白 玉 張哲瑩 姚文健 趙寶生 (新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院病理教研室，河南 新鄉(xiāng) 453003)

腫瘤新生血管生成是腫瘤細(xì)胞增殖、腫瘤生長的必備條件，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是血管生成過程中最重要的血管內(nèi)皮生長刺激因子，對誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖及新生血管的形成有重要作用〔1〕。貝伐單抗是一種重組的VEGF單克隆抗體，是世界上首個批準(zhǔn)上市的VEGF抑制劑，臨床研究顯示貝伐單抗可明顯抑制結(jié)腸癌〔2〕、乳腺癌〔3〕等腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移，但尚未見用于治療食管癌的臨床研究。本文通過研究貝伐單抗聯(lián)合化療對食管癌患者的治療效果，探索VEGF是否可以作為合適的治療靶應(yīng)用于食管癌的靶向治療。

1 對象與方法

1.1 對象 2008～2009年新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院胸外科收治的160例適合手術(shù)的Ⅱ～Ⅲ期食管癌患者。年齡48～78歲，男103例，女57例，術(shù)前均未接受任何放化療?；颊呔炇鹬橥鈺?/p>

1.2 試劑 VEGF單克隆抗體(即用型)購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司;免疫組化鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶(SP)試劑盒、二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色劑購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.3 免疫組織化學(xué)檢測 均手術(shù)治療，癌組織經(jīng)常規(guī)10%甲醛溶液固定、脫水、透明、石蠟包埋及切片。采用SP法，石蠟切片脫蠟和水化后，3%H2O2-甲醇消化內(nèi)源性過氧化物酶的活性，修復(fù)抗原，0.5%小牛血清白蛋白封閉非特異性抗體，滴加一抗，滴加生物素化的二抗，滴加鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化酶，DAB顯色、水洗、蘇木素復(fù)染、脫水、透明、中性樹膠封片。顯微鏡下觀察。

1.4 結(jié)果判定 參照許良中等〔4〕的免疫組織化學(xué)反應(yīng)結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)，綜合考慮切片中陽性細(xì)胞占所觀察同類細(xì)胞數(shù)的百分比和陽性細(xì)胞著色強度，半定量判斷結(jié)果。根據(jù)顯色程度判斷陽性強度:基本不著色者為0分;著色淡黃色者為1分;棕黃色者為2分;棕褐色者為3分。按陽性細(xì)胞所占計數(shù)細(xì)胞百分比計分:0分為無陽性細(xì)胞，陽性細(xì)胞≤10%計1分，10% ＜陽性細(xì)胞≤50%計2分，50% ＜陽性細(xì)胞≤75%計3分，陽性細(xì)胞＞75%計4分。染色強度與陽性細(xì)胞計分乘積0～2分計為-，3～5分計為+，6～9分計為?，10～12分計為?。

1.5 分組 按照VEGF染色結(jié)果，-判定為無靶點組52例，+～?判定為有靶點組108例。兩組患者又隨機平分為試驗組和對照組。

1.6 治療方法 對照組給予順鉑+5-氟尿嘧啶的常規(guī)化療，順鉑 20 mg·m－2·d－1，5-氟尿嘧啶750 mg·m－2·d－1，第1 ～5天靜脈滴注，21 d為一個周期，連用4個周期。試驗組:貝伐單抗+常規(guī)化療。貝伐單抗7.5 mg/kg(美國羅氏制藥公司產(chǎn)品，規(guī)格:100 mg/4 ml)，用0.9%氯化鈉100 ml稀釋，化療第1天在化療后靜滴，21 d為一個周期，連用4個周期?；煼桨竿瑢φ战M。

1.7 隨訪觀察 出院后隨訪3年，隨訪內(nèi)容包括患者癥狀、體征改善和生存情況等，不適復(fù)查CT。統(tǒng)計兩組患者的3年生存率、復(fù)發(fā)率、轉(zhuǎn)移率。

1.8 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS15.0軟件進(jìn)行χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 VEGF在食管癌組織中的表達(dá)情況 VEGF主要表達(dá)在癌細(xì)胞的胞質(zhì)。108例VEGF表達(dá)陽性，陽性率67.5%，有52例表達(dá)陰性，陰性率32.5%。見圖1。

圖1 VEGF在癌組織中的表達(dá)情況(SP，×400)

2.2 療效比較 有靶點組內(nèi)試驗組3年生存率較對照組明顯提高(68.5%vs 48.1%，P＜0.05);復(fù)發(fā)率和轉(zhuǎn)移率明顯降低(66.7%vs 85.2%;51.9%vs 75.9%，P＜0.05)。無靶點組內(nèi)試驗組與對照組 3年生存率(53.8%vs 46.2%)、復(fù)發(fā)率(76.9%vs 84.6%)和轉(zhuǎn)移率(69.2%vs 76.9%)無顯著性差異(P＞0.05)。

3 討論

腫瘤靶向治療的研究重點在于靶點的尋找，腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移均與腫瘤的血管生成密切相關(guān)，理論上，以血管生成的各個環(huán)節(jié)及其過程為靶點抑制腫瘤血管生成，可有效控制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。在腫瘤血管生成的多種細(xì)胞因子中，VEGF是人類腫瘤中促血管生成的最主要因子，VEGF具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞分裂、增生和趨化作用，并能增強血管通透性及促進(jìn)腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移〔5〕。2004年美國食品和藥品管理局批準(zhǔn)的新藥貝伐單抗(bevaeizumab)直接靶向VEGF，被稱為血管生成抑制劑。它能與所有VEGF異構(gòu)體結(jié)合，從而阻斷VEGF與血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體結(jié)合，以抑制VEGF活性，進(jìn)而起到抑制腫瘤的作用〔6〕。

利用抗體對腫瘤特異抗原的選擇性，貝伐單抗也能特異性地靶向癌細(xì)胞，降低其對正常器官的毒性。對VEGF表達(dá)陽性的患者，貝伐單抗有顯著的治療效果;對缺乏VEGF表達(dá)的患者，貝伐單抗則沒有抗腫瘤作用。因此，VEGF可以作為合適的治療靶應(yīng)用于食管癌的靶向治療。

1 Ferrara N.Vascular endothelial growth factor:basic science and clinical progress〔J〕.Endocr Rev，2004;25(4):581.

2 周 毅.卡培他濱與貝伐單抗聯(lián)合治療老年轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的近期療效及安全性〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2012;32(1):62-3.

3 趙勝雷.血管內(nèi)皮生長因子與乳腺癌靶向治療的研究進(jìn)展〔J〕.中國癌癥防治雜志，2010;2(2):152-4.

4 許良中，楊文濤.免疫組織化學(xué)反應(yīng)結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn)［J］.中國癌癥雜志，1996;6(4):229-31.

5 Le XF，Mao W，Lu C，et al.Specific blockade of VEGF and HER 2 pathways results in greater growth inhibition of breast cancer xenografts that overexpress HER2〔J〕.Cell Cycle，2008;7(23):3747-58.

6 王慶華，侯 蕓.分子靶向藥物貝伐單抗研究進(jìn)展〔J〕.中國腫瘤，2005;14(11):716-9.