金花

【摘要】目的：對(duì)膠體金法、酶聯(lián)免疫法(ELISA)、免疫發(fā)光法、凝集法（TPPA）四種梅毒螺旋體抗體測(cè)定方式進(jìn)行比較。方法：選取我院60份確診為梅毒患者的血清，同時(shí)抽取60例健康人群的血清，對(duì)四種檢測(cè)方式進(jìn)行比較。結(jié)果：四種檢測(cè)方法中凝集法檢測(cè)率為100%，準(zhǔn)確率最高，酶聯(lián)免疫法與免疫法光法的陽(yáng)性平均檢出率為98%，而膠體金法的梅毒陽(yáng)性檢出率為95%，且假陽(yáng)性出現(xiàn)比例為3%，與其他三種檢測(cè)率比較,p＜0.05,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：膠體金法在操作中簡(jiǎn)便快速，但假陽(yáng)性假陰性均有發(fā)生，質(zhì)量控制沒(méi)有另外三種方法好，凝集法檢出率最高，為最準(zhǔn)確的梅毒抗體檢測(cè)方式。

【關(guān)鍵詞】 梅毒螺旋體抗體；膠體金；測(cè)定

【中圖分類(lèi)號(hào)】R446.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949(2014)07-0489-01

梅毒是一種由蒼白密螺旋體蒼白亞種病毒所引起的疾病，本病起病較慢，是一種全身性的疾病，主要通過(guò)性來(lái)傳播。由于本病對(duì)患者的傷害較大且發(fā)病緩慢，因此本病的早期診斷是非常重要的。血清診斷為主要的診斷方式，目前在臨床中通常有膠體金法、酶聯(lián)免疫法、免疫發(fā)光法、凝集法四種，本院將對(duì)四種抗體測(cè)定方式進(jìn)行研究比較，尋找準(zhǔn)確率最高的測(cè)定方式。

1資料與方法

1.1一般資料

選取我院2012年3月——2014年3月間60份確診為梅毒患者的血清，同時(shí)抽取60例健康人群的血清，60例梅毒患者中有37例為一期梅毒患者，16例為二期梅毒患者，7例為三期梅毒患者。所有患者血清均來(lái)自于我院體檢以及住院部患者群中，所有標(biāo)本收集完成后均行血清分離處理，放置冰箱保存。

1.2儀器試劑

方法一：膠體金法（SYP）試劑來(lái)源：北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司。

方法二：酶聯(lián)免疫法(ELISA)儀器:科華ST-360酶標(biāo)儀試劑來(lái)源：英科新創(chuàng)（廈門(mén)）科技有限公司。

方法三：免疫發(fā)光法(CMIA)儀器：ABBORT C16200 全自動(dòng)生化免疫分析儀，試劑配套。

方法四：凝集法（TPPA）試劑來(lái)源：富士瑞必歐珠式會(huì)社。

1.3結(jié)果觀察

對(duì)四種測(cè)定方式測(cè)定的梅毒陽(yáng)性率進(jìn)行比較，并做好詳細(xì)記錄。

1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

數(shù)據(jù)均采用spss17.0軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料均以%表示，采用卡方檢驗(yàn)，p＜0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

對(duì)四種測(cè)定方式測(cè)定的梅毒陽(yáng)性率進(jìn)行比較后，總結(jié)出以下結(jié)果：

表1陽(yáng)性檢測(cè)率

檢測(cè)方式 一期梅毒37例 二期梅毒16例 三期梅毒7例 健康人群60例膠體金法 35例（94.6%） 15例（93.8%） 7例（100%） 2例（3.3%）酶聯(lián)免疫法 36例（97.3%） 16例（100%） 7例（100%） 1例（1.7%）免疫發(fā)光法 36例（97.3%） 16例（100%） 7例（100%） 0例凝集法 37例（100%） 16例（100%） 7例（100%） 0例P ＜0.05 - - ＜0.05四種檢測(cè)方法中凝集法檢測(cè)率為100%，準(zhǔn)確率最高，酶聯(lián)免疫法與免疫發(fā)光法的陽(yáng)性平均檢出率為98%，而膠體金法的梅毒陽(yáng)性檢出率為95%，且假陽(yáng)性出現(xiàn)比例為3%，與其他三種檢測(cè)率比較p＜0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3討論

近年來(lái)梅毒在我國(guó)的發(fā)病率依舊呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，因此對(duì)其進(jìn)行篩檢、防治能夠有效的減少梅毒發(fā)病率。人體是梅毒螺旋體的唯一的宿主，人體感染梅毒后機(jī)體會(huì)產(chǎn)生梅毒特異性和非特異性?xún)煞N抗體。特異性抗體就是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中的抗體因子，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)也稱(chēng)為梅毒螺旋體血清試驗(yàn)［1］。其檢測(cè)方式通常有膠體金法、酶聯(lián)免疫法、免疫發(fā)光法、凝集法四種。而非特異性梅毒抗體是由于梅毒螺旋體在破壞的過(guò)程中會(huì)釋放抗原性物質(zhì)，而抗原性物質(zhì)會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體性反應(yīng)素，非梅毒螺旋體特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)多應(yīng)用在梅毒患者初篩實(shí)驗(yàn)中。

凝聚法主要是將提純的梅毒螺旋體抗原包被在人工載體明膠顆粒上，對(duì)血清中所含有的梅毒螺旋體抗體進(jìn)行檢測(cè)。凝膠法所用試劑靈敏度高且特異性非常強(qiáng)，因此對(duì)梅毒螺旋體抗體具有較高的檢出率，此觀點(diǎn)在我院的調(diào)查中也被充分證實(shí)，而且凝聚法是國(guó)際上公認(rèn)的梅毒確診方式。但此種方式在臨床中也有一定的限制性，例如窗口期問(wèn)題［2］。凝聚法主要是對(duì)IgM 和 IgG兩者的混合體進(jìn)行檢測(cè)，無(wú)法判定疾病活動(dòng)與否，因此不可作為療效診斷。而且此方式的試劑成本高、操作程序繁瑣且檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，因此在高密度的檢測(cè)中并不適合，且由于實(shí)驗(yàn)成本昂貴因此對(duì)于普通人群也會(huì)造成較大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)［3］。

酶聯(lián)免疫法檢測(cè)率與凝聚法基本相近，具有較高的梅毒螺旋體抗體檢出率。此種檢測(cè)方式是在基因工程的基礎(chǔ)上建立的。其檢測(cè)是通過(guò)重組多肽抗原的方式對(duì)梅毒抗體進(jìn)行檢測(cè)，重組多肽抗原與以往使用的抗原不同，重組多肽抗原具有更高的靈敏性，提高了檢測(cè)的檢出率。且酶聯(lián)免疫法可以進(jìn)行全自動(dòng)大量的檢測(cè)，且重復(fù)性較高，能夠方便結(jié)果的保存和管理，且檢出率高，因此在臨床中應(yīng)用非常廣泛。但此法同凝聚法相同，都是對(duì)IgM 和 IgG 的混合體進(jìn)行檢測(cè)，因此也存在相同的問(wèn)題，不可作為療效診斷［4］。但酶聯(lián)免疫法的操作方式非常簡(jiǎn)便，且成本較比凝聚法要廉價(jià)很多，因此非常適合普通患者。

膠體金測(cè)試方式是近年來(lái)興起的一種免疫檢測(cè)技術(shù)，此種方式操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)速度快捷，因此在臨床中應(yīng)用也非常廣泛。該試驗(yàn)應(yīng)用現(xiàn)代生物工程技術(shù)制備的高度純化單克隆梅毒螺旋體的基因工程抗原，能選擇尋找可以相結(jié)合的抗體。但此方式也有一定的缺陷，若患者體內(nèi)抗體含量過(guò)高或過(guò)低時(shí)，容易出現(xiàn)假陰性、假陽(yáng)性結(jié)果。

免疫發(fā)光法的檢測(cè)原理為標(biāo)本中的梅毒抗體和包被有重組梅毒抗原的微粒子結(jié)合后，洗滌，加入標(biāo)記有acridinium的抗人IgM或IgG，再次洗滌，加入預(yù)激發(fā)液和激發(fā)液，通過(guò)相對(duì)光強(qiáng)度對(duì)梅毒抗體水平進(jìn)行測(cè)試。此種方式的陽(yáng)性檢出率較高，但同樣為高成本檢測(cè)方式。

總之，凝聚法的陽(yáng)性檢出率最高，其次為免疫法光法和酶聯(lián)免疫法，膠體金法的陽(yáng)性檢出率最低。

參考文獻(xiàn)

［1］賀軍濤,尹佳鋒,楊波,張彥平,吳曉康,孟浩,王香玲.梅毒螺旋體生物學(xué)特性及測(cè)定方法學(xué)評(píng)價(jià)［J］.西部醫(yī)學(xué),2013,19(07):98-99

［2］宋煥景,侯生根,陳建春,彭德志.梅毒特異性抗體試驗(yàn)生物學(xué)假陽(yáng)性分析［J］.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,07(03):127-128

［3］蘇紅霞.三種方法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體比較分析［J］.中國(guó)醫(yī)療前沿,2012,13(24):117-119

［4］郭喜燕,徐靜.全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光法與TPPA法檢測(cè)血清梅毒螺旋體抗體的方法比較［J］.中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2012,14(09):625-626