王 倩

大慶油田總醫(yī)院風(fēng)濕免疫科53病區(qū)，黑龍江 大慶 163000

系統(tǒng)性紅斑狼瘡是自身免疫介導(dǎo)的，以免疫性炎癥為主要表現(xiàn)的彌漫結(jié)締組織病[1]。其發(fā)病與感染、免疫、遺傳、環(huán)境、激素等因素有關(guān)，其中機(jī)體免疫功能紊亂在系統(tǒng)性紅斑狼瘡的發(fā)病發(fā)展過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用。系統(tǒng)性紅斑狼瘡的免疫特征為T細(xì)胞和B細(xì)胞的異?；罨⒀a(bǔ)體激活及細(xì)胞因子失衡，體內(nèi)產(chǎn)生大量自身抗體和免疫復(fù)合物，從而引起超敏反應(yīng)[2]。

目前中藥治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡已取得一定成果，但其作用機(jī)制尚不清楚。IL-6屬Th1型細(xì)胞因子，IFN-γ屬TH2型細(xì)胞因子，本實(shí)驗(yàn)探究祛毒湯聯(lián)合醋酸潑尼松對(duì)狼瘡樣大鼠IL-6、IFN-γ的影響，從免疫學(xué)角度探討對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡的治療作用。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物和藥物 SD大鼠，購(gòu)自北京大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心;醋酸潑尼松，上海信誼藥業(yè)有限公司出品，國(guó)藥準(zhǔn)字:H31020675;祛毒湯由本院自制，主要包括生黃芪、白英、生地黃、秦艽、丹參、菝葜、白花蛇舌草、雷公藤、升麻、紫草、鬼箭羽、蜈蚣、鱉甲、生甘草等藥物;IL-6、IFN-γ試劑盒購(gòu)自北京大清生物技術(shù)有限公司。

1.2 模型制備 SD大鼠，共60只。隨機(jī)分為三組，各20只，即中西藥組 (祛毒湯+醋酸潑尼松)，西藥組 (醋酸潑尼松)，模型組。采用米舍爾改良法，取大鼠淋巴組織制成淋巴細(xì)胞懸液，每只大鼠每次注射0.2ml淋巴細(xì)胞懸液，含5×107淋巴細(xì)胞。分別1、4、7、10天經(jīng)尾靜脈注射。

1.3 給藥方法 造模后24h，按照大鼠體重給藥，中西藥組:給予醋酸潑尼松0.312mg/20g·d，祛毒湯按照0.7g生藥/20g·d;西藥組給予醋酸潑尼松0.312mg/20g·d;模型組灌喂等量生理鹽水。各組大鼠給藥15天。

1.4 檢測(cè)指標(biāo) 造模大鼠取腎臟組織，10%甲醛固定，酒精梯度濃度脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，切片，蘇木伊紅染色。取各組大鼠靜脈血2ml，3000r/min離心15min，制備血清。按照IL-6、IFN-γ試劑盒操作說(shuō)明說(shuō)進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)比三組大鼠血清IL-6、IFN-γ水平。

2 結(jié)果

2.1 造模大鼠腎臟組織觀察 腎小球顯著增大，形狀不規(guī)則，可見(jiàn)免疫復(fù)合物，腎小球毛細(xì)血管充血，內(nèi)皮細(xì)胞彌漫性、階段性增生，腎小球囊腔狹窄、基底膜增厚，近曲小管管腔變形，遠(yuǎn)曲小管可見(jiàn)管型，腎間質(zhì)可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。

2.2 IL-6、IFN-γ水平檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與模型組比較，中西藥組和西藥組IL-6、IFN-γ水平顯著下降 (P＜0.05)，同時(shí)，中西藥組IL-6、IFN-γ水平顯著低于西藥組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05)，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 IL-6、IFN-γ水平變化 (，N=20)

3 討論

系統(tǒng)性紅斑狼瘡是非器官特異性自身免疫疾病，體內(nèi)CD4+T細(xì)胞亞群失衡導(dǎo)致其分泌的細(xì)胞因子失調(diào)[3]。IL-6作用于多種效應(yīng)細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)。IL-6可促進(jìn)抗體產(chǎn)生，及肥大細(xì)胞的增殖，參與變態(tài)反應(yīng)性疾病和體液免疫性疾病，因而IL-6是一個(gè)重要的細(xì)胞因子。IFN-γ主要由NK細(xì)胞和T細(xì)胞分泌產(chǎn)生，通過(guò)激活單核巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞、淋巴細(xì)胞來(lái)調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，提示IFN-γ具有促進(jìn)系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病的作用。

本研究結(jié)果顯示，大鼠造模成功后IL-6、IFN-γ水平處于較高水平，給予激素及祛毒湯后IL-6、IFN-γ水平顯著下降，中西藥組大鼠IL-6、IFN-γ水平顯著低于模型組和西藥組，說(shuō)明祛毒湯聯(lián)合醋酸潑尼松可以有效降低狼瘡樣大鼠的細(xì)胞因子水平，其中祛毒湯可能具有一定的作用。

祛毒湯用于系統(tǒng)性紅斑狼瘡具有活血化瘀、滋陰益氣、涼血解毒之效，本病的病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)，腎虛、先天稟賦不足、熱毒內(nèi)淤，因此祛毒湯可達(dá)到很好的臨床效果。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，祛毒湯里的雷公藤具有抑制單核細(xì)胞增殖反應(yīng)，抑制B細(xì)胞功能，并且作用于B細(xì)胞的活化增殖階段，因此抑制B細(xì)胞和單核細(xì)胞分泌的炎性細(xì)胞因子;甘草提取物L(fēng)x對(duì)巨噬細(xì)胞的作用能抑制抗原信息傳遞，從而抑制免疫活性細(xì)胞。

本研究通過(guò)狼瘡樣大鼠的研究，發(fā)現(xiàn)祛毒湯聯(lián)合醋酸潑尼松可以調(diào)節(jié)免疫，降低炎性因子IL-6、IFN-γ水平，為后續(xù)研究提供理論基礎(chǔ)，同時(shí)也為臨床治療提供重要實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

[1]錢齊宏，張學(xué)光，放葛華.T細(xì)胞亞群及共刺激分子表達(dá)與系統(tǒng)性紅斑狼瘡免疫病理的關(guān)系[J].蘇州大學(xué)學(xué)報(bào) (醫(yī)學(xué)版)，2002，22(1):28.

[2]陳捷，王蘭蘭，劉瑾.LSE患者T細(xì)胞亞群功能紊亂與Thl、Th2細(xì)胞因子偏移的研究[J].華西醫(yī)學(xué)，2004，19(3):409.

[3]沈友軒，柯瑤，劉曉華，等.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的Th細(xì)胞亞群平衡失調(diào)的初步研究[J].上海免疫學(xué)雜志，2003，23(6):403.