李小平+黃遠英+殷光玲+蔣麗

摘要：茶多酚、維生素Ｅ和硒都是較強的抗氧化劑，對多種疾病具有預防和治療作用。試驗選用５０只昆明清潔級小鼠，采用不同劑量茶多酚維Ｅ硒膠囊連續(xù)灌胃３０ ｄ，通過測定小鼠受試前后體重、血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力及８Ｇｙ６０Ｃｏγ射線造模前后肝組織丙二醛（ＭＤＡ）含量、ＳＯＤ和谷胱甘肽過氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活力，研究茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠抗氧化系統(tǒng)的影響。結果顯示，與模型對照組相比，各劑量茶多酚維Ｅ硒膠囊對造模后小鼠肝組織ＳＯＤ活力無顯著影響；７５、１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ茶多酚維E硒膠囊對造模后小鼠肝組織ＭＤＡ含量和ＧＳＨ－Ｐｘ活力也無顯著影響；３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ茶多酚維E硒膠囊劑量組可顯著降低造模后小鼠肝組織ＭＤＡ含量，提高其ＧＳＨ－Ｐｘ活力。以上結果為茶多酚、維生素Ｅ和硒在食品及保健品中的聯(lián)合應用提供了理論依據(jù)。

關鍵詞：茶多酚；維生素Ｅ；硒；小鼠；抗氧化

中圖分類號：Ｒ２８４；Ｑ９４６．８文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０14）09－2114-03

Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｔｅａ Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ，Ｖｉｔｍｉｎ Ｅ ａｎｄ Ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｏｎ the Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｉｃｅ

ＬＩ Ｘｉａｏ－ｐｉｎｇ， ＨＵＡＮＧ Ｙｕａｎ－ｙｉｎｇ， ＹＩＮ Ｇｕａｎｇ－ｌｉｎｇ， ＪＩＡＮＧ Ｌｉ

（Ｂｙ－ｈｅａｌｔｈ Ｃｏ， Ｌｔｄ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６６３， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ， ＶＥ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ are ｓｔｒｏｎｇ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ， useful ｆｏｒ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｍａｎｙ ｄｉｓｅａｓｅｓ． ５０ ＣＬ Ｋｕｎｍｉｎｇ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ａｌｌｏｃａｔｅｄ ｔｏ ５ ｇｒｏｕｐｓ ａｎｄ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｏｓｅ ｏｆ ｃａｐｓｕｌｅ ｗｉｔｈ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ， ＶＥ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ for ３０ ｄａｙｓ． Ｔｈｅ ｉｎｄｉｃｅｓ ｆｏｒ ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔs ｏｆ ｔｈｅ ｃａｐｓｕｌｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｓｙｓｔｅｍｓ ｏｆ ｍｉｃｅ ｉｎｃｌｕｄｅｄ ｗｅｉｇｈｔ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｍｉｃｅ， ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｒｅｄ ｃｅｌｌｓ， ａｎｄ ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ， ＳＯＤ ａｎｄ ＧＳＨ－Ｐｘ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｂｅｆｏｒｅ ａｎｄ ａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ８Ｇｙ６０Ｃｏγｒａｙ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｅｆｆｅｃｔs ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｏｓｅｓ ｃａｐｓｕｌｅ ｏｎ ｌｉｖｅｒ ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ． ７５ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ ａｎｄ １５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ ｃａｐｓｕｌｅ ｈａｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ＧＳＨ－Ｐｘ ａｃｔｉｖｉｔｙ of liver． Ｂｕｔ ３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ ｃａｐｓｕｌｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ（１３２．９±１９．４ ＶＳ １７０．１±２２．９） ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ＧＳＨ－Ｐｘ ａｃｔｉｖｉｔｙ （２３．０±２．６４ ＶＳ １９．１±２．９７） ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ control ｇｒｏｕｐ． Ｉｔ will provide ａ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ comprehensive ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ， ＶＥ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｉｎ ｈｅａｌｔｈ ｆｏｏｄｓ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ； ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ； ｓｅｌｅｎｉｕｍ； mice ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ

生理條件下機體的氧化與抗氧化系統(tǒng)處于動態(tài)平衡，而在多種氧化應激條件下（如低氧、中毒和輻照等），機體氧化與抗氧化平衡失調(diào)，從而誘導氧化應激的產(chǎn)生。目前證實氧化應激能誘發(fā)動脈粥樣硬化、高血壓等多種慢性疾病，嚴重影響人類健康。因此利用抗氧化劑清除氧化應激產(chǎn)生的自由基成為化學、生物和醫(yī)學等領域的研究熱點。

茶葉中對人體健康最有益的物質(zhì)是具有強抗氧化能力的茶多酚，是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱。主要可分為兒茶素類、黃酮及黃酮醇類、花青素類、酚酸及縮酚酸類。茶多酚的抗氧化作用是由于兒茶素Ｂ環(huán)和Ｃ環(huán)上的酚羥基持有供氫體的活性，在氧化過程中生成鄰醌類及聯(lián)苯酚醌。它可以有效清除氧自由基和脂類自由基，防止脂質(zhì)過氧化，從而預防心血管疾病、腫瘤等疾病的發(fā)生［１］。已有研究表明抗氧化劑之間存在良好的協(xié)同效應，這種效應同樣適用于茶多酚?，F(xiàn)有研究證實，茶多酚和維生素共同使用可增加茶多酚的抗氧化［２－４］、抑菌［５－７］、降低自由基損傷［８］和保鮮［９］等作用。而在動物試驗中，國內(nèi)外大量文獻證明了維生素Ｅ和硒聯(lián)合使用能起到協(xié)同增效的抗損傷［１０］、抗氧化作用［１１，１２］。因此本試驗用茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠進行抗氧化功能研究，初步探討多種抗氧化劑的協(xié)同增效機理。

１材料與方法

１．１樣品

湯臣倍健茶多酚維Ｅ硒膠囊，批號：２０１０１００１，送檢品為粉末（膠囊內(nèi)容物），推薦成人服用量為０．９ ｇ／（人·ｄ）。試驗時樣品均采用蒸餾水配制和稀釋。

１．２試驗動物

清潔級昆明種雌性小鼠共５０只，體重１８～２２ ｇ，由四川省中醫(yī)藥科學院提供［合格證號：ＳＣＸＫ（川）２００８－１９］。試驗前檢疫１周，整個試驗過程中，試驗動物飼養(yǎng)于屏障級動物房（許可證號：四川省試驗動物管理委員會第００１號），動物自由攝食和飲水，動物房溫度２０～２３ ℃，相對濕度５５％～６５％。

１．３劑量分組

茶多酚維Ｅ硒膠囊按成人每日推薦服用量的５倍、１０倍、２０倍設３個劑量組，即７５、１５０和３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ，每天分別稱?。罚?、１５０和３００ ｍｇ受試物，各加蒸餾水至２０ ｍＬ混懸，按每１００ ｇ體重２ ｍＬ給動物灌胃。另設模型對照組和空白對照組。

１．４主要儀器和試劑

７２００型分光光度計，恒溫水浴箱，微量可調(diào)加樣器，高速離心機和低速離心機，漩渦混運器，ＤＹ８９－１型電動玻璃勻漿機；丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽過氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）測定試劑盒（購于南京建成生物工程研究所，４ ℃冰箱保存）；三氯甲烷、無水乙醇、冰乙酸等均為分析純。

１．５試驗方法

５０只小鼠隨機分為５個組，每組１０只。茶多酚維E硒膠囊各劑量組小鼠每天灌胃給予不同劑量的茶多酚維E硒膠囊；模型對照組和空白對照組小鼠灌胃給予等體積蒸餾水，連續(xù)３０ ｄ。試驗開始前、試驗中期及試驗結束時對各組小鼠稱重。３０ ｄ后，尾部取血測超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力。同時，除空白對照組外，各組給予８Ｇｙ６０Ｃｏγ射線全身一次性照射，照射后第四天處死全部動物，?。埃病埃?ｇ肝組織，用冷生理鹽水制成１０％的肝勻漿，４ ０００ ｒ／ｍｉｎ離心５ ｍｉｎ。直接?。保埃ジ蝿驖{上清液１００ μＬ測定ＭＤＡ含量，１０％肝勻漿上清液稀釋１０倍后取１０ μＬ測定ＳＯＤ活力，１０％肝勻漿上清液稀釋４０倍后取２００ μＬ測定ＧＳＨ－Ｐｘ活力。測定的具體方法按照南京建成生物工程研究所購買的ＭＤＡ、ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ試劑盒說明書進行。

１．６數(shù)據(jù)統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標準差表示。采用ＰＥＭＳ３．０《中國醫(yī)學百科全書·醫(yī)學統(tǒng)計學》統(tǒng)計軟件包（第三版）對試驗數(shù)據(jù)進行處理。

２結果與分析

２．１茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠體重的影響

由表１可見，在試驗期間，各組小鼠體重差異不顯著（Ｐ＞０．０５），表明茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠體重無顯著影響。

２．２茶多酚維Ｅ硒膠囊對造模前小鼠血清ＳＯＤ活力的影響

由表２可見，造模前各組小鼠血清中ＳＯＤ活力差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。表明茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠血清ＳＯＤ活力無顯著影響。

２．３茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠肝組織ＭＤＡ含量的影響

由表３可見，模型對照組小鼠肝組織中ＭＤＡ含量顯著（Ｐ＜０．０５）高于空白對照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的ＭＤＡ含量與模型對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）降低，茶多酚維Ｅ硒膠囊７５和１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組與模型對照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．４茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠肝組織ＳＯＤ活力的影響

由表４可見，模型對照組小鼠肝組織中ＳＯＤ活力顯著（Ｐ＜０．０５）低于空白對照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊各劑量組小鼠的ＳＯＤ活力與模型對照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．５茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠肝組織ＧＳＨ－Ｐｘ活力的影響

由表５可見，模型對照組小鼠肝組織中ＧＳＨ－Ｐｘ活力顯著（Ｐ＜０．０５）低于空白對照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的ＧＳＨ－Ｐｘ活力與模型對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，茶多酚維Ｅ硒膠囊７５和１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組與模型對照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

３小結與討論

自由基是機體正常代謝過程中的產(chǎn)物，具有強氧化性，機體內(nèi)自由基過?？梢鹬|(zhì)過氧化及生物膜損壞，導致腫瘤及心血管疾病等［１３］。茶多酚具有吸收放射性物質(zhì)毒素的能力，口服和外用茶多酚能抵抗輻射產(chǎn)生的輕度放射病及治療血細胞減少癥。王岳飛等［１４］的研究表明，茶多酚對輻照損傷引起的ＮＩＨ小白鼠及荷瘤小鼠紅細胞與白細胞減少均有明顯抑制作用，表明茶多酚對輻照所致的血象損傷有明顯的防護作用?，F(xiàn)有研究表明，茶多酚和維生素Ｃ、維生素Ｅ之間都存在協(xié)同抗氧化作用［１，１５］。維生素Ｅ和硒都是人和動物體內(nèi)的必需營養(yǎng)素，除發(fā)揮重要的生理功能外，同時使用能互補、協(xié)同、增效［１６－１８］。

本試驗應用茶多酚、維生素Ｅ和硒的混合物對小鼠進行抗氧化研究，而肝臟作為機體的生化代謝中心也是對脂質(zhì)過氧化最敏感的器官，肝臟損傷與氧化應激有明顯關系，因此本研究選擇肝組織ＭＤＡ、ＳＯＤ和 ＧＳＨ－Ｐｘ作為研究指標，初步探討茶多酚維Ｅ硒膠囊的抗氧化活性。結果表明，茶多酚維Ｅ硒膠囊各劑量對試驗小鼠體重和造模前血清ＳＯＤ活力均無影響，提示茶多酚維Ｅ硒膠囊在７５～３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量范圍內(nèi)對小鼠無毒副作用。在本研究范圍內(nèi)，低、中濃度（７５、１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ）茶多酚維Ｅ硒膠囊劑量組與模型對照組相比沒有顯著增強小鼠的自由基清除能力，而高濃度（３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ）可明顯降低小鼠肝組織ＭＤＡ含量、升高ＧＳＨ－Ｐｘ活力。王岳飛等［１９］研究顯示，茶多酚與幾種天然抗氧化物質(zhì)的協(xié)同抗氧化作用與抗氧化物質(zhì)本身的抗氧化能力、抗氧化物的有效濃度等因素有關。抗氧化物之間的協(xié)同作用在抗氧化物本身有效濃度較低時協(xié)同作用也較低，隨著有效濃度增加，協(xié)同抗氧化作用增加，達到峰值后繼續(xù)增加有效濃度，協(xié)同作用減弱。協(xié)同作用的機理都是通過基于氧化還原電位差的偶聯(lián)氧化。偶聯(lián)作用一方面降低了直接反應的兩種物質(zhì)間的點位落差，使反應易于進行；另一方面，偶聯(lián)的抗氧化劑油水分配系數(shù)互為補充，在某一體系中合理分布，充分發(fā)揮每一種抗氧化劑的功能，因而茶多酚與多種抗氧化劑聯(lián)合應用后，其抗氧化效果大大增強［１５］，這也為茶多酚與其他抗氧化物配伍作為食品或保健品的原料或添加劑提供了理論依據(jù)。

４結論

本研究結果顯示，輻照后，模型對照組小鼠的肝組織ＳＯＤ活力和ＧＳＨ－Ｐｘ活力與空白對照組相比均顯著（Ｐ＜０．０５）降低、ＭＤＡ含量與空白對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，說明造模成功。茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的肝組織ＧＳＨ－Ｐｘ活力與模型對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，ＭＤＡ含量與模型對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）降低。綜上所述，茶多酚維Ｅ硒膠囊對試驗動物模型具有良好的抗氧化活性。

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１．６數(shù)據(jù)統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標準差表示。采用ＰＥＭＳ３．０《中國醫(yī)學百科全書·醫(yī)學統(tǒng)計學》統(tǒng)計軟件包（第三版）對試驗數(shù)據(jù)進行處理。

２結果與分析

２．１茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠體重的影響

由表１可見，在試驗期間，各組小鼠體重差異不顯著（Ｐ＞０．０５），表明茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠體重無顯著影響。

２．２茶多酚維Ｅ硒膠囊對造模前小鼠血清ＳＯＤ活力的影響

由表２可見，造模前各組小鼠血清中ＳＯＤ活力差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。表明茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠血清ＳＯＤ活力無顯著影響。

２．３茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠肝組織ＭＤＡ含量的影響

由表３可見，模型對照組小鼠肝組織中ＭＤＡ含量顯著（Ｐ＜０．０５）高于空白對照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的ＭＤＡ含量與模型對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）降低，茶多酚維Ｅ硒膠囊７５和１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組與模型對照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．４茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠肝組織ＳＯＤ活力的影響

由表４可見，模型對照組小鼠肝組織中ＳＯＤ活力顯著（Ｐ＜０．０５）低于空白對照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊各劑量組小鼠的ＳＯＤ活力與模型對照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．５茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠肝組織ＧＳＨ－Ｐｘ活力的影響

由表５可見，模型對照組小鼠肝組織中ＧＳＨ－Ｐｘ活力顯著（Ｐ＜０．０５）低于空白對照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的ＧＳＨ－Ｐｘ活力與模型對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，茶多酚維Ｅ硒膠囊７５和１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組與模型對照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

３小結與討論

自由基是機體正常代謝過程中的產(chǎn)物，具有強氧化性，機體內(nèi)自由基過?？梢鹬|(zhì)過氧化及生物膜損壞，導致腫瘤及心血管疾病等［１３］。茶多酚具有吸收放射性物質(zhì)毒素的能力，口服和外用茶多酚能抵抗輻射產(chǎn)生的輕度放射病及治療血細胞減少癥。王岳飛等［１４］的研究表明，茶多酚對輻照損傷引起的ＮＩＨ小白鼠及荷瘤小鼠紅細胞與白細胞減少均有明顯抑制作用，表明茶多酚對輻照所致的血象損傷有明顯的防護作用。現(xiàn)有研究表明，茶多酚和維生素Ｃ、維生素Ｅ之間都存在協(xié)同抗氧化作用［１，１５］。維生素Ｅ和硒都是人和動物體內(nèi)的必需營養(yǎng)素，除發(fā)揮重要的生理功能外，同時使用能互補、協(xié)同、增效［１６－１８］。

本試驗應用茶多酚、維生素Ｅ和硒的混合物對小鼠進行抗氧化研究，而肝臟作為機體的生化代謝中心也是對脂質(zhì)過氧化最敏感的器官，肝臟損傷與氧化應激有明顯關系，因此本研究選擇肝組織ＭＤＡ、ＳＯＤ和 ＧＳＨ－Ｐｘ作為研究指標，初步探討茶多酚維Ｅ硒膠囊的抗氧化活性。結果表明，茶多酚維Ｅ硒膠囊各劑量對試驗小鼠體重和造模前血清ＳＯＤ活力均無影響，提示茶多酚維Ｅ硒膠囊在７５～３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量范圍內(nèi)對小鼠無毒副作用。在本研究范圍內(nèi)，低、中濃度（７５、１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ）茶多酚維Ｅ硒膠囊劑量組與模型對照組相比沒有顯著增強小鼠的自由基清除能力，而高濃度（３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ）可明顯降低小鼠肝組織ＭＤＡ含量、升高ＧＳＨ－Ｐｘ活力。王岳飛等［１９］研究顯示，茶多酚與幾種天然抗氧化物質(zhì)的協(xié)同抗氧化作用與抗氧化物質(zhì)本身的抗氧化能力、抗氧化物的有效濃度等因素有關?？寡趸镏g的協(xié)同作用在抗氧化物本身有效濃度較低時協(xié)同作用也較低，隨著有效濃度增加，協(xié)同抗氧化作用增加，達到峰值后繼續(xù)增加有效濃度，協(xié)同作用減弱。協(xié)同作用的機理都是通過基于氧化還原電位差的偶聯(lián)氧化。偶聯(lián)作用一方面降低了直接反應的兩種物質(zhì)間的點位落差，使反應易于進行；另一方面，偶聯(lián)的抗氧化劑油水分配系數(shù)互為補充，在某一體系中合理分布，充分發(fā)揮每一種抗氧化劑的功能，因而茶多酚與多種抗氧化劑聯(lián)合應用后，其抗氧化效果大大增強［１５］，這也為茶多酚與其他抗氧化物配伍作為食品或保健品的原料或添加劑提供了理論依據(jù)。

４結論

本研究結果顯示，輻照后，模型對照組小鼠的肝組織ＳＯＤ活力和ＧＳＨ－Ｐｘ活力與空白對照組相比均顯著（Ｐ＜０．０５）降低、ＭＤＡ含量與空白對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，說明造模成功。茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的肝組織ＧＳＨ－Ｐｘ活力與模型對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，ＭＤＡ含量與模型對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）降低。綜上所述，茶多酚維Ｅ硒膠囊對試驗動物模型具有良好的抗氧化活性。

參考文獻：

［１］ 趙保路．茶多酚的抗氧化作用［Ｊ］．科學通報，２００２，１６（４７）： １２０６－１２１０．

［２］ 王瑩．茶多酚的抗氧化和抑菌活性及其增效劑［Ｊ］．生物學雜志，２００７，２４（５）：５４－５６．

［３］ 王紅芹．茶多酚和維生素Ｅ對肉仔雞抗氧化性能的影響［Ｊ］．安徽農(nóng)業(yè)科學，２０１２，４０（８）：４５８８－４５９４．

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［５］ 肖波，屈慧鴿，黃清榮，等．茶多酚與維生素Ｃ混合抑制幽門螺桿菌的研究［Ｊ］．茶葉科學，２００６，２６（４）：２９５－２９８．

［６］ 邢淑婕，劉開華．茶多酚與維生素Ｃ聯(lián)合抑制牛肉干沙門氏菌研究［Ｊ］．食品科技，２００８，３３（１１）：１１８－１１９，１４９．

［７］ 張微云，葉瑋．茶多酚與維生素Ｃ聯(lián)合應用抑制口腔產(chǎn)臭細菌產(chǎn)生揮發(fā)性硫化物的體外研究［Ｊ］．中華臨床醫(yī)師雜志，２０１１，５（１８）：５４６２－５４６４．

［８］ 李清釗，關維俊，劉英莉，等．茶多酚聯(lián)合維生素Ｃ對阿霉素腎毒性的保護作用［Ｊ］．工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病，２００３，２９（５）：２７３－２７５．

［９］ 蔣建平，陳洪，周曉媛．以茶多酚為主體的抗氧化劑聯(lián)用對冷卻肉保鮮作用的研究［Ｊ］．株洲工學院學報，２００５，１９（１）：１７－１９．

［１０］ ＣＥＭＥＫ Ｍ， Ｂ?譈Ｙ?譈ＫＢＥＮ Ａ， Ｂ?譈Ｙ?譈ＫＯＫＵＲＯＧＬＵ Ｍ Ｅ， ｅｔ ａｌ． Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ （α－ｔｏｃｏｐｈｅｒｏｌ）， ｓｅｌｅｎｉｕｍ ａｎｄ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ｐｌｕｓ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｉｎ ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ ｖｉｖｏ： Ａ ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］． Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０１０，９６（３）：１１３－１１８

［１１］ 萬敏，麥康森，馬洪明，等．硒和維生素Ｅ對皺紋盤鮑血清抗氧化酶活力的影響［Ｊ］．水生生物學報，２００６，２８（５）：４９６－５０３．

［１２］ ＹＯＳＥＦＩＮＡＳＡＢ Ａ，ＧＨＡＳＳＥＭＩ Ｆ， ＳＡＤＥＧＨＩ Ｈ． Ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｏｎ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｅｎｚｙｍｅｓ ｉｎ ｆｒｕｃｔｏｓｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｒａｔｓ［Ｊ］． Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０１２，７（５）：１２５８－１２９０．

［１３］ 鄭建仙．功能性食品［Ｍ］．北京：中國輕工業(yè)出版社，１９９９．１６４－１６６．

［１４］ 王岳飛，唐德松，樸宰日．茶多酚對荷瘤小鼠輻射損傷的影響［Ｊ］．中華放射醫(yī)學與防護雜志，２００４，２４（３）：２６３－２６４．

［１５］ 胡秀芳，毛建妹，蔣麗萍，等．茶多酚與其他抗氧化劑的協(xié)同作用［Ｊ］．茶葉，２０００，２６（２）：６６－６９．

［１６］ ＳＩＶＥＲＴＳＥＮ Ｔ， ＶＩＥ Ｅ， ＢＥＲＮＨＯＦＴ Ａ， ｅｔ ａｌ． Ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｐｌａｓｍａ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｗｅａｎｌｉｎｇ ｐｉｇｓ ｕｎｄｅｒ ｆｉｅｌｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｎｏｒｗｅｇｉａｎ ｐｉｇ ｈｅｒｄｓ［Ｊ］． Ａｃｔａ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｉａ Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉｃａ，２００７，４９：１－９．

［１７］ ＹＡＫＡＲＹＩＬＭＡＺ Ｆ， ＧＵＬＩＴＥＲ Ｓ， ＳＡＶＡＳ Ｂ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｎ ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ａｌｐｈａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｓｕｌｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ：Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａ ｐｉｌｏｔ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｊｏｕｒｎａｌ，２００７，３７（４）：２２９－２３５．

［１８］ ＫＵＮＥ Ｇ， ＷＡＴＳＯＮ Ｌ． Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｉｅｔａｒｙ ｍｉｃｒｏｎｕｔｒｉｅｎｔｓ ｆｏｌａｔｅ， ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ， ｖｉｔａｍｉｎｓ Ｂ６， Ｂ１２， Ｃ， Ｅ，ｓｅｌｅｎｉｕｍ， ａｎｄ ｌｙｃｏｐｅｎｅ［Ｊ］． Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ， ２００６，５６（１１）：１１－２１．

［１９］ 王岳飛，徐平，李磊，等．茶多酚與幾種天然抗氧化物質(zhì)的協(xié)同作用研究［Ｊ］．茶葉科學，２０１０，３０（２）：１０９－１１４．

１．６數(shù)據(jù)統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標準差表示。采用ＰＥＭＳ３．０《中國醫(yī)學百科全書·醫(yī)學統(tǒng)計學》統(tǒng)計軟件包（第三版）對試驗數(shù)據(jù)進行處理。

２結果與分析

２．１茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠體重的影響

由表１可見，在試驗期間，各組小鼠體重差異不顯著（Ｐ＞０．０５），表明茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠體重無顯著影響。

２．２茶多酚維Ｅ硒膠囊對造模前小鼠血清ＳＯＤ活力的影響

由表２可見，造模前各組小鼠血清中ＳＯＤ活力差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。表明茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠血清ＳＯＤ活力無顯著影響。

２．３茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠肝組織ＭＤＡ含量的影響

由表３可見，模型對照組小鼠肝組織中ＭＤＡ含量顯著（Ｐ＜０．０５）高于空白對照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的ＭＤＡ含量與模型對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）降低，茶多酚維Ｅ硒膠囊７５和１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組與模型對照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．４茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠肝組織ＳＯＤ活力的影響

由表４可見，模型對照組小鼠肝組織中ＳＯＤ活力顯著（Ｐ＜０．０５）低于空白對照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊各劑量組小鼠的ＳＯＤ活力與模型對照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．５茶多酚維Ｅ硒膠囊對小鼠肝組織ＧＳＨ－Ｐｘ活力的影響

由表５可見，模型對照組小鼠肝組織中ＧＳＨ－Ｐｘ活力顯著（Ｐ＜０．０５）低于空白對照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的ＧＳＨ－Ｐｘ活力與模型對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，茶多酚維Ｅ硒膠囊７５和１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組與模型對照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

３小結與討論

自由基是機體正常代謝過程中的產(chǎn)物，具有強氧化性，機體內(nèi)自由基過?？梢鹬|(zhì)過氧化及生物膜損壞，導致腫瘤及心血管疾病等［１３］。茶多酚具有吸收放射性物質(zhì)毒素的能力，口服和外用茶多酚能抵抗輻射產(chǎn)生的輕度放射病及治療血細胞減少癥。王岳飛等［１４］的研究表明，茶多酚對輻照損傷引起的ＮＩＨ小白鼠及荷瘤小鼠紅細胞與白細胞減少均有明顯抑制作用，表明茶多酚對輻照所致的血象損傷有明顯的防護作用?，F(xiàn)有研究表明，茶多酚和維生素Ｃ、維生素Ｅ之間都存在協(xié)同抗氧化作用［１，１５］。維生素Ｅ和硒都是人和動物體內(nèi)的必需營養(yǎng)素，除發(fā)揮重要的生理功能外，同時使用能互補、協(xié)同、增效［１６－１８］。

本試驗應用茶多酚、維生素Ｅ和硒的混合物對小鼠進行抗氧化研究，而肝臟作為機體的生化代謝中心也是對脂質(zhì)過氧化最敏感的器官，肝臟損傷與氧化應激有明顯關系，因此本研究選擇肝組織ＭＤＡ、ＳＯＤ和 ＧＳＨ－Ｐｘ作為研究指標，初步探討茶多酚維Ｅ硒膠囊的抗氧化活性。結果表明，茶多酚維Ｅ硒膠囊各劑量對試驗小鼠體重和造模前血清ＳＯＤ活力均無影響，提示茶多酚維Ｅ硒膠囊在７５～３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量范圍內(nèi)對小鼠無毒副作用。在本研究范圍內(nèi)，低、中濃度（７５、１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ）茶多酚維Ｅ硒膠囊劑量組與模型對照組相比沒有顯著增強小鼠的自由基清除能力，而高濃度（３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ）可明顯降低小鼠肝組織ＭＤＡ含量、升高ＧＳＨ－Ｐｘ活力。王岳飛等［１９］研究顯示，茶多酚與幾種天然抗氧化物質(zhì)的協(xié)同抗氧化作用與抗氧化物質(zhì)本身的抗氧化能力、抗氧化物的有效濃度等因素有關。抗氧化物之間的協(xié)同作用在抗氧化物本身有效濃度較低時協(xié)同作用也較低，隨著有效濃度增加，協(xié)同抗氧化作用增加，達到峰值后繼續(xù)增加有效濃度，協(xié)同作用減弱。協(xié)同作用的機理都是通過基于氧化還原電位差的偶聯(lián)氧化。偶聯(lián)作用一方面降低了直接反應的兩種物質(zhì)間的點位落差，使反應易于進行；另一方面，偶聯(lián)的抗氧化劑油水分配系數(shù)互為補充，在某一體系中合理分布，充分發(fā)揮每一種抗氧化劑的功能，因而茶多酚與多種抗氧化劑聯(lián)合應用后，其抗氧化效果大大增強［１５］，這也為茶多酚與其他抗氧化物配伍作為食品或保健品的原料或添加劑提供了理論依據(jù)。

４結論

本研究結果顯示，輻照后，模型對照組小鼠的肝組織ＳＯＤ活力和ＧＳＨ－Ｐｘ活力與空白對照組相比均顯著（Ｐ＜０．０５）降低、ＭＤＡ含量與空白對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，說明造模成功。茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的肝組織ＧＳＨ－Ｐｘ活力與模型對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，ＭＤＡ含量與模型對照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）降低。綜上所述，茶多酚維Ｅ硒膠囊對試驗動物模型具有良好的抗氧化活性。

參考文獻：

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［４］ 陳玉香，劉陽，周道瑋．茶多酚對豆油及豬油的抗氧化作用［Ｊ］．食品科學，２００１，２２（１１）：２７－２９．

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［７］ 張微云，葉瑋．茶多酚與維生素Ｃ聯(lián)合應用抑制口腔產(chǎn)臭細菌產(chǎn)生揮發(fā)性硫化物的體外研究［Ｊ］．中華臨床醫(yī)師雜志，２０１１，５（１８）：５４６２－５４６４．

［８］ 李清釗，關維俊，劉英莉，等．茶多酚聯(lián)合維生素Ｃ對阿霉素腎毒性的保護作用［Ｊ］．工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病，２００３，２９（５）：２７３－２７５．

［９］ 蔣建平，陳洪，周曉媛．以茶多酚為主體的抗氧化劑聯(lián)用對冷卻肉保鮮作用的研究［Ｊ］．株洲工學院學報，２００５，１９（１）：１７－１９．

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［１１］ 萬敏，麥康森，馬洪明，等．硒和維生素Ｅ對皺紋盤鮑血清抗氧化酶活力的影響［Ｊ］．水生生物學報，２００６，２８（５）：４９６－５０３．

［１２］ ＹＯＳＥＦＩＮＡＳＡＢ Ａ，ＧＨＡＳＳＥＭＩ Ｆ， ＳＡＤＥＧＨＩ Ｈ． Ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｏｎ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｅｎｚｙｍｅｓ ｉｎ ｆｒｕｃｔｏｓｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｒａｔｓ［Ｊ］． Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０１２，７（５）：１２５８－１２９０．

［１３］ 鄭建仙．功能性食品［Ｍ］．北京：中國輕工業(yè)出版社，１９９９．１６４－１６６．

［１４］ 王岳飛，唐德松，樸宰日．茶多酚對荷瘤小鼠輻射損傷的影響［Ｊ］．中華放射醫(yī)學與防護雜志，２００４，２４（３）：２６３－２６４．

［１５］ 胡秀芳，毛建妹，蔣麗萍，等．茶多酚與其他抗氧化劑的協(xié)同作用［Ｊ］．茶葉，２０００，２６（２）：６６－６９．

［１６］ ＳＩＶＥＲＴＳＥＮ Ｔ， ＶＩＥ Ｅ， ＢＥＲＮＨＯＦＴ Ａ， ｅｔ ａｌ． Ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｐｌａｓｍａ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｗｅａｎｌｉｎｇ ｐｉｇｓ ｕｎｄｅｒ ｆｉｅｌｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｎｏｒｗｅｇｉａｎ ｐｉｇ ｈｅｒｄｓ［Ｊ］． Ａｃｔａ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｉａ Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉｃａ，２００７，４９：１－９．

［１７］ ＹＡＫＡＲＹＩＬＭＡＺ Ｆ， ＧＵＬＩＴＥＲ Ｓ， ＳＡＶＡＳ Ｂ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｎ ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ａｌｐｈａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｓｕｌｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ：Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａ ｐｉｌｏｔ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｊｏｕｒｎａｌ，２００７，３７（４）：２２９－２３５．

［１８］ ＫＵＮＥ Ｇ， ＷＡＴＳＯＮ Ｌ． Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｉｅｔａｒｙ ｍｉｃｒｏｎｕｔｒｉｅｎｔｓ ｆｏｌａｔｅ， ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ， ｖｉｔａｍｉｎｓ Ｂ６， Ｂ１２， Ｃ， Ｅ，ｓｅｌｅｎｉｕｍ， ａｎｄ ｌｙｃｏｐｅｎｅ［Ｊ］． Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ， ２００６，５６（１１）：１１－２１．

［１９］ 王岳飛，徐平，李磊，等．茶多酚與幾種天然抗氧化物質(zhì)的協(xié)同作用研究［Ｊ］．茶葉科學，２０１０，３０（２）：１０９－１１４．