張國棟

抗病毒治療對慢性丙型肝炎患者T淋巴細(xì)胞亞群的影響

張國棟

目的 觀察聚乙二醇干擾素α-2a聯(lián)合利巴韋林治療慢性丙型肝炎獲得EVR者治療過程中血清T淋巴細(xì)胞亞群的變化, 從而了解有效抗病毒治療對患者細(xì)胞免疫狀態(tài)的影響。方法 選取使用聚乙二醇干擾素α-2a 180 μg, 皮下注射, 1次/周聯(lián)合利巴韋林片900~1200 mg/d, 口服, 療程48周抗病毒治療的慢性丙型肝炎患者中獲得早期病毒學(xué)應(yīng)答者46例, 分析其T淋巴細(xì)胞亞群的變化。結(jié)果CD3+T淋巴細(xì)胞在治療12周時較治療前下降, 但P＞0.05, 差異無統(tǒng)計學(xué)意義, 其后CD3+T淋巴細(xì)胞呈上升趨勢, 到治療48周時與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。在治療過程中CD4+T淋巴細(xì)胞、CD4+/CD8+逐漸升高, CD8+T淋巴細(xì)胞逐漸下降, 治療48周與治療開始前比較差異均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。治療48周療程結(jié)束時上述指標(biāo)與正常對照組相比較P均>0.05。結(jié)論 通過有效抗病毒治療,患者細(xì)胞免疫功能逐漸接近正常水平。

慢性丙型肝炎；抗病毒；T淋巴細(xì)胞亞群

我國一般人群抗-HCV陽性率為3.2%, 慢性丙型肝炎患者中約1%~3%可發(fā)展為原發(fā)性肝癌［1］, 是一種嚴(yán)重危害人類健康的傳染病。丙型肝炎的進(jìn)展與細(xì)胞免疫有密切關(guān)系。聚乙二醇干擾素α-2a聯(lián)合利巴韋林是目前治療該病理想方案之一, 有研究證明使用該方案獲得早期病毒學(xué)應(yīng)答(early virologic response, EVR)者達(dá)到持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答(sustained virologic response, SVR)率為74%［2］。作者回顧性分析了2010年8月~2013年6月期間應(yīng)用聚乙二醇干擾素α-2a聯(lián)合利巴韋林治療慢性丙型肝炎獲得EVR者治療過程中血清T淋巴細(xì)胞亞群的變化, 以觀察抗病毒治療對此類患者細(xì)胞免疫狀態(tài)的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年8月~2013年6月期間在平煤神馬醫(yī)療集團(tuán)總醫(yī)院治療的慢性丙型肝炎患者中獲得EVR者46例, 男17例, 女29例, 年齡20~61歲, 平均(43±14)歲。所有患者均為初治, 符合2004年中國《慢性丙型肝炎防治指南》［1］診斷標(biāo)準(zhǔn)。所有患者排除失代償期肝硬化、肝癌、合并其他病毒性肝炎、合并嚴(yán)重心臟疾病、合并免疫性疾病、合并精神疾病、合并嚴(yán)重甲狀腺疾病者, 并排除對干擾素、利巴韋林或其成分過敏者及酗酒或吸毒者, 所有患者均無高膽紅素血癥。

1.2 方法

1.2.1 治療方案 采用聚乙二醇干擾素α-2a(PEG-IFNα-2a,派羅欣, 上海羅氏公司)180 μg, 皮下注射, 1次/周聯(lián)合利巴韋林片900~1200 mg/d, 口服, 療程48周。

1.2.2 檢測 使用美國BeckmanCoulter公司Coulter Epics XL流式細(xì)胞儀檢測外周血T淋巴細(xì)胞, 試劑使用法國Immunotech公司的CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PC5單克隆抗體；OptiLyse C免洗溶血素原液。使用美國BeckmanCoulter公司全自動生化分析儀系統(tǒng)CX5 PRO及其配套試劑檢測血生化學(xué)指標(biāo)。使用熒光定量PCR法檢測HCVRNA(監(jiān)測下限5×102IU/ml),試劑盒由上?？迫A公司供應(yīng)。

1.2.3 觀察指標(biāo) 觀察正常對照組、開始治療前、治療12周及48周療程結(jié)束時T淋巴細(xì)胞亞群分布情況對比；治療12周與48周療程結(jié)束時的T淋巴細(xì)胞亞群分布情況對比。

1.2.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析, 計量資料以)表示, 組間及治療前后比較采用t檢驗, P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 外周血淋巴細(xì)胞亞群的變化 治療開始前CD4+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞、CD4+/CD8+與對照組相比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.01)。CD3+T淋巴細(xì)胞在治療12周時較治療前下降, 但P＞0.05, 差異無統(tǒng)計學(xué)意義, 其后CD3+T淋巴細(xì)胞呈上升趨勢, 到治療48周時與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。在治療過程中CD4+T淋巴細(xì)胞逐漸上升, CD8+T淋巴細(xì)胞逐漸下降, CD4+/CD8+逐漸升高, 以上指標(biāo)治療12周與治療開始前、治療48周與治療12周、治療48周與治療開始前比較差異均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.01)。治療48周時與對照組相比較CD3+T淋巴細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞、CD4+/CD8+均差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。以上結(jié)果顯示在治療過程中, 患者細(xì)胞免疫功能逐漸恢復(fù), 到治療結(jié)束時, 已接近正常水平。詳細(xì)情況見表1。

表1 治療過程中患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化s,%)

表1 治療過程中患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化s,%)

注：與對照組比較aP＜0.01；與治療前比較bP＜0.05,cP＜0.01；與治療前比較dP＜0.01；與治療12周比較eP＜0.01

例數(shù)CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+對照組4364.38±6.3545.17±6.0022.11±3.312.09±0.45治療開始前4663.09±5.9035.87±4.57a31.81±3.94a1.15±0.18a治療12周4661.83±4.7438.61±3.74b26.39±3.79c1.49±0.24c治療48周4667.70±4.06de47.01±5.13de23.38±4.50de2.09±0.52de

2.2 不良反應(yīng) 所有患者在治療開始后均出現(xiàn)不同程度發(fā)熱、肌肉酸痛等流感樣癥候群, 隨著治療時間延長, 上述癥狀消失；所有患者均出現(xiàn)不同程度白細(xì)胞減少癥、血小板減少癥, 于使用利可君、重組人粒細(xì)胞刺激因子后可繼續(xù)抗病毒治療；所有患者均出現(xiàn)食欲減退、脫發(fā)等癥狀, 均于對癥治療或解釋病情后繼續(xù)抗病毒治療。

3 討論

HCV病毒的直接致病作用和宿主的免疫機(jī)制被激活而破壞感染的肝細(xì)胞是參與HCV致病過程的兩種主要機(jī)制。HCV感染可導(dǎo)致感染者細(xì)胞免疫功能的改變［3］, 丙型肝炎的慢性化是由多種免疫細(xì)胞參與的復(fù)雜過程。T淋巴細(xì)胞是細(xì)胞免疫系統(tǒng)的主要成分。CD3+T淋巴細(xì)胞可代表T淋巴細(xì)胞總數(shù)；CD4+T淋巴細(xì)胞代表Th/Ti, 具有誘導(dǎo)抑制性T細(xì)胞產(chǎn)生和分泌IL-2的功能；CD8+T淋巴細(xì)胞代表Ts/Tc, 具有抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的作用。T淋巴細(xì)胞各亞群間的相對穩(wěn)定是機(jī)體發(fā)揮正常免疫功能的重要基礎(chǔ), 它們之間的相互關(guān)系可反映丙型肝炎患者的細(xì)胞免疫水平和免疫調(diào)節(jié)狀態(tài)。聚乙二醇干擾素α-2a是治療慢性丙型肝炎的藥物之一［4］。干擾素具有廣譜抗病毒作用, 主要通過與細(xì)胞表面的干擾素受體結(jié)合誘生多種抗病毒蛋白, 抑制病毒復(fù)制；同時干擾素還具有免疫調(diào)節(jié)作用, 主要通過I型人類白細(xì)胞抗原表達(dá)增強(qiáng)和增強(qiáng)免疫細(xì)胞活性來殺傷病毒感染細(xì)胞而清除病毒［5］。利巴韋林在該方案中主要起協(xié)同抗病毒作用。在使用聚乙二醇干擾素α-2a與利巴韋林聯(lián)合抗病毒治療丙型肝炎時, 通常通過觀察患者是否獲得EVR來判斷遠(yuǎn)期療效, 獲得EVR者獲得SVR率最高可達(dá)74%［2］。在本研究中, 入組患者均為使用該方案治療獲得EVR者, 在治療過程中CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞呈上升趨勢而CD8+T淋巴細(xì)胞呈下降趨勢, CD4+/ CD8+呈上升趨勢, 至48周時, 與治療開始前相比較P均<0.01, 有顯著統(tǒng)計學(xué)意義, 而治療48周療程結(jié)束時上述指標(biāo)與正常對照組相比較P均>0.05, 與相關(guān)研究結(jié)果相似［6］,提示通過有效抗病毒治療, 慢行丙型肝炎患者細(xì)胞免疫功能可逐漸恢復(fù)或接近正常水平, 從而為抗病毒療程結(jié)束后維持SVR提供免疫學(xué)基礎(chǔ), 但尚需擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步證實。

［1］ 中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會,中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲病學(xué)分會.中國丙型肝炎防治指南.中華肝臟病雜志, 2004,12(4):194-198.

［2］ McHutchison JG, Lawitz EJ, Shiffman ML, et al.Peginterferon alfa-2b or alfa-2a with ribavirin for treatment of hepatitis C infection.The New England journal of medicine, 2009,361(6):580-593.

［3］ 金波,王慧芬,王福生,等.慢性丙型肝炎患者Ⅰ型樹突狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞亞群的特點及臨床意義.傳染病信息, 2008, 21(2): 115-118.

［4］ 慢性丙型肝炎抗病毒治療專家委員會.慢性丙型肝炎抗病毒治療專家共識.中華實驗和臨床感染病雜志(電子版), 2009, 3(3):343-352.

［5］ Kamal SM, Ismail A, Graham CS, et al.Pegylated interferon alpha therapy in acute hepatitis C: relation to hepatitis C virus-specific T cell response kinetics.Hepatology, 2004,39(6):1721-1731.

［6］ 胡敏濤,毛燕群,裴豪,等.聚乙二醇干擾素對慢性丙型肝炎患者淋巴細(xì)胞亞群的影響.中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志, 2011, 21(4): 209- 211.

467000 河南省平頂山市平煤神馬醫(yī)療集團(tuán)總醫(yī)院感染性疾病科