景臨林，范小飛，馬慧萍，樊鵬程，賈正平

（蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院 藥劑科，甘肅 蘭州 730050）

白楊素（5，7-二羥基黃酮）屬于天然黃酮家族，廣泛存在于蜂蜜、蜂膠和植物提取物中.白楊素具有抗氧化［1］、抗炎［2］、抗菌［3］、抗焦慮［4］、抗腫瘤［5］和神經(jīng)保護(hù)［6］等眾多的藥理活性，并且?guī)缀鯖](méi)有毒副作用，是一種優(yōu)秀的天然來(lái)源藥物活性先導(dǎo)物.但是，白楊素存在溶解性很差，腸道吸收少，代謝快、生物利用度低等不足，尚不能作為藥物進(jìn)行開(kāi)發(fā)［7］.研究表明，白楊素分子中5位和7位羥基容易與葡萄糖醛酸作用而代謝失活，針對(duì)這兩個(gè)位點(diǎn)對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，可以改善其溶解性和藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，提高其代謝穩(wěn)定性和生物利用度.

糖基化三氮唑結(jié)構(gòu)具有三氮唑類(lèi)化合物和糖類(lèi)化合物的良好的生物活性［8］，將其引入母體分子可以改變母體分子的溶解性和藥代動(dòng)力學(xué)性能，增強(qiáng)母體分子的生物活性，在醫(yī)藥和生物工業(yè)上應(yīng)用廣泛，已經(jīng)成為設(shè)計(jì)合成新型活性分子的有效手段之一.

為了發(fā)現(xiàn)活性更加優(yōu)異的白楊素衍生物，本文作者根據(jù)藥物拼合原理，以水楊酸為橋聯(lián)基，將糖基化三氮唑結(jié)構(gòu)引入白楊素分子中，合成得到四個(gè)糖基化三氮唑水楊酸白楊素酯，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR，IR，EIMS和元素分析確認(rèn).目標(biāo)化合物合成路線(xiàn)見(jiàn)圖1.

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

X-4B型顯微熔點(diǎn)儀，溫度計(jì)未校正；NEXUS 670傅立葉變換紅外光譜儀，KBr壓片；Vario EL cube型元素分析儀；Brucker 400核磁共振波譜儀；API 3200LC/MS/MS質(zhì)譜儀.

圖1 糖基化三氮唑水楊酸白楊素酯衍生物的合成路線(xiàn)Fig.1 Synthesis of chrysin glycosyltriazole salicylic acid esters derivatives

白楊素（純度99%）購(gòu)自陜西慈緣生物技術(shù)有限公司；200～300目柱層析硅膠和10cm×20cm GF254高效薄層硅膠板購(gòu)自青島海洋化工廠(chǎng)分廠(chǎng)；CDCl3，DMSO-d6，內(nèi)標(biāo)TMS購(gòu)自Sigma公司，N，N′-二異丙基碳二亞胺（DIC）購(gòu)自阿拉丁試劑（上海）公司.其余試劑為市售分析純或化學(xué)純.CH2Cl2經(jīng)P2O5脫水干燥處理.

1.2 乙酰疊氮糖參考文獻(xiàn)［9］方法制備

1.3 化合物1-3按照文獻(xiàn)［10］方法制備

1.4 糖基化三氮唑水楊酸白楊素酯（4a-4d）的制備

將白楊素（508mg，2.0mmol），化合物3a-3d（3.0mmol），4-二甲氨基吡啶（DMAP，0.2mmol）和二氯甲烷（15mL）置于三口燒瓶中，攪拌下冰水浴冷卻至0℃，滴加N，N′-二異丙基碳二亞胺（380mg，3.0 mmol）的二氯甲烷溶液（15mL），滴畢后升至室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)24h.薄層色譜監(jiān)測(cè)（TLC）反應(yīng)完畢后，加入20mL水，分液，水相用二氯甲烷萃取（3×30mL），合并有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜.減壓除去溶劑，得粗品.快速柱層析分離后，得化合物4a-4d.

4a：產(chǎn)率82%.淡黃色粉末，mp.158.3～160.7℃.1H NMR（400MHz，CDCl3）δ：12.79（1H，s，5-OH），8.08（1H，d，J＝7.6Hz，H-17），7.98（1H，s，H-20），7.91（2H，d，J＝6.8Hz，H-2′，6′），7.59～7.52（4H，m，H-15，H-3′，4′，5′），7.16～7.13（2H，m，H-14，16），7.02（1H，s，H-3），6.77（1H，s，H-8），6.72（1H，s，H-6），5.84（1H，d，J＝9.2Hz，H-1″），5.43～5.40（2H，m，H-2″，3″），5.30（2H，s，H-18），5.24～5.20（1H，m，H-4″），4.25（1H，dd，J＝12.8，4.8Hz，H-6″），4.12（1H，d，J＝12.8Hz，H-5″），3.96（1H，dd，J＝10.0，2.8Hz，H-6″），2.05，2.02，1.98，1.81（12H，4s，4×COCH3）.ESI-MS（m/z）：786［M＋H］＋.IR（KBr，cm-1）：3 449，1 753，1 660，1 615，1 486，1 368，1 228，1 132，1 036.Anal.calcd.for C39H35N3O15：C 59.62，H 4.49，N 5.35；found C 59.66，H 4.43，N 5.38.

4b：產(chǎn)率83%.淡黃色粉末，mp.173.6～175.1℃.1H NMR（400MHz，CDCl3）δ：12.76（1H，s，5-OH），8.08（1H，d，J＝7.2Hz，H-17），8.03（1H，s，H-20），7.91（2H，d，J＝7.6Hz，H-2，6），7.62～7.53（4H，m，H-15，H-3′，4′，5′），7.21（2H，d，J＝8.4Hz，H-14，16），7.00（1H，s，H-3），6.76（1H，s，H-8），6.72（1H，s，H-6），5.80（1H，d，J＝9.2Hz，H-1″），5.60～5.54（1H，m，H-2″），5.51（1H，d，J＝2.8Hz，H-3″），5.39（2H，s，H-18），5.21（1H，dd，J＝10.4，3.2Hz，H-6″），4.15～4.11（3H，m，H-4″，5″，6″），2.14，2.00，1.98，1.83（12H，4s，4×COCH3）.ESI-MS（m/z）：786［M＋H］＋.IR（KBr，cm-1）：3 450，1 752，1 657，1 618，1 490，1 370，1 227，1 132，1 038.Anal.calcd.for C39H35N3O15：C 59.62，H 4.49，N 5.35；found C 59.64，H 4.51，N 5.31.

4c：產(chǎn)率86%.白色粉末，mp.210.0～211.7℃.1H NMR（400MHz，CDCl3）δ：12.78（1H，s，5-OH），8.06（1H，d，J＝8.0Hz，H-17），7.94（1H，s，H-20），7.91（2H，d，J＝7.6Hz，H-2′，6′），7.61～7.53（4H，m，H-15，H-3′，4′，5′），7.16～7.12（2H，m，H-14，16），7.01（1H，s，H-3），6.77（1H，s，H-8），6.71（1H，s，H-6），5.74～5.71（1H，m，H-1″），5.41～5.38（1H，m，H-2″），5.34（2H，s，H-18），5.33-5.30（1H，m，H-3″），5.11（1H，d，J＝5.6Hz，H-4″），4.26（1H，dd，J＝11.6，6.0Hz，H-5″），3.53～3.49（1H，m，H-5″），2.06，2.01，1.83（9H，3s，3×COCH3）.ESI-MS（m/z）：714［M＋H］＋.IR（KBr，cm-1）：3 451，1 751，1 656，1 615，1 490，1 369，1 228，1 135，1 034.Anal.calcd.for C36H31N3O13：C 60.59，H 4.38，N 5.89；found C 60.65，H 4.32，N 5.81.

4d：產(chǎn)率81%.白色粉末，mp.189.5～191.4℃.1H NMR（400MHz，CDCl3）δ：12.75（1H，s，5-OH），8.06（1H，d，J＝7.6Hz，H-17），8.03（1H，s，H-20），7.91（2H，d，J＝7.2Hz，H-2′，6′），7.61～7.52（4H，m，H-15，H-3′，4′，5′），7.19（1H，d，J＝8.4Hz，H-16），7.12～7.10（1H，m，H-14），6.98（1H，s，H-3），6.76（1H，s，H-8），6.71（1H，s，H-6），5.71（1H，d，J＝9.2Hz，H-1″），5.59（1H，t，J＝9.6Hz，H-2″），5.39（1H，s，H-3″），5.30（2H，s，H-18），5.21（1H，dd，J＝10.4，2.8Hz，H-4″），4.21（1H，dd，J＝13.2Hz，H-5″），3.88（1H，dd，J＝13.2Hz，H-5″），2.12，2.00，1.85（9H，3s，3×COCH3）.ESI-MS（m/z）：714［M＋H］＋.IR（KBr，cm-1）：3 449，1 742，1 657，1 617，1 493，1 372，1 228，1 134，1 034.Anal.calcd.for C36H31N3O13：C 60.59，H 4.38，N 5.89；found C 60.55，H 4.33，N 5.92.

2 結(jié)果與討論

2.1 合成方法

黃酮類(lèi)化合物酯化修飾主要有酶法和化學(xué)法兩種.盡管酶催化反應(yīng)具有專(zhuān)一性強(qiáng)和選擇性好的優(yōu)點(diǎn)，但酶種的選擇和培養(yǎng)極其費(fèi)時(shí)，且價(jià)格昂貴［11］，因此化學(xué)法還是目前最常用的方法.利用碳二亞胺類(lèi)縮合劑制備酯類(lèi)和酰胺在藥物合成中應(yīng)用非常廣泛.目前常用的縮合劑主要有三種：二環(huán)己基碳二亞胺（DCC）、二異丙基碳二亞胺（DIC）和1-（3-二甲胺基丙基）-3-乙基碳二亞胺（EDCI）.其中，DCC和DIC由于價(jià)廉易得，使用較為廣泛.但是DCC的反應(yīng)產(chǎn)物二環(huán)己基脲在水中幾乎不溶，微溶于一般有機(jī)溶劑，因此通過(guò)一些常用的純化方法，例如重結(jié)晶，柱層析等很難將其徹底清除.DIC由于其產(chǎn)生的二異丙基脲在一般的有機(jī)溶劑中溶解度較好，后處理較為容易.EDCI反應(yīng)后生成的脲是水溶性的，很容易被洗掉，但是價(jià)格較高.綜合以上考慮，本文作者選擇DIC為脫水劑，DMAP為催化劑，無(wú)水二氯甲烷為溶劑進(jìn)行酯化反應(yīng).由于白楊素分子結(jié)構(gòu)中5位和7位羥基的活性差異，經(jīng)TLC檢測(cè)發(fā)現(xiàn)在反應(yīng)條件下只得到了7-位酯化產(chǎn)物，產(chǎn)率為81%～86%.

2.2 結(jié)構(gòu)表征

在化合物4的1H-NMR譜中，白楊素分子中5位羥基質(zhì)子信號(hào)出現(xiàn)在12.75～12.79；而7位羥基質(zhì)子信號(hào)消失；7.94～8.03處的尖銳單峰為三氮唑結(jié)構(gòu)中質(zhì)子信號(hào)；-CH2-的質(zhì)子信號(hào)出現(xiàn)在5.30附近；水楊酸分子中4個(gè)芳香質(zhì)子分別出現(xiàn)在8.00，7.50和7.20附近；糖環(huán)上的端基質(zhì)子在5.80附近出峰，其余質(zhì)子分布在3.90～5.50之間；2.00附近的單峰為乙酰基的質(zhì)子信號(hào).化合物4的紅外譜圖中，3 450cm-1附近為典型羥基吸收峰；1 660cm-1附近為黃酮結(jié)構(gòu)中羰基的特征吸收峰；1 750cm-1附近為乙酰基中羰基的特征吸收峰，1 500和1 370cm-1出現(xiàn)苯環(huán)骨架振動(dòng)吸收峰；1 200和1 030cm-1處出現(xiàn)的強(qiáng)吸收峰為C-O的伸縮振動(dòng)吸收峰.上述數(shù)據(jù)證明，糖基化三氮唑基團(tuán)已經(jīng)成功的通過(guò)水楊酸橋聯(lián)基引入到白楊素分子的7位上.質(zhì)譜和元素分析的數(shù)據(jù)進(jìn)一步證實(shí)了上述結(jié)論.

3 結(jié)論

為了獲得代謝穩(wěn)定性更好、活性更強(qiáng)、生物利用度更高的新型白楊素衍生物，本文作者以四種糖、炔丙基溴、水楊醛和白楊素為原料，將白楊素分子與糖基化三氮唑結(jié)構(gòu)通過(guò)水楊酸相連，合成了四種新型糖基化三氮唑水楊酸白楊素酯衍生物，該合成路線(xiàn)短、操作簡(jiǎn)單，反應(yīng)條件溫和、產(chǎn)率較高，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)經(jīng)波譜分析與目標(biāo)化合物一致.

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