼條件下貯存30 d（1 個月）對色級沒有明顯影響，但我們的研究把貯存時間延長到3、6 和12 個月，發(fā)現(xiàn)陰涼貯存色級變化較冷處貯存顯著，因此，雖然2010 版《中國藥典》將原料和制劑的儲藏條件由“在冷處保存”改為“在陰涼處保存”[3]，我們的研究結(jié)果仍建議原料貯存于冷庫中。

目前普遍關(guān)注頭孢呋辛鈉制劑和溶液的穩(wěn)定性[2，5-7]，該研究則關(guān)注了原料穩(wěn)定性。原料藥充氮，不僅可以延緩藥品被氧化的速度，還可以使桶內(nèi)與桶外保持微正壓，有效保障藥品不受外界環(huán)境影響。但是必須注意的是無菌原料藥采用鋁桶分裝，口徑較大，充氮效果不易控制，因此關(guān)于原料藥充氮方式還有進(jìn)一步改進(jìn)的空間，如可以考慮在隔離罩中充氮。目前，我國對藥品制劑有效期的規(guī)定仍以制劑分裝日期為起始日期，因此，建議原料藥存放時間越短越好，盡早分裝成制劑，有利于保證制劑在有效期內(nèi)的色級穩(wěn)定性。

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