賢景春+陳小濱

摘要：采用乙醇浸提法研究了雞屎藤總生物堿提取及抗氧化性能?？疾炝艘掖紳舛?、料液比、浸提時(shí)間及溫度對(duì)總生物堿提取率的影響，并通過正交試驗(yàn)確定了最佳提取工藝參數(shù)，即乙醇濃度為40%，料液比為1 g ∶15 mL，浸提時(shí)間為90 min，溫度為60 ℃時(shí)，雞屎藤總生物堿提取效果最好，雞屎藤提取液對(duì)羥基自由基有一定的清除效果。

關(guān)鍵詞：雞屎藤；總生物堿；自由基清除

中圖分類號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1002-1302（2014）02-0209-02

收稿日期：2013-07-12

資金項(xiàng)目：福建省泉州市科技計(jì)劃（編號(hào)：2007N4）。

作者簡(jiǎn)介：賢景春（1955—），女，吉林鎮(zhèn)賚人，教授，從事配位化學(xué)與天然植物研究。E-mail：xjc01977@163.com。雞屎藤[Paederia scandens （Lour.） Merr.]為茜草科植物，別稱斑鳩飯、主屎藤、臭藤根、雞矢藤、臭藤、雞腳藤、解暑藤等，具有鎮(zhèn)痛、抗驚、解毒、消炎、治療無名腫毒等藥用價(jià)值，主要分布在印度、馬來西亞、日本、朝鮮、中國等地[1]。雞屎藤在我國南方地區(qū)分布較廣，尤其在閩南地區(qū)到處可見。雞屎藤全草及根均可入藥，在廣東、海南、閩南地區(qū)人們把雞屎藤視為美食，當(dāng)作滋補(bǔ)品來食用[2]。研究表明，雞屎藤含有生物堿，生物堿是自然界中廣泛存在的一類含氮堿性有機(jī)化合物，具有抗腫瘤、抗菌、抗病毒等生理活性[3]。目前關(guān)于雞屎藤生物堿提取的研究較少。筆者對(duì)雞屎藤總生物堿提取及抗氧化性進(jìn)行了研究，旨在為雞屎藤的開發(fā)應(yīng)用提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1儀器與試劑

可見分光光度計(jì)（上海元析儀器有限公司）、離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）、電子精密天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）。鹽酸水蘇堿（江蘇省南京市替斯艾么中藥研究所），雷氏鹽、碘化鉍鉀（天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所），30%雙氧水、無水乙醇（上海聯(lián)試化工試劑有限公司），七水合硫酸亞鐵（廣東省汕頭市西隴化工有限公司），水楊酸（天津市化工研究所），雞屎藤（福建省泉州市江濱公園）。

1.2方法

1.2.1特征性試驗(yàn)生物堿在酸性溶液中能與一些重金屬鹽類或分子量較大的復(fù)鹽生成沉淀。本試驗(yàn)用碘化汞鉀、碘化鉍鉀、碘-碘化鉀溶液鑒定提取物中的生物堿[4]。

1.2.2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線 分別稱取1.00、2.00、4.00、6.00、8.00 mL 濃度為0.2 mg/mL的鹽酸水蘇堿置于25 mL容量瓶中，各加入新配制的2%雷氏鹽3.00 mL，冷卻后用0.1 mol/L鹽酸定容，離心后在520 nm處測(cè)定吸光度。用吸光度對(duì)鹽酸水蘇堿濃度作圖得圖1，回歸方程為ΔD=0.470 3C+0.004 8，r=0.998 98。式中，ΔD=D0-D，D0為空白液的吸光度，D為鹽酸水蘇堿溶液的吸光度[5]。

1.2.3總生物堿含量的測(cè)定稱取雞屎藤粉末1.000 0 g，洗滌、烘干、粉碎、過60目篩，用乙醇浸提，抽濾，將濾液用 0.1 mol/L 鹽酸定容于50 mL容量瓶中，取10 mL雞屎藤溶液置于25 mL容量瓶中，加入新配制的2%雷氏鹽 3.00 mL，冷卻，用鹽酸定容，混勻，離心后在520 nm處測(cè)吸光度[6]。

1.3提取參數(shù)優(yōu)化

影響生物堿提取的因素較多，主要有溶劑濃度、料液比、提取時(shí)間、溫度。本研究選取這4個(gè)因素進(jìn)行正交試驗(yàn)，以獲取最佳提取工藝參數(shù)[7-8]。

1.4提取物抗氧化性測(cè)試

依次吸取8.8 mmol/L雙氧水1 mL及9 mmol/L硫酸亞鐵1 mL，混合均勻后加入9 mmol/L水楊酸乙醇溶液1 mL，用蒸餾水定容至10 mL。在37 ℃恒溫水中反應(yīng)15min，冷卻后在510 nm波長(zhǎng)下測(cè)其吸光度，以蒸餾水為對(duì)照。分別吸取雞屎藤提取液 2.00、3.00、4.00、5.00、6.00 mL加入測(cè)定體系測(cè)其吸光度[9]。清除率計(jì)算方法見公式（1）。

2結(jié)果與分析

2.1生物堿鑒定

取雞屎藤提取液數(shù)滴滴于表面皿上，加入適量生物堿沉淀劑，指示劑變化情況如表1所示，表明雞屎藤浸提液中含有生物堿[4]。

2.2濃度對(duì)提取率的影響

2.3料液比對(duì)提取率的影響

在乙醇濃度為40%，浸提溫度為60 ℃，浸提時(shí)間為 60 min 條件下，不同料液比（1 ∶5、1 ∶10、1 ∶15、1 ∶20、1 ∶25、1 ∶30，g ∶mL）下雞屎藤總生物堿提取率如圖3所示。隨著料液比的不斷增大，提取率增加，當(dāng)料液比為1 g ∶20 mL時(shí)提取率最大，繼續(xù)增大料液比則提取率降低。

2.4浸提時(shí)間對(duì)提取率的影響

在乙醇濃度為40%，料液比為1 g ∶20 mL，浸提溫度為60 ℃的條件下，不同浸提時(shí)間（30、45、60、75、90、105、120 min）下雞屎藤總生物堿提取率如圖4所示。隨著提取時(shí)間延長(zhǎng)，提取率增大，當(dāng)提取時(shí)間為90 min時(shí)，提取率最高。繼續(xù)延長(zhǎng)提取時(shí)間，提取率有下降趨勢(shì)。

2.5溫度對(duì)提取率的影響

在乙醇濃度為40%，料液比為1 g ∶20 mL，浸提時(shí)間為 90 min 條件下，不同溫度（40、50、60、70、80 ℃）對(duì)提取率的影響如圖5所示。當(dāng)溫度低于60 ℃時(shí)，提取率隨溫度的升高明顯增大，當(dāng)溫度超過60 ℃時(shí)，提取率下降。

2.6正交試驗(yàn)

正交試驗(yàn)各因素水平及結(jié)果見表2、表3。從表3可看出，4個(gè)因素對(duì)雞屎藤總生物堿提取效果影響由大到小依次為D>A>B>C，即溫度對(duì)總生物堿提取影響最大，其次是乙醇濃度、料液比，時(shí)間對(duì)生物堿提取率影響最小。

2.7對(duì)羥基自由基的清除作用

從圖6可看出，雞屎藤提取液對(duì)·OH有一定的清除作用，清除效果與總生物堿濃度呈正相關(guān)。

3結(jié)論

本研究采用正交試驗(yàn)法得到雞屎藤中總生物堿的最佳提取工藝參數(shù)，即乙醇濃度為40%，料液比為1 g ∶15 mL，浸提時(shí)間為90min，溫度為60℃時(shí)，雞屎藤總生物堿提取效果最

好。雞屎藤提取液對(duì)羥基自由基有一定的清除效果，當(dāng)總生物堿的濃度為0.35 mg/mL時(shí)，對(duì)·OH的清除率達(dá)46.80%。

參考文獻(xiàn)：

[1]馬養(yǎng)民，毛遠(yuǎn)，傅建熙. 雞屎藤地上部分化學(xué)成分的初步研究[J]. 陜西林業(yè)科技，1997，4（4）：1-4.

[2]戴良富，吳嬌. 黎藥雞屎藤的化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2009，5（2）：117-119.

[3]嚴(yán)淑，劉寶瑞. 七種天然生物堿抗腫瘤作用研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2010，18（6）：1227-1230.

[4]秦貽強(qiáng)，鄧俊剛，鄧立東. 白飯樹總生物堿的提取分離與鑒定[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2012，8（7）：32-33.

[5]張師愚，柴士偉，鞏長(zhǎng)芹，等. 益母草中生物堿的提取與益母草膜劑的制備[J]. 中國中醫(yī)急癥，2007，16（8）：980-981.

[6]莫肖云，黃麗秀，田芳年，等. 超聲波提取兩面針中的總堿[J]. 中國野生植物資源，2009，28（5）：58-59，62.

[7]楊海濤，李志州. 苦豆子總生物堿提取工藝的優(yōu)化研究[J]. 中國調(diào)味品，2007（10）：41-43.

[8]王如平，石雪萍，張衛(wèi)明，等. 花椒總生物堿提取條件研究[J]. 食品科學(xué)，2008，29（10）：273-276.

[9]陳海光，曾慶孝. 荷葉功能成分的提取及其對(duì)自由基清除作用的研究[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)，2001，10（10）：34-38.endprint

摘要：采用乙醇浸提法研究了雞屎藤總生物堿提取及抗氧化性能?？疾炝艘掖紳舛?、料液比、浸提時(shí)間及溫度對(duì)總生物堿提取率的影響，并通過正交試驗(yàn)確定了最佳提取工藝參數(shù)，即乙醇濃度為40%，料液比為1 g ∶15 mL，浸提時(shí)間為90 min，溫度為60 ℃時(shí)，雞屎藤總生物堿提取效果最好，雞屎藤提取液對(duì)羥基自由基有一定的清除效果。

關(guān)鍵詞：雞屎藤；總生物堿；自由基清除

中圖分類號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1002-1302（2014）02-0209-02

收稿日期：2013-07-12

資金項(xiàng)目：福建省泉州市科技計(jì)劃（編號(hào)：2007N4）。

作者簡(jiǎn)介：賢景春（1955—），女，吉林鎮(zhèn)賚人，教授，從事配位化學(xué)與天然植物研究。E-mail：xjc01977@163.com。雞屎藤[Paederia scandens （Lour.） Merr.]為茜草科植物，別稱斑鳩飯、主屎藤、臭藤根、雞矢藤、臭藤、雞腳藤、解暑藤等，具有鎮(zhèn)痛、抗驚、解毒、消炎、治療無名腫毒等藥用價(jià)值，主要分布在印度、馬來西亞、日本、朝鮮、中國等地[1]。雞屎藤在我國南方地區(qū)分布較廣，尤其在閩南地區(qū)到處可見。雞屎藤全草及根均可入藥，在廣東、海南、閩南地區(qū)人們把雞屎藤視為美食，當(dāng)作滋補(bǔ)品來食用[2]。研究表明，雞屎藤含有生物堿，生物堿是自然界中廣泛存在的一類含氮堿性有機(jī)化合物，具有抗腫瘤、抗菌、抗病毒等生理活性[3]。目前關(guān)于雞屎藤生物堿提取的研究較少。筆者對(duì)雞屎藤總生物堿提取及抗氧化性進(jìn)行了研究，旨在為雞屎藤的開發(fā)應(yīng)用提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1儀器與試劑

可見分光光度計(jì)（上海元析儀器有限公司）、離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）、電子精密天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）。鹽酸水蘇堿（江蘇省南京市替斯艾么中藥研究所），雷氏鹽、碘化鉍鉀（天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所），30%雙氧水、無水乙醇（上海聯(lián)試化工試劑有限公司），七水合硫酸亞鐵（廣東省汕頭市西隴化工有限公司），水楊酸（天津市化工研究所），雞屎藤（福建省泉州市江濱公園）。

1.2方法

1.2.1特征性試驗(yàn)生物堿在酸性溶液中能與一些重金屬鹽類或分子量較大的復(fù)鹽生成沉淀。本試驗(yàn)用碘化汞鉀、碘化鉍鉀、碘-碘化鉀溶液鑒定提取物中的生物堿[4]。

1.2.2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線 分別稱取1.00、2.00、4.00、6.00、8.00 mL 濃度為0.2 mg/mL的鹽酸水蘇堿置于25 mL容量瓶中，各加入新配制的2%雷氏鹽3.00 mL，冷卻后用0.1 mol/L鹽酸定容，離心后在520 nm處測(cè)定吸光度。用吸光度對(duì)鹽酸水蘇堿濃度作圖得圖1，回歸方程為ΔD=0.470 3C+0.004 8，r=0.998 98。式中，ΔD=D0-D，D0為空白液的吸光度，D為鹽酸水蘇堿溶液的吸光度[5]。

1.2.3總生物堿含量的測(cè)定稱取雞屎藤粉末1.000 0 g，洗滌、烘干、粉碎、過60目篩，用乙醇浸提，抽濾，將濾液用 0.1 mol/L 鹽酸定容于50 mL容量瓶中，取10 mL雞屎藤溶液置于25 mL容量瓶中，加入新配制的2%雷氏鹽 3.00 mL，冷卻，用鹽酸定容，混勻，離心后在520 nm處測(cè)吸光度[6]。

1.3提取參數(shù)優(yōu)化

影響生物堿提取的因素較多，主要有溶劑濃度、料液比、提取時(shí)間、溫度。本研究選取這4個(gè)因素進(jìn)行正交試驗(yàn)，以獲取最佳提取工藝參數(shù)[7-8]。

1.4提取物抗氧化性測(cè)試

依次吸取8.8 mmol/L雙氧水1 mL及9 mmol/L硫酸亞鐵1 mL，混合均勻后加入9 mmol/L水楊酸乙醇溶液1 mL，用蒸餾水定容至10 mL。在37 ℃恒溫水中反應(yīng)15min，冷卻后在510 nm波長(zhǎng)下測(cè)其吸光度，以蒸餾水為對(duì)照。分別吸取雞屎藤提取液 2.00、3.00、4.00、5.00、6.00 mL加入測(cè)定體系測(cè)其吸光度[9]。清除率計(jì)算方法見公式（1）。

2結(jié)果與分析

2.1生物堿鑒定

取雞屎藤提取液數(shù)滴滴于表面皿上，加入適量生物堿沉淀劑，指示劑變化情況如表1所示，表明雞屎藤浸提液中含有生物堿[4]。

2.2濃度對(duì)提取率的影響

2.3料液比對(duì)提取率的影響

在乙醇濃度為40%，浸提溫度為60 ℃，浸提時(shí)間為 60 min 條件下，不同料液比（1 ∶5、1 ∶10、1 ∶15、1 ∶20、1 ∶25、1 ∶30，g ∶mL）下雞屎藤總生物堿提取率如圖3所示。隨著料液比的不斷增大，提取率增加，當(dāng)料液比為1 g ∶20 mL時(shí)提取率最大，繼續(xù)增大料液比則提取率降低。

2.4浸提時(shí)間對(duì)提取率的影響

在乙醇濃度為40%，料液比為1 g ∶20 mL，浸提溫度為60 ℃的條件下，不同浸提時(shí)間（30、45、60、75、90、105、120 min）下雞屎藤總生物堿提取率如圖4所示。隨著提取時(shí)間延長(zhǎng)，提取率增大，當(dāng)提取時(shí)間為90 min時(shí)，提取率最高。繼續(xù)延長(zhǎng)提取時(shí)間，提取率有下降趨勢(shì)。

2.5溫度對(duì)提取率的影響

在乙醇濃度為40%，料液比為1 g ∶20 mL，浸提時(shí)間為 90 min 條件下，不同溫度（40、50、60、70、80 ℃）對(duì)提取率的影響如圖5所示。當(dāng)溫度低于60 ℃時(shí)，提取率隨溫度的升高明顯增大，當(dāng)溫度超過60 ℃時(shí)，提取率下降。

2.6正交試驗(yàn)

正交試驗(yàn)各因素水平及結(jié)果見表2、表3。從表3可看出，4個(gè)因素對(duì)雞屎藤總生物堿提取效果影響由大到小依次為D>A>B>C，即溫度對(duì)總生物堿提取影響最大，其次是乙醇濃度、料液比，時(shí)間對(duì)生物堿提取率影響最小。

2.7對(duì)羥基自由基的清除作用

從圖6可看出，雞屎藤提取液對(duì)·OH有一定的清除作用，清除效果與總生物堿濃度呈正相關(guān)。

3結(jié)論

本研究采用正交試驗(yàn)法得到雞屎藤中總生物堿的最佳提取工藝參數(shù)，即乙醇濃度為40%，料液比為1 g ∶15 mL，浸提時(shí)間為90min，溫度為60℃時(shí)，雞屎藤總生物堿提取效果最

好。雞屎藤提取液對(duì)羥基自由基有一定的清除效果，當(dāng)總生物堿的濃度為0.35 mg/mL時(shí)，對(duì)·OH的清除率達(dá)46.80%。

參考文獻(xiàn)：

[1]馬養(yǎng)民，毛遠(yuǎn)，傅建熙. 雞屎藤地上部分化學(xué)成分的初步研究[J]. 陜西林業(yè)科技，1997，4（4）：1-4.

[2]戴良富，吳嬌. 黎藥雞屎藤的化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2009，5（2）：117-119.

[3]嚴(yán)淑，劉寶瑞. 七種天然生物堿抗腫瘤作用研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2010，18（6）：1227-1230.

[4]秦貽強(qiáng)，鄧俊剛，鄧立東. 白飯樹總生物堿的提取分離與鑒定[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2012，8（7）：32-33.

[5]張師愚，柴士偉，鞏長(zhǎng)芹，等. 益母草中生物堿的提取與益母草膜劑的制備[J]. 中國中醫(yī)急癥，2007，16（8）：980-981.

[6]莫肖云，黃麗秀，田芳年，等. 超聲波提取兩面針中的總堿[J]. 中國野生植物資源，2009，28（5）：58-59，62.

[7]楊海濤，李志州. 苦豆子總生物堿提取工藝的優(yōu)化研究[J]. 中國調(diào)味品，2007（10）：41-43.

[8]王如平，石雪萍，張衛(wèi)明，等. 花椒總生物堿提取條件研究[J]. 食品科學(xué)，2008，29（10）：273-276.

[9]陳海光，曾慶孝. 荷葉功能成分的提取及其對(duì)自由基清除作用的研究[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)，2001，10（10）：34-38.endprint

摘要：采用乙醇浸提法研究了雞屎藤總生物堿提取及抗氧化性能?？疾炝艘掖紳舛?、料液比、浸提時(shí)間及溫度對(duì)總生物堿提取率的影響，并通過正交試驗(yàn)確定了最佳提取工藝參數(shù)，即乙醇濃度為40%，料液比為1 g ∶15 mL，浸提時(shí)間為90 min，溫度為60 ℃時(shí)，雞屎藤總生物堿提取效果最好，雞屎藤提取液對(duì)羥基自由基有一定的清除效果。

關(guān)鍵詞：雞屎藤；總生物堿；自由基清除

中圖分類號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1002-1302（2014）02-0209-02

收稿日期：2013-07-12

資金項(xiàng)目：福建省泉州市科技計(jì)劃（編號(hào)：2007N4）。

作者簡(jiǎn)介：賢景春（1955—），女，吉林鎮(zhèn)賚人，教授，從事配位化學(xué)與天然植物研究。E-mail：xjc01977@163.com。雞屎藤[Paederia scandens （Lour.） Merr.]為茜草科植物，別稱斑鳩飯、主屎藤、臭藤根、雞矢藤、臭藤、雞腳藤、解暑藤等，具有鎮(zhèn)痛、抗驚、解毒、消炎、治療無名腫毒等藥用價(jià)值，主要分布在印度、馬來西亞、日本、朝鮮、中國等地[1]。雞屎藤在我國南方地區(qū)分布較廣，尤其在閩南地區(qū)到處可見。雞屎藤全草及根均可入藥，在廣東、海南、閩南地區(qū)人們把雞屎藤視為美食，當(dāng)作滋補(bǔ)品來食用[2]。研究表明，雞屎藤含有生物堿，生物堿是自然界中廣泛存在的一類含氮堿性有機(jī)化合物，具有抗腫瘤、抗菌、抗病毒等生理活性[3]。目前關(guān)于雞屎藤生物堿提取的研究較少。筆者對(duì)雞屎藤總生物堿提取及抗氧化性進(jìn)行了研究，旨在為雞屎藤的開發(fā)應(yīng)用提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1儀器與試劑

可見分光光度計(jì)（上海元析儀器有限公司）、離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）、電子精密天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）。鹽酸水蘇堿（江蘇省南京市替斯艾么中藥研究所），雷氏鹽、碘化鉍鉀（天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所），30%雙氧水、無水乙醇（上海聯(lián)試化工試劑有限公司），七水合硫酸亞鐵（廣東省汕頭市西隴化工有限公司），水楊酸（天津市化工研究所），雞屎藤（福建省泉州市江濱公園）。

1.2方法

1.2.1特征性試驗(yàn)生物堿在酸性溶液中能與一些重金屬鹽類或分子量較大的復(fù)鹽生成沉淀。本試驗(yàn)用碘化汞鉀、碘化鉍鉀、碘-碘化鉀溶液鑒定提取物中的生物堿[4]。

1.2.2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線 分別稱取1.00、2.00、4.00、6.00、8.00 mL 濃度為0.2 mg/mL的鹽酸水蘇堿置于25 mL容量瓶中，各加入新配制的2%雷氏鹽3.00 mL，冷卻后用0.1 mol/L鹽酸定容，離心后在520 nm處測(cè)定吸光度。用吸光度對(duì)鹽酸水蘇堿濃度作圖得圖1，回歸方程為ΔD=0.470 3C+0.004 8，r=0.998 98。式中，ΔD=D0-D，D0為空白液的吸光度，D為鹽酸水蘇堿溶液的吸光度[5]。

1.2.3總生物堿含量的測(cè)定稱取雞屎藤粉末1.000 0 g，洗滌、烘干、粉碎、過60目篩，用乙醇浸提，抽濾，將濾液用 0.1 mol/L 鹽酸定容于50 mL容量瓶中，取10 mL雞屎藤溶液置于25 mL容量瓶中，加入新配制的2%雷氏鹽 3.00 mL，冷卻，用鹽酸定容，混勻，離心后在520 nm處測(cè)吸光度[6]。

1.3提取參數(shù)優(yōu)化

影響生物堿提取的因素較多，主要有溶劑濃度、料液比、提取時(shí)間、溫度。本研究選取這4個(gè)因素進(jìn)行正交試驗(yàn)，以獲取最佳提取工藝參數(shù)[7-8]。

1.4提取物抗氧化性測(cè)試

依次吸取8.8 mmol/L雙氧水1 mL及9 mmol/L硫酸亞鐵1 mL，混合均勻后加入9 mmol/L水楊酸乙醇溶液1 mL，用蒸餾水定容至10 mL。在37 ℃恒溫水中反應(yīng)15min，冷卻后在510 nm波長(zhǎng)下測(cè)其吸光度，以蒸餾水為對(duì)照。分別吸取雞屎藤提取液 2.00、3.00、4.00、5.00、6.00 mL加入測(cè)定體系測(cè)其吸光度[9]。清除率計(jì)算方法見公式（1）。

2結(jié)果與分析

2.1生物堿鑒定

取雞屎藤提取液數(shù)滴滴于表面皿上，加入適量生物堿沉淀劑，指示劑變化情況如表1所示，表明雞屎藤浸提液中含有生物堿[4]。

2.2濃度對(duì)提取率的影響

2.3料液比對(duì)提取率的影響

在乙醇濃度為40%，浸提溫度為60 ℃，浸提時(shí)間為 60 min 條件下，不同料液比（1 ∶5、1 ∶10、1 ∶15、1 ∶20、1 ∶25、1 ∶30，g ∶mL）下雞屎藤總生物堿提取率如圖3所示。隨著料液比的不斷增大，提取率增加，當(dāng)料液比為1 g ∶20 mL時(shí)提取率最大，繼續(xù)增大料液比則提取率降低。

2.4浸提時(shí)間對(duì)提取率的影響

在乙醇濃度為40%，料液比為1 g ∶20 mL，浸提溫度為60 ℃的條件下，不同浸提時(shí)間（30、45、60、75、90、105、120 min）下雞屎藤總生物堿提取率如圖4所示。隨著提取時(shí)間延長(zhǎng)，提取率增大，當(dāng)提取時(shí)間為90 min時(shí)，提取率最高。繼續(xù)延長(zhǎng)提取時(shí)間，提取率有下降趨勢(shì)。

2.5溫度對(duì)提取率的影響

在乙醇濃度為40%，料液比為1 g ∶20 mL，浸提時(shí)間為 90 min 條件下，不同溫度（40、50、60、70、80 ℃）對(duì)提取率的影響如圖5所示。當(dāng)溫度低于60 ℃時(shí)，提取率隨溫度的升高明顯增大，當(dāng)溫度超過60 ℃時(shí)，提取率下降。

2.6正交試驗(yàn)

正交試驗(yàn)各因素水平及結(jié)果見表2、表3。從表3可看出，4個(gè)因素對(duì)雞屎藤總生物堿提取效果影響由大到小依次為D>A>B>C，即溫度對(duì)總生物堿提取影響最大，其次是乙醇濃度、料液比，時(shí)間對(duì)生物堿提取率影響最小。

2.7對(duì)羥基自由基的清除作用

從圖6可看出，雞屎藤提取液對(duì)·OH有一定的清除作用，清除效果與總生物堿濃度呈正相關(guān)。

3結(jié)論

本研究采用正交試驗(yàn)法得到雞屎藤中總生物堿的最佳提取工藝參數(shù)，即乙醇濃度為40%，料液比為1 g ∶15 mL，浸提時(shí)間為90min，溫度為60℃時(shí)，雞屎藤總生物堿提取效果最

好。雞屎藤提取液對(duì)羥基自由基有一定的清除效果，當(dāng)總生物堿的濃度為0.35 mg/mL時(shí)，對(duì)·OH的清除率達(dá)46.80%。

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