齊曉玲 (齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)二科，黑龍江 齊齊哈爾 161000)

子宮內(nèi)膜樣腺癌患者常表現(xiàn)為陰道不明原因的出血。目前普遍認(rèn)為其發(fā)生是多步驟、多因素參與的連續(xù)復(fù)雜過(guò)程，多種癌相關(guān)基因和蛋白參與〔1〕。Aurora-A、-B是Aurora激酶家族的重要成員，是中心調(diào)節(jié)體、紡錘體形成的重要參與者，Aurora-A、-B在人類(lèi)多種腫瘤中高表達(dá)〔2，3〕。TPX2是一個(gè)新的紡錘體成分家族的新成員，彌散分布在S和G2期細(xì)胞的核心位置，對(duì)細(xì)胞有絲分裂紡錘體形成過(guò)程起重要作用〔4，5〕。本研究關(guān)注老年子宮內(nèi)膜樣腺癌患者術(shù)后組織Aurora-A、-B和TPX2表達(dá)及其相關(guān)性。

1 材料和方法

1.1 臨床資料 我院婦產(chǎn)科2010年1月至2013年12月診斷為子宮內(nèi)膜樣腺癌的老年患者160例術(shù)后蠟塊組織為實(shí)驗(yàn)組，均經(jīng)病理醫(yī)師再次閱片確診，并嚴(yán)格符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中診斷標(biāo)準(zhǔn)。年齡60～84(平均69.6)歲。子宮脫垂或子宮肌瘤行子宮全切后經(jīng)病理醫(yī)師診斷為正常的老年子宮內(nèi)膜組織蠟塊50例為對(duì)照組，年齡60～81(平均68.7)歲。兩組一般資料無(wú)明顯差別(P＞0.05)。

1.2 Aurora-A、-B和TPX2蛋白檢測(cè) Aurora-A、-B和TPX2蛋白的檢測(cè)應(yīng)用免疫組化二步法。3種抗體的濃縮液均購(gòu)自武漢博士德生物工程公司，依據(jù)不同比例稀釋后進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇最理想的配比濃度用于正式實(shí)驗(yàn)。免疫組化的顯色應(yīng)用DAB染色。操作均按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，均由同一病理主管技師操作，嚴(yán)格質(zhì)控，減少可能存在的誤差。

1.3 Aurora-A、-B和TPX2結(jié)果判斷方法 Aurora-A和-B均以細(xì)胞核棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞，TPX2以細(xì)胞核和(或)細(xì)胞質(zhì)棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞。選擇顯色集中的上皮細(xì)胞區(qū)(400倍視野，熱點(diǎn)區(qū))，計(jì)數(shù)每張切片6個(gè)視野，取平均值，計(jì)算陽(yáng)性率，以陽(yáng)性細(xì)胞≥5%定為陽(yáng)性，以陽(yáng)性細(xì)胞＜5%定為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)及線(xiàn)性相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組Aurora-A、-B和TPX2蛋白表達(dá)陽(yáng)性率比較 兩組Aurora-A、-B和TPX2表達(dá)陽(yáng)性率差別均顯著(P＜0.000 1)。見(jiàn)表1。

2.2 實(shí)驗(yàn)組不同臨床特征患者Aurora-A、-B和TPX2蛋白表達(dá)陽(yáng)性率的比較 實(shí)驗(yàn)組Aurora-A、-B和TPX2表達(dá)與腫瘤最大徑、肌層浸潤(rùn)情況、Ki67增殖、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)指數(shù)和TNM分期均密切相關(guān)。見(jiàn)表2。

表1 兩組Aurora-A、-B和TPX2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率比較〔n(%)〕

表2 實(shí)驗(yàn)組不同臨床特征患者Aurora-A、-B和TPX2蛋白表達(dá)陽(yáng)性率比較〔n(%)〕

2.3 實(shí)驗(yàn)組Aurora-A、-B和TPX2表達(dá)相關(guān)性 Aurora-A和-B(r=0.59，P=0.0065)、Aurora-A 和 TPX2(r=0.49，P=0.035 2)、Aurora-B 和 TPX2(r=0.41，P=0.039 8)表達(dá)均正相關(guān)。

3 討論

子宮內(nèi)膜樣腺癌是激素相關(guān)疾病，由于老年人子宮內(nèi)膜為萎縮或囊性萎縮狀態(tài)，因此腫瘤發(fā)病過(guò)程中受到的影響因素可能更多。在病變過(guò)程中，多種基因和蛋白表達(dá)失調(diào)，可以加速腫瘤惡變及轉(zhuǎn)化〔6〕。Aurora-A激酶的編碼基因定位于20q13.2，是負(fù)責(zé)調(diào)控細(xì)胞有絲分裂的重要的絲氨酸/蘇氨酸激酶，當(dāng)Aurora-A過(guò)表達(dá)時(shí)，可以引起有絲分裂檢測(cè)點(diǎn)的監(jiān)測(cè)功能失控，引起細(xì)胞分裂異常，常使癌基因活化，抑癌基因失活，細(xì)胞出現(xiàn)明顯惡變〔7，8〕。而Aurora-B作為家族的同源蛋白，被認(rèn)為是染色體的過(guò)客蛋白，定位在有絲分裂早期的染色體著絲粒區(qū)域，當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入分裂后期時(shí)引起微管內(nèi)嵌信著絲粒，此時(shí)紡錘體中央和細(xì)胞核裂內(nèi)移，最終在中間體聚集〔9〕。也有觀點(diǎn)認(rèn)為Aurora-B高表達(dá)時(shí)可以引起細(xì)胞多核化，同時(shí)產(chǎn)生明顯的多倍體，加速惡性變進(jìn)程〔10，11〕。TPX2的相對(duì)分子量為100 kD，其基因定位于染色體的20q11.2，出現(xiàn)在細(xì)胞周期的G1至S期，當(dāng)細(xì)胞分裂后其功能消失〔12〕。有觀點(diǎn)認(rèn)為T(mén)PX2作為一種被細(xì)胞周期調(diào)控的核增殖相關(guān)蛋白，除可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖外，還參與細(xì)胞有絲分裂的紡錘體微管形成〔13〕。常海平等〔14〕通過(guò)對(duì)62例宮頸鱗癌術(shù)后組織中檢測(cè)TPX2表達(dá)，發(fā)現(xiàn)TPX2高表達(dá)在腫瘤組織中，而正常組織中不表達(dá)，認(rèn)為T(mén)PX2參與宮頸鱗癌發(fā)生和進(jìn)展，也提示TPX2有可能為宮頸鱗癌早期診斷和預(yù)后的重要指標(biāo)。

雖然Aurora-A、-B和TPX2不完全是同一家族成員，但是3種蛋白對(duì)微管和紡錘體結(jié)構(gòu)的調(diào)節(jié)作用使3種蛋白緊密聯(lián)系在一起。細(xì)胞內(nèi)高水平的Aurora-A、-B蛋白參與引起細(xì)胞產(chǎn)生多個(gè)中心體，同時(shí)形成不明顯對(duì)稱(chēng)的多極紡錘體，使染色體出現(xiàn)不對(duì)稱(chēng)性分離，形成非整體的子代細(xì)胞，此種細(xì)胞也是腫瘤性細(xì)胞中最重要的細(xì)胞，其分化幼稚，細(xì)胞異型性明顯。也有觀點(diǎn)認(rèn)為Aurora-A、-B和TPX2可以引起惡性腫瘤細(xì)胞分裂增殖，此時(shí)3種蛋白可以不斷引起細(xì)胞跨過(guò)有絲分裂的扳機(jī)位點(diǎn)，使新的細(xì)胞周期中形成不連續(xù)的增殖，腫瘤細(xì)胞失控性生長(zhǎng)〔15，16〕。也有學(xué)者認(rèn)為Aurora-B可以有效地決定細(xì)胞染色體的分離和細(xì)胞質(zhì)的分裂過(guò)程，促進(jìn)非整倍體細(xì)胞的大量形成〔17，18〕。本實(shí)驗(yàn)提示3種蛋白對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)及浸潤(rùn)有重要價(jià)值。由于Ki67和PCNA均為臨床標(biāo)記腫瘤細(xì)胞增殖的重要標(biāo)志性抗體，因此Aurora-A、-B和TPX2與Ki67和PCNA的相關(guān)性直接說(shuō)明3種蛋白可以有效促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖過(guò)程，其也是Aurora-A、-B和TPX2對(duì)腫瘤細(xì)胞染色體和細(xì)胞分裂調(diào)節(jié)的外在表現(xiàn)〔19～21〕。

1 任利容，郭建峰，肖 蘭，等.Aurora-B在子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及其意義〔J〕.中國(guó)婦幼保健，2009;24(5):656-8.

2 Garcia-Fernandez E，De Diego JI，Collantes-Bellido E，et al.Aurora B kinase expression in laryngeal squamous cell carcinoma and its prognostic implications〔J〕.Histopathology，2011;58(3):368-76.

3 Kaestner P，Stolz A，Bastians H.Determinants for the efficiency of anticancer drugs targeting either Aurora-A or Aurora-B kinases in human colon carcinoma cells〔J〕.Mol Cancer Ther，2009;8(7):2046-56.

4 Warner SL，Stephens BJ，Nwokenkwo S，et al.Validation of TPX2 as a potential therapeutic target in pancreatic cancer cells〔J〕.Clin Cancer Res，2009;15(21):6519-28.

5 Sillars-Hardebol AH，Carvalho B，Tijssen M，et al.TPX2 and AURKA promote 20q amplicon-driven colorectal adenoma to carcinoma progression〔J〕.Gut，2012;61(11):1568-75.

6 張 賓，趙海波，種道群，等.TPX2蛋白在子宮內(nèi)膜樣腺癌中的表達(dá)及其臨床意義〔J〕.臨床腫瘤雜志，2011;16(4):335-7.

7 張 濰，王 建，辛?xí)匝?，?Aurora-A過(guò)表達(dá)與宮頸癌進(jìn)展及預(yù)后的關(guān)系〔J〕.中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2012;28(4):280-3.

8 Mehra R，Serebriiskii IG，Burtness B，et al.Aurora kinases in head and neck cancer〔J〕.Lancet Oncol，2013;14(10):e425-35.

9 張 珍，鄭廣紅.Aurora-B激酶在原發(fā)性上皮性卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2013;22(11):888-91.

10 Marxer M，F(xiàn)oucar CE，Man WY，et al.Tetraploidization increases sensitivity to Aurora B kinase inhibition〔J〕.Cell Cycle，2012;11(13):2567-77.

11 Zhang XH，Rao M，Loprieato JA，et al.Aurora A，Aurora B and survivin are novel targets of transcriptional regulation by histone deacetylase inhibitors in non-small cell lung cancer〔J〕.Cancer Biol Ther，2008;7(9):1388-97.

12 劉春紅，李瑩瑩，劉玉含，等.食管鱗癌組織中TPX2 mRNA的表達(dá)及與臨床病理生物學(xué)特征的關(guān)系〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2010;26(2):151-3.

13 張慧球，沈浩賢，劉奕生.TPX2蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)及意義〔J〕.中國(guó)醫(yī)藥指南，2010;8(11):27-8.

14 常海平，王敬芝，田 原，等.宮頸鱗癌組織中TPX2的表達(dá)及其臨床意義〔J〕.中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2012;28(9):685-7.

15 王新平，李國(guó)慶.Aurora-A和Aurora-B在人胃癌組織中的表達(dá)及意義〔J〕.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)藥雜志，2010;12(12):26-8.

16 Zhang L，Huang H，Deng L，et al.TPX2 in malignantly transformed human bronchial epithelial cells by anti-benzo〔a〕pyrene-7，8-diol-9，10-epoxide〔J〕.Toxicology，2008;252(1-3):49-55.

17 Hetland TE，Nymoen DA，Holth A，et al.Aurora B expression in metastatic effusions from advanced-stage ovarian serous carcinoma is predictive of intrinsic chemotherapy resistance〔J〕.Hum Pathol，2013;44(5):777-85.

18 孫利波，付雙林，羅毅男，等.Aurora-B在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其意義〔J〕.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009;29(1):47-9.

19 常海平，田 原，王敬芝，等.siRNA特異性沉默TPX2基因?qū)θ藢m頸癌Hela細(xì)胞體外生長(zhǎng)的影響〔J〕.中國(guó)腫瘤臨床，2012;39(2):80-4.

20 鄭向前，高 明，任秀寶，等.Aurora-A激酶的研究進(jìn)展〔J〕.中國(guó)腫瘤臨床，2013;40(3):1-4.

21 Ferchichi I，Stambouli N，Marrackchi R，et al.Experimental and computational studies indicate specific binding of pVHL protein to Aurora-A kinase〔J〕.J Phys Chem B，2010;114(3):1486-97.