陳志英，趙 晨，陳夢冉，仲偉珍

(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院，山東青島 266071)

牛蒡(Arctium lappa L.)別名山牛蒡，為中國古老的藥食兩用植物。其嫩葉及肉質(zhì)根可食用，并具有降血脂、抗腫瘤、抗衰老、抗疲勞、抗炎等作用［1］。目前研究發(fā)現(xiàn)牛蒡根提物能顯著降低高脂模型大鼠血脂水平［2］，但其抗氧化特別是抗動脈粥樣硬化的作用研究尚不多見。2013年8～11月，我們檢測了牛蒡根水提物對高脂血癥大鼠血脂和動脈粥樣硬化程度的影響?，F(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 健康雄性Wista大鼠60只，體質(zhì)量187～209 g，由山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司提供。

1.1.2 藥品及檢測試劑盒 辛伐他汀片(杭州莫沙東制藥有限公司，批號J20090001)。牛蒡根水提物，制備方法為:選取新鮮牛蒡，采用0.05%的維生素C和0.05%的檸檬酸護(hù)色液進(jìn)行護(hù)色處理，脫水10 s，切成1.5～2.5 mm的薄片，置-30℃冷風(fēng)環(huán)境下干燥40 min，在20～40℃下烘干炒制，冷卻后粉碎成顆粒。每10 g牛蒡顆粒加80～90℃水100 mL浸泡30 min，提取2次，將2次浸提液合并，用BC-R1001旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，在 -0.08 MPa、(68 ±1)℃下減壓濃縮至6.0 mL備用?？偰懝檀?TC)檢測試劑盒、甘油三酯(TG)檢測試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)檢測試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)檢測試劑盒、超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒及丙二醛(MDA)檢測試劑盒均由北京中生北控生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)。所用儀器為KNOE PRO型全自動生化分析儀(芬蘭康藝儀器公司)。

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗動物分組及處理 將60只大鼠隨機分為空白組、模型組、辛伐他汀組［3，4］及牛蒡根水提物高、中、低劑量組，各10只。除空白組外均飼喂高脂飼料，同時腹腔注射維生素D3，共1個月，建立高脂血癥動物模型。高脂飼料成分［5］:基礎(chǔ)飼料88.6%、膽固醇1.2%、豬油10%、膽鹽0.2%。然后空白組、模型組大鼠給予生理鹽水10 mL/kg每日灌胃;牛蒡根水提物高、中、低劑量組分別給予牛蒡根水提物8、4、2 g/kg每日灌胃;辛伐他汀組給予辛伐他汀10 mg/kg每日灌胃?？瞻讓φ战M給予基礎(chǔ)飼料，其余各組仍給予高脂飼料。連續(xù)灌胃7周。

1.2.2 觀察項目及檢測方法 ①血脂:末次灌胃后禁食不禁水12 h，乙醚麻醉后于眼內(nèi)眥取血，收集新鮮血液2 mL，5000 r/min離心10 min收集上清液，測定血清 TG、TC、HDL-C、LDL-C、SOD 和 MDA水平。動脈粥樣硬化指數(shù)(AI)=(TC值-HDL-C值)/HDL-C值。②主動脈壁形態(tài)學(xué)變化:大鼠于最后一次采血后處死，分離并剪取主動脈弓約0.5 cm，冷鹽水灌洗除去血管內(nèi)血液，后迅速置于10%中性福爾馬林溶液固定24 h以上，經(jīng)固定、脫水、透明、包埋，制備橫切面石蠟切片，厚度3 μm，行 HE染色，在光鏡下觀察。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS15.0統(tǒng)計軟件。數(shù)據(jù)用表示，組間比較采用重復(fù)設(shè)計的方差分析和單因素方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

實驗過程中各組大鼠生長活動正常，一般狀況良好，皮毛、清潔度、二便均無異常，體質(zhì)量正常變化。7周后各組大鼠血脂、SOD、MDA、AI見表1。由表1可見，7周后牛蒡根水提物高、中劑量組及辛伐他汀組的 TC、LDL-C和 AI明顯低于模型組，HDL-C和SOD明顯高于模型組(P均＜0.05)，但牛蒡根水提物高、中劑量組與辛伐他汀組上述指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義;牛蒡根水提物高劑量組、辛伐他汀組的TG、MDA明顯低于模型組(P均＜0.05)，牛蒡根水提物高劑量組與辛伐他汀組上述指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。牛蒡根水提物低劑量組的HDL-C水平與模型組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但低于辛伐他汀陽性組(P＜0.05)?？瞻捉M肉眼見主動脈內(nèi)膜不增厚，無脂質(zhì)條紋及粥樣斑塊形成;鏡下內(nèi)皮連續(xù)完整而光滑，中膜平滑肌細(xì)胞排列規(guī)則。模型組肉眼見主動脈壁增厚，管腔狹窄，內(nèi)壁有大小不等的脂質(zhì)條紋及斑塊形成;鏡下內(nèi)皮細(xì)胞呈連續(xù)性缺失，底層膠原纖維暴露，內(nèi)皮下有大量吞噬脂質(zhì)的泡沫樣細(xì)胞形成。牛蒡根水提物高、中劑量和辛伐他汀組肉眼見內(nèi)膜較光滑，鏡下見內(nèi)膜下少量脂質(zhì)沉積，形成少量泡沫樣細(xì)胞;低劑量組肉眼見管壁少量脂質(zhì)條紋形成，鏡下見內(nèi)膜下脂質(zhì)沉積較多。

表1 各組血脂、SOD、MDA、AI比較()

表1 各組血脂、SOD、MDA、AI比較()

注:與模型組比較，*P ＜0.05;與辛伐他汀組比較，△P ＜0.05

組別 TG(mmol/L)LDL-C(mmol/L)HDL-C(mmol/L)TC(mmol/L) SOD(U/mL)MDA(nmol/mL)AI空白組 0.86 ±0.40 0.35 ±0.11 0.73 ±0.06 1.01 ±0.23 137.54 ±18.62 12.24 ±1.58 0.38 ±0.21模型組 1.08 ±0.66 1.16 ±0.07 1.01 ±0.14 3.86 ±0.21 92.63 ±14.21 23.68 ±2.36 2.82 ±0.53辛伐他汀組 0.60 ±0.20* 0.42 ±0.04* 1.37 ±0.74* 2.97 ±0.14*123.64 ±15.35*15.99 ±2.95*1.17 ±0.61*牛蒡根水提物高劑量組 0.59 ±0.28* 0.44 ±0.08* 1.33 ±0.15* 2.88 ±0.20*120.37 ±11.49*14.84 ±1.87*1.16 ±0.53*牛蒡根水提物中劑量組 0.81 ±0.18 0.53 ±0.08* 1.29 ±0.18* 2.67 ±0.27*116.41 ±13.72*17.74 ±3.08 1.07 ±0.28*牛蒡根水提物低劑量組 0.78 ±0.27 1.07 ±0.13 1.03 ±0.12△3.56 ±0.26 99.48 ±16.31 21.65 ±2.33 2.45 ±0.61

3 討論

動脈粥樣硬化是大、中動脈內(nèi)膜出現(xiàn)含膽固醇、類脂肪等的黃色物質(zhì)，多由脂肪代謝紊亂、神經(jīng)血管功能失調(diào)引起［6］。脂肪代謝異常通常指血漿中脂質(zhì)量和質(zhì)的異常，包括TC、TG、LDL-C升高和HDLC降低;其中高脂血癥是動脈粥樣硬化、冠心病的危險因素［7，8］。

目前研究表明，牛蒡根具有降血脂和抗氧化作用［9］，脂質(zhì)浸潤和氧化損傷是動脈粥樣硬化的主要發(fā)病機制。本研究結(jié)果證實，牛蒡根水提物能夠顯著降低大鼠血清TC、TG、LDL-C水平并升高HDL-C水平，進(jìn)而發(fā)揮其降低血脂的作用。牛蒡根的主要活性成分有氨基酸類、微量元素、糖類、多酚類(綠原酸等)、炔類等［10，11］。Chang 等［12］報道，綠原酸可抑制白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)誘導(dǎo)的活性氧的生成。Lou等［13］研究發(fā)現(xiàn)牛蒡葉多酚類物質(zhì)對 DPPH自由基、羥自由基有較強的清除作用。牛蒡根水提物可能通過以上作用機制發(fā)揮抗氧化作用，并達(dá)到抗動脈粥樣硬化的效果。本研究結(jié)果顯示，牛蒡根水提物能夠顯著降低大鼠血清MDA水平并升高SOD水平，降低AI及主動脈病理損傷程度，故筆者認(rèn)為牛蒡根水提物具有較好的降血脂、抗氧化及抗動脈粥樣硬化的作用。

隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，高蛋白、高脂飲食增多，運動量減少，使得高血脂和動脈粥樣硬化的發(fā)病率逐年增長，并且發(fā)病呈現(xiàn)年輕化趨勢［14］。因此，開發(fā)像牛蒡根這樣經(jīng)濟(jì)實用、安全有效的新型降血脂藥物具有顯著而深遠(yuǎn)的意義;對于牛蒡根的藥用價值和作用機理還需深入的認(rèn)識和發(fā)掘［15～17］。

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