龍志林 楊永斌
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生物醫(yī)學(xué)圖像是圖像處理的一大門類,應(yīng)用范圍非常廣泛?,F(xiàn)代電子顯微鏡的分辨率已經(jīng)達(dá)到納米級(jí)或更高,能用來觀測(cè)分子甚至是原子的成像。在實(shí)際應(yīng)用高倍顯微鏡觀測(cè)時(shí),限于樣本制作技術(shù),往往達(dá)不到這個(gè)水平,需要通過完善被觀測(cè)樣本的制造技術(shù)來提高觀測(cè)效果。另外,采用先進(jìn)的圖像處理技術(shù),也能夠比較有效的提高觀測(cè)效果[1]。計(jì)算機(jī)技術(shù)的快速發(fā)展,使得采用計(jì)算程序完成圖像分析處理變得非常便捷,即圖像融合技術(shù),這類顯微鏡聚焦不清晰的問題也能夠得到很好的解決[2]。
現(xiàn)代融合技術(shù)興起于20世紀(jì)70年代[3,4],目前已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)圖像處理等領(lǐng)域,以完成顯微圖像的處理。一般來說,在需要觀測(cè)樣品的景深較大的情況下,調(diào)整顯微鏡的焦平面往往只能觀察到對(duì)應(yīng)于該焦平面的部分清晰圖像,而圖像其他部分則會(huì)比較模糊。這種情況下,就需要在同一視場(chǎng)中,將不同的焦平面分別采集多幅圖像,再運(yùn)用圖像融合技術(shù)對(duì)所采集的多幅圖像進(jìn)行融合處理,最后合成為完整的、每一景深部位均十分清晰的圖像。
對(duì)多幅圖像求平均是最簡(jiǎn)單的共聚焦顯微圖像融合算法,但效果也最不好。利用小波變換進(jìn)行多聚焦圖像融合是目前研究的一大熱點(diǎn),并已經(jīng)達(dá)到較好的融合效果,但大多數(shù)算法都是針對(duì)灰度圖像的融合。如果能在融合的同時(shí)保留住圖像的彩色信息,這無疑更保障了后期目標(biāo)物提取的準(zhǔn)確性。文獻(xiàn)[5]中提出了一種基于離散小波框架變換的算法,該算法可以比較好地融合兩幅彩色圖像。但是本文的研究對(duì)象是孢子彩色顯微圖像,對(duì)于同一場(chǎng)景如果僅僅采集2幅~3幅還是遠(yuǎn)遠(yuǎn)達(dá)不到預(yù)期的融合效果。在實(shí)際應(yīng)用中,為了準(zhǔn)確統(tǒng)計(jì)孢子的數(shù)量,對(duì)孢子圖像的每一場(chǎng)景均采集了10幅圖像。為了解決多幅顯微圖像的彩色融合問題,本文在傳統(tǒng)的針對(duì)灰度圖像融合算法的基礎(chǔ)上,提出一種改進(jìn)融合算法。該算法基于小波變換和高斯模糊,能夠獲得比較好的融合效果,而且還盡可能地縮短了融合處理所需花費(fèi)的時(shí)間。
傳統(tǒng)的小波變換灰度圖像融合算法是利用兩個(gè)一維濾波器實(shí)現(xiàn)對(duì)二維圖像的快速小波分解,然后再利用兩個(gè)一維重構(gòu)濾波器進(jìn)行圖像的重構(gòu)。如果f(x,y)表示一幅圖像,則它的小波變換以離散形式實(shí)現(xiàn)。設(shè)定兩個(gè)一維鏡像濾波算子,H為低通,G為高通。r和c則分別對(duì)應(yīng)于圖像的行和列,原始圖像f(x,y)為C0,按照這種算法,則在尺度j下有如下分解公式:
其中,h,v,d分別為水平,垂直和對(duì)角分量;J為分解層數(shù);Cj為在尺度j下小波分解。相應(yīng)的小波重構(gòu)算法為:
對(duì)二維圖像進(jìn)行N層分解,則可得3N+1個(gè)不同頻帶,其中高頻帶為3N個(gè)(記作LH,HL和HH)和低頻帶1個(gè)(記作LL)。以兩幅圖像的融合為例,說明這種圖像融合算法的思路:
1)對(duì)于高頻分量LH,HL和HH,則取兩幅圖像中相應(yīng)系數(shù)矩陣中對(duì)應(yīng)項(xiàng)的最大值。可以得到最強(qiáng)的邊緣信息,從而獲得質(zhì)量良好的圖像;
2)對(duì)于低頻分量LL,考慮其對(duì)恢復(fù)圖像質(zhì)量的影響較大,一般采用下式進(jìn)行計(jì)算:
其中,K,α,β均為加權(quán)因子。公式前半部表示取兩幅圖像的加權(quán)均值,對(duì)融合后圖像的亮度起關(guān)鍵作用;公式后半部分表示取兩幅圖像的加權(quán)差,包含兩幅圖像對(duì)應(yīng)的模糊信息;K為調(diào)節(jié)兩幅圖像的占優(yōu)比例因子,對(duì)兩幅亮度不同的圖像進(jìn)行調(diào)節(jié)以達(dá)到均衡;α增大則圖像加亮,β增大則圖像的邊緣加強(qiáng)。
這種融合算法能夠盡可能地保留圖像的細(xì)節(jié)部分,所以比較適用于灰度圖像。在彩色數(shù)字圖像中,如果簡(jiǎn)單地將上述的融合方法分別應(yīng)用于R,G,B三基色上。在原圖像的模糊區(qū)域,融合圖像對(duì)應(yīng)區(qū)域的圖像質(zhì)量得到提高,而清晰區(qū)域的質(zhì)量則有所降低,另外這種方法所產(chǎn)生的方格效應(yīng)也比較嚴(yán)重。在這里將其稱為RGB融合法。
為了對(duì)彩色孢子圖像進(jìn)行融合處理而又不丟失彩色信息,可以采用像素的對(duì)等映射,即提取所有參加融合圖像的清晰部分,融合成一幅最清晰的圖像。要達(dá)到這個(gè)目標(biāo),首先需要構(gòu)造一幅標(biāo)準(zhǔn)模糊圖像,記作mol_f。本文通過小波變換和高斯模糊處理構(gòu)造這樣一幅圖像。
1)小波變換。以往利用小波分析進(jìn)行融合處理時(shí),都是利用小波變換的金字塔結(jié)構(gòu)以分離出圖像的高頻信息。其實(shí)低頻信息也可以用于圖像融合,這是一種求反的思想。
2)高斯模糊。在光學(xué)系統(tǒng)成像系統(tǒng)建模中,設(shè)定輸入目標(biāo)為f(x,y),輸出目標(biāo)為g(x,y),目標(biāo)成像的作用則可表示為一個(gè)二維線性移不變系統(tǒng),其光學(xué)系統(tǒng)對(duì)某個(gè)目標(biāo)成像的沖激響應(yīng)函數(shù)為 f(x,y),則:
其中,h(x,y)為線性移不變系統(tǒng)對(duì)某個(gè)特定目標(biāo)的成像效果。對(duì)于成像的某個(gè)特定目標(biāo)而言,h(x,y)用一個(gè)高斯函數(shù)G(x,y,σ)近似,高斯函數(shù)σ的方差決定了光學(xué)系統(tǒng)對(duì)該目標(biāo)的模糊程度。
本文為了進(jìn)一步加強(qiáng)小波變換的效果,所以在小波變換后再進(jìn)行高斯模糊處理。
3)改變彩色圖像的色亮度和飽和度。如果用來生成標(biāo)準(zhǔn)模糊圖像的原圖像是最模糊的圖像,這顯然是最為理想的情況,但是實(shí)際上由于分塊的區(qū)域不可能足夠的小,所以這個(gè)目標(biāo)很難實(shí)現(xiàn)。這時(shí)就要求所選用的原圖像有一定的容錯(cuò)能力,即選為次模糊的一些圖像時(shí)也能夠比較準(zhǔn)確地生成標(biāo)準(zhǔn)模糊圖像。為了達(dá)到這個(gè)目標(biāo),需要改變所選源圖像的亮度和飽和度。
本文對(duì)每一場(chǎng)景均取了10幅不同景深圖像,記為fk。其中,k的取值是從1~10,分別代表這10幅源圖像。
要用fk進(jìn)行圖像融合,首先要解決的問題是:如何在fk中選取最清晰的部分,原有的判定清晰目標(biāo)和模糊目標(biāo)的方法并不適合多幅圖像。為了解決上述問題,本文首先需要生成給定場(chǎng)景下的一幅最模糊的圖像作為標(biāo)準(zhǔn)圖像mol_f(i,j),然后再用mol_f與fk分別進(jìn)行比較,判定每一個(gè)像素點(diǎn)在哪一幅源圖像fk上最清晰。
其次要確定清晰判定標(biāo)準(zhǔn),本文確定的判定標(biāo)準(zhǔn)是:設(shè)最終的輸出圖像為out(i,j),則與標(biāo)準(zhǔn)圖像某點(diǎn)mol_f(i,j)相差最大的就是最清晰的像素點(diǎn)out(i,j)。
為了評(píng)價(jià)本文的融合效果,分別采用本文融合法、RGB融合法和多圖像求平均融合法,用matlab進(jìn)行仿真處理以進(jìn)行比較。
從理論上進(jìn)行評(píng)價(jià)的結(jié)果見表1。
表1 融合效果評(píng)價(jià)
表1中,RMSE表示標(biāo)準(zhǔn)均方誤差,其值越小表示融合效果越好;MI表示信息熵,其值越大表示融合效果越好;Pc表示正確率,顯然其值越大表示融合效果越好。從表1中可以看出,本文算法的融合效果優(yōu)于RGB融合法和多幅圖像求平均法。
以往的小波分析圖像融合思路是通過小波算法獲得最優(yōu)的細(xì)節(jié)成分,這里則采用了相反的思路,即通過小波分析獲取最不清晰的圖像。另外,這里在小波分析之后又加入了高斯模糊,這一方面固然是為了增加模糊效果,但更重要的則是為了消除小波變換后的方格效應(yīng)。而且本文的融合算法采用多幅圖像,且融合后的圖像是彩色的,通過仿真處理可以看到運(yùn)算速度相對(duì)較快。
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