方艷，王麗，王家金，陳美蘭，石亞娜，季鵬章，劉大會(huì)，3

(1. 云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 園藝作物研究所，云南 昆明 650205；2.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 藥用植物研究所，云南 昆明 650205；3.道地藥材國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100700；4.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中藥資源中心，北京 100700)

丹參在云南昆明引種栽培研究△

方艷1，王麗2*，王家金2，陳美蘭3，4，石亞娜2，季鵬章2，劉大會(huì)2，3

(1. 云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 園藝作物研究所，云南 昆明 650205；2.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 藥用植物研究所，云南 昆明 650205；3.道地藥材國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100700；4.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中藥資源中心，北京 100700)

目的：通過對(duì)云南昆明地區(qū)引種的陜西商洛丹參產(chǎn)量、外觀質(zhì)量及藥效成分含量進(jìn)行比較評(píng)價(jià)，為正品丹參在云南引種栽培及質(zhì)量控制提供理論依據(jù)。方法：采用田間試驗(yàn)和室內(nèi)檢測(cè)方法對(duì)引種商洛丹參、云南野生丹參、對(duì)照原產(chǎn)地商洛丹參的農(nóng)藝性狀、主要藥效成分含量進(jìn)行比較分析。結(jié)果：云南昆明引種商洛丹參，根條粗壯、勻長(zhǎng)，表面呈紅棕色，斷面較平整，氣微，味微苦澀，符合《中國(guó)藥典》2010年版對(duì)丹參藥材性狀描述之要求；昆明直播2年生和分根1年生丹參的丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量均大幅高于《藥典》要求；昆明直播2年生和分根1年生丹參脂溶性成分和總丹參酮接近對(duì)照陜西商洛分根1年生丹參，丹酚酸B和水溶性總酚含量明顯高于對(duì)照陜西商洛分根1年生丹參；昆明野生滇丹參除二氫丹參酮、迷迭香酸、丹參素含量略高于引種和原產(chǎn)地丹參外，其他成分含量均較低，達(dá)不到《中國(guó)藥典》2010年版要求。結(jié)論：綜合比較云南引種丹參與云南野生滇丹參、對(duì)照原產(chǎn)地陜西商洛丹參外觀質(zhì)量性狀及內(nèi)在品質(zhì)，正品丹參適合在云南昆明地區(qū)引種栽培。

丹參；引種栽培；丹參酮；丹酚酸B；外觀質(zhì)量

丹參又名紫丹參，為唇形科植物丹參SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根和根莖，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有活血祛淤、通經(jīng)止痛、清心除煩、涼血消癰功效，主要用于心血管疾病的治療[1-2]。丹參活性成分包括脂溶性的丹參酮類(丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、隱丹參酮、二氫丹參酮等)和水溶性的丹酚酸類(丹參素、迷迭香酸、丹酚酸等)兩大類[3-4]。丹參以前主要靠采挖野生藥材，隨著人們對(duì)丹參藥用價(jià)值認(rèn)識(shí)的不斷提高，以及復(fù)方丹參片、復(fù)方丹參滴丸、丹參舒心片等中成藥及丹參注射液、丹紅注射液等新制劑對(duì)心血管疾病的顯著療效，野生丹參已很難滿足日益擴(kuò)大的市場(chǎng)需求，現(xiàn)在很多地區(qū)開始大面積人工引種栽培，其中陜西商洛、山東臨沂、四川中江、河南方城等地為丹參藥材的道地產(chǎn)地和栽培主產(chǎn)地。丹參除了正品丹參外，還有滇丹參、大紫丹參、南丹參等近緣品種做替代品。其中，滇丹參、大紫丹參、南丹參的野生資源在云南分布廣泛，并常被作為丹參藥材替代品入藥使用。云南野生藥用丹參資源較為豐富，目前發(fā)現(xiàn)鼠尾草屬Salvia共有40余種(含變種、變型)的根及其根莖作丹參替代品使用，其中云南就有20種左右(含變種、變型)[5-7]，但云南一直沒有正品丹參的大面積人工栽培。隨著云南制藥工業(yè)和中醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展，對(duì)丹參藥材的年需求量逐年大幅增加，取消滇丹參等地方丹參藥材替代品，使用《中國(guó)藥典》正品丹參，保證用藥安全已是迫切所需。為此，筆者從陜西商洛天士力丹參GAP基地引種正品栽培丹參到云南昆明進(jìn)行試種，調(diào)查了引種丹參的農(nóng)藝性狀，并分析了引種丹參的有效成分含量，為正品丹參在云南昆明地區(qū)的引種栽培提供參考。

1 材料與方法

1.1引種地概況

引種地點(diǎn)為云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所設(shè)在云南省昆明市官渡區(qū)小哨街道辦的試驗(yàn)基地。試驗(yàn)地地理信息：東經(jīng)：102°58′，北緯：25°11′，海拔：1986m左右，田間坡度<5°。屬北緯亞熱帶地區(qū)，具有典型的溫帶氣候特點(diǎn)，年均氣溫14.5℃，最熱月(7月)平均氣溫19.7℃，最冷月(1月)平均氣溫7.5℃，日照數(shù)年均2445.6h，日照率56%，全年降水量約1031mm(其中5月至9月為雨季，10月至次年4月為旱季)，相對(duì)濕度為74%，全年無霜期均在240d以上。試驗(yàn)地種植丹參之前為荒草地，土壤類型為紅壤，土壤基本理化性狀為：pH5.57，有機(jī)質(zhì)5.06g·kg-1，全氮0.106%，全磷0.049%，全鉀2.31%，堿解氮61.00mg·kg-1，有效磷1.20mg·kg-1，速效鉀72.00mg·kg-1。

1.2引種種源和材料

供試丹參種子和種根來源于陜西省商洛市天津天士力丹參GAP種植基地，由西北農(nóng)林科技大學(xué)梁宗鎖教授提供。云南滇丹參采自云南昆明梁王山，陜西商洛分根栽培1年生丹參采自陜西商洛市丹鳳和商州種植基地。

1.3引種種植方法

1.3.1種子直播法 于2010年5月中旬播種，穴播按行距60cm、穴距30cm打淺穴，每穴點(diǎn)種5～6粒，不覆土。7～10d丹參種子發(fā)芽出苗。1個(gè)月后進(jìn)行間苗、定苗和補(bǔ)苗，每穴留2株丹參。試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)小區(qū)，每小區(qū)面積50m2。種植期間每年施用2次復(fù)合肥(N∶P2O5∶K2O=15∶15∶15)，施用量為150kg·hm-2，其他田間管理按照常規(guī)方式進(jìn)行。

1.3.2分根栽培法 于2011年1月下旬，選擇色紅、無腐爛、發(fā)育充實(shí)、直徑0.7cm～1.0cm左右的1年生根條作分根繁殖的種根。在整平耙細(xì)的栽植地上，按行距40cm，株距30cm挖穴，穴深5～7cm，根頭向上，直立插入2段4～6cm的根段，覆蓋火灰土，再蓋2cm細(xì)土，壓實(shí)，澆水，并在畦面覆蓋秸稈保濕。1個(gè)月左右丹參開始發(fā)芽，每穴定苗1株。試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)小區(qū)，每小區(qū)面積50m2。種植期間每年施用2次復(fù)合肥(N∶P2O5∶K2O=15∶15∶15)，施用量為150kg·hm-2，其他田間管理按照常規(guī)方式進(jìn)行。

1.4外觀質(zhì)量及產(chǎn)量的測(cè)定

采用多點(diǎn)隨機(jī)混合取樣，每個(gè)小區(qū)分別選取長(zhǎng)勢(shì)一致的12株丹參樣品。測(cè)量株高、根長(zhǎng)、根條數(shù)、根粗、根重(干重)。株高和根長(zhǎng)用直尺測(cè)量，莖粗、根粗(最大直徑)用游標(biāo)卡尺測(cè)量，根重采用稱重法測(cè)定。采集的樣品在同一條件下陰干，裝入封口袋中密封冷藏、備用。公頃產(chǎn)量(干重)=單株總根重(干重)×種植密度。

1.5云南引種丹參及藥用成分的測(cè)定方法

1.5.1脂溶性丹參酮類成分測(cè)定 丹參酮ⅡA、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、二氫丹參酮含量測(cè)定按文獻(xiàn)[8]方法進(jìn)行。

1.5.2水溶性成分測(cè)定 丹酚酸B、迷迭香酸含量測(cè)定按文獻(xiàn)[9]方法進(jìn)行。

丹參素的測(cè)定為天士力集團(tuán)企業(yè)內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)。稱取1.0g丹參根樣品粉末，加入10mL堿液，于90℃水浴中煮1.5h，定容至8mL，離心，取上清液0.2mL加入無水乙醇4mL，超聲提取20min，離心，取上清液1mL，加入3mL無水乙醇，于紫外分光光度計(jì)281nm處比色，記錄吸光度值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得總丹參素含量。

2 結(jié)果與分析

2.1引種丹參的主要外觀質(zhì)量性狀及產(chǎn)量表現(xiàn)

云南昆明引種丹參主要外觀質(zhì)量性狀如表1所示。三種引種栽培方式丹參外觀上總體表現(xiàn)為根條長(zhǎng)，沒有分枝，粗細(xì)均勻，呈圓柱形，外形美觀，較粗壯，上中部直徑在1cm以上；根表面紅棕色，具縱皺紋，外皮緊貼不易剝落；質(zhì)堅(jiān)實(shí)，易折斷，斷面較平整，灰白色，不空心，略呈角質(zhì)樣；干燥后粉性足，氣微，味微苦澀。不同種植方式的丹參在農(nóng)藝性狀上也存在顯著差異：直播2年生丹參根條數(shù)、根長(zhǎng)、根粗、總根重均顯著高于直播1年生和分根1年生丹參，其中尤以總根重差異最為顯著，分別為直播1年生丹參的3.21倍，分根1年生丹參的1.81倍；分根1年生丹參在株高、單根重上表現(xiàn)較優(yōu)，分別為直播2年生丹參的1.26倍和1.11倍，為直播1年生丹參的2.85倍和3.41倍；直播1年生丹參由于生長(zhǎng)時(shí)間短，上述各個(gè)外觀質(zhì)量指標(biāo)較低，但其根條數(shù)和根長(zhǎng)兩指標(biāo)較分根1年生栽培丹參高。

三種栽培方式丹參的單位面積產(chǎn)量(干重)相比，直播2年生丹參的畝產(chǎn)最高，可達(dá)10161±733.5kg·hm-2，其次為分根1年生的丹參4219.5±609kg·hm-2，產(chǎn)量最低為直播1年生丹參，僅為3168±633kg·hm-2。綜合以所述，直播1年生丹參雖然發(fā)根(單株根條數(shù))多，但生長(zhǎng)時(shí)間短，根較細(xì)，造成單根重和總根重較低，所以畝產(chǎn)比較低；分根1年生丹參由于無性繁殖發(fā)根(單株根條數(shù))少，造成單株總根重不高，畝產(chǎn)也較低；而采用直播2年生丹參在植株和藥材外觀性狀較好，單株總根重較高，畝產(chǎn)也較高，為昆明地區(qū)比較適合推廣的栽培方式。

表1 引種丹參主要外觀質(zhì)量性狀指標(biāo)

2.2引種丹參的主要活性成分含量

2.2.1丹參酮類成分含量 云南昆明引種丹參和陜西商洛原產(chǎn)地丹參丹參酮類成分含量如表2所示。同原產(chǎn)地相比，昆明直播2年生丹參的隱丹參酮含量略低于原產(chǎn)地，丹參酮Ⅰ和二氫丹參酮接近原產(chǎn)地，而丹參酮ⅡA和總量是高于原產(chǎn)地，其中丹參酮ⅡA的含量較原產(chǎn)地提高了37.4%～43.2%。昆明分根1年生丹參的丹參酮Ⅰ含量略低于原產(chǎn)地，丹參酮ⅡA和二氫丹參酮接近或略高于原產(chǎn)地，隱丹參酮和總量是高于原產(chǎn)地。昆明直播1年生丹參的各丹參酮類成分含量除二氫丹參酮含量接近原產(chǎn)地外，其他各成分均低于原產(chǎn)地?！吨袊?guó)藥典》2010年版要求丹參藥材丹參酮ⅡA含量不少于0.20%，昆明直播2年生和分根1年生丹參的丹參酮ⅡA含量均大幅高于《中國(guó)藥典》2010年版要求。另外，昆明野生滇丹參的各丹參酮類成分含量除二氫丹參酮含量略高于引種和原產(chǎn)地丹參藥材外，其他成分含量較低，同昆明引種直播1年生丹參的含量差異不大。說明昆明引種正品丹參的丹參酮類成分要顯著優(yōu)于本地野生滇丹參。

表2 不同產(chǎn)地丹參的丹參酮類成分含量 /%

2.2.2 丹參酚酸類成分含量 云南昆明引種丹參和陜西商洛原產(chǎn)地丹參酚酸類成分含量如表3所示。同原產(chǎn)地相比，昆明直播2年生丹參的迷迭香酸含量低于原產(chǎn)地，丹參素略高于原產(chǎn)地，而丹酚酸B和三者總量遠(yuǎn)高于原產(chǎn)地，其中丹酚酸B的含量較原產(chǎn)地提高了83.2%～103.3%。昆明分根1年生丹參的迷迭香酸含量也低于原產(chǎn)地，丹參素接近或略高于原產(chǎn)地，丹酚酸B和三者總量遠(yuǎn)高于原產(chǎn)地。昆明直播1年生丹參的各丹參酮類成分含量除丹參素含量接近原產(chǎn)地外，其他各成分均低于原產(chǎn)地。《中國(guó)藥典》2010年版要求丹參藥材丹酚酸B含量不少于3.0%，昆明直播2年生和分根1年生丹參的丹酚酸B含量均大幅高于《中國(guó)藥典》2010年版要求。另外，昆明野生滇丹參的迷迭香酸、丹參素含量遠(yuǎn)高于引種和原產(chǎn)地丹參藥材，而丹酚酸B含量較低，同昆明引種丹參的含量差異較大，且低于《中國(guó)藥典》2010年版要求。說明昆明引種正品丹參的丹酚酸B含量也是顯著優(yōu)于本地野生滇丹參。

表3 不同產(chǎn)地丹參的丹參酚酸類成分含量 /%

3 討論

通過對(duì)云南昆明地區(qū)引種的陜西商洛丹參的產(chǎn)量、外觀質(zhì)量的比較評(píng)價(jià)發(fā)現(xiàn)，昆明地區(qū)引種丹參藥材性狀符合《中國(guó)藥典》2010版要求。與梁宗鎖等[10-13]研究相比，昆明地區(qū)引種種子直播2年生丹參在株高、根條數(shù)、根長(zhǎng)、根粗、根重(干重)、產(chǎn)量方面接近陜西、山東、四川等丹參主產(chǎn)地。

通過對(duì)云南昆明地區(qū)引種陜西商洛丹參藥效成分含量的比較研究發(fā)現(xiàn)，昆明地區(qū)引種種子直播2年生丹參和引種分根栽培1年生丹參二氫丹參酮、丹酚酸B、水溶性成分總和顯著高于對(duì)照產(chǎn)地陜西商洛分根栽培1年生丹參。昆明地區(qū)引種種子直播2年生丹參和引種分根栽培1年生丹參有效成分丹參酮Ⅰ、隱丹參酮、丹參酮ⅡA、丹參酮總量、丹參素與對(duì)照產(chǎn)地陜西商洛分根栽培1年生丹參接近。以丹酚酸B和丹參酮ⅡA為評(píng)價(jià)指標(biāo)，昆明地區(qū)引種種子直播2年生丹參和引種分根栽培1年生丹參有效成分含量較高，均符合《中國(guó)藥典》2010版要求。這也說明正品丹參可以在云南昆明地區(qū)引種栽培。

通過對(duì)云南昆明地區(qū)引種陜西商洛丹參藥效成分含量與文獻(xiàn)[14]報(bào)道各地栽培丹參藥效成分含量的比較研究發(fā)現(xiàn)，不同產(chǎn)地丹參藥材及栽培品種藥效成分差異十分顯著；云南昆明地區(qū)引種陜西商洛正品丹參，其有效成分丹參酮ⅡA明顯優(yōu)于四川中江、陜西西安、山東、安微、河北、上海崇明等地的栽培丹參。

綜合考慮畝產(chǎn)和有效藥用成分含量等因素，昆明地區(qū)引種陜西商洛直播2年生丹參明顯優(yōu)于直播1年生丹參，故在昆明地區(qū)應(yīng)采用引種種子直播方法種植丹參2年。昆明地區(qū)引種分根栽培1年生丹參在有效成分含量，特別是在脂溶性成分含量上有較好的表現(xiàn)，但其畝產(chǎn)比較低，如果在昆明地區(qū)引種采用此方法，需要提高種植密度。

引種種植方式、生長(zhǎng)年限對(duì)丹參主要外觀質(zhì)量、產(chǎn)量和活性成分具有較大影響[15-17]。因此云南地區(qū)在引種栽培丹參時(shí)應(yīng)加強(qiáng)對(duì)引種種植環(huán)境(如土質(zhì)、地勢(shì)、氣候等)，引種栽培模式和丹參生長(zhǎng)年限與有效成分累積、產(chǎn)量等進(jìn)行深入研究，以保證藥品質(zhì)量，以確保臨床療效。

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StudiesonIntroductionandCultivationofSalviamiltiorrhizainKunming

FANG Yan1，WANG Li2*，WANG Jiajin2，CHEN Meilan3，4，SHI Yana2，JI Pengzhang2，LIU Dahui2，3

(1.Horticultural Research Institute，Yunnan Academy of Agricultural Sciences，Kunming 650205，China；2.Institute of Medicinal Plants，Yunnan Academy of Agricultural Sciences，Kunming 650205，China；3.State Key Laboratory of Dao-di Herbs，National Resource Center for Chinese Materia Medica，China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100700，China；4.National Resource Center for Chinese Medica，China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100700，China)

Objective：By analyzing and comparing the yield，appearance quality and effective components ofSalviamiltiorrhizawhich are introduced in Kunming and cultivated in Shangluo to provide theoretical basis forS.miltiorrhizaintroduction cultivation in Kunming.Methods：The combination method of field experiment and laboratory analysis was used to determine the yield，appearance quality and effective components ofS.miltiorrhiza.Results：The medicinal properties of Yunnan introduction cultivationS.miltiorrhizawere in accordance with ‘Chinese Pharmacopoeia(ChP)’ 2010 edition requirements.Yunnan introduction cultivation split root one-year-old and living two-year-oldS.miltiorrhiza，their salvianolic acid B and tanshinone ⅡAwere in accordance with ChP 2010 edition requirements.Yunnan introduction cultivation split root one-year-old and living two-year-oldS.miltiorrhiza，their fat-soluble and total tanshinone were content close to comparison Shangluo producing area split root one-year-oldS.miltiorrhiza，but the content of salvianolic acid B and the total water-soluble were phenolic significantly higher than those in Shangluo producing area.WildS.yunnanensiseffective components content is lower than Yunnan introduction cultivationS.miltiorrhiza，except dihydrotanshinone，rosemarinic acid，danshensu.Conclusion：GenuineSalviamiltiorrhizacan be introduced and cultivated in Kunming.

Salviamiltiorrhiza；Introduction；Effective components；Appearance quality

國(guó)家科技部滇池水專項(xiàng)子課題“湖濱退耕區(qū)面源污染綜合控制技術(shù)與工程示范”(2012ZX07102-003-03)；中央本級(jí)重大增減支項(xiàng)目“名貴中藥資源可持續(xù)利用能力建設(shè)”(2060302)，國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81130070)

*

王麗，Tel：(0871)65033441，E-mail：lwang20@163.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.10.011

2014-04-19)