李曉燕

（河南省商丘市第一人民醫(yī)院，商丘476000）

HPLC法測定十一味養(yǎng)血消痛丸中丹參酮ⅡA的含量

李曉燕

（河南省商丘市第一人民醫(yī)院，商丘476000）

目的建立HPLC法測定十一味養(yǎng)血消痛丸中丹參酮ⅡA含量的方法。方法采用Eclipse XDB-C18色譜柱，甲醇—水（75：25）為流動相；流速1.0ml·min-1；檢測波長270nm。結(jié)果丹參酮ⅡA在34.04～238.28μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均回收率為98.05%，RSD=1.27%（n=6）。結(jié)論本方法操作簡便，專屬性強，結(jié)果準確，可用于十一味養(yǎng)血消痛丸的質(zhì)量控制。

丹參酮ⅡA；高效液相色譜法；十一味養(yǎng)血消痛丸；含量測定

十一味養(yǎng)血消痛丸是由丹參、白芍、香附、秦艽、桂枝、川牛膝等藥材加工制成的醫(yī)院制劑，具有活血行氣，溫經(jīng)通絡，消腫止痛之功效，用于骨質(zhì)增生引起的關(guān)節(jié)疼痛腫脹，活動受限，椎間盤突出，近關(guān)節(jié)損傷后遺癥。［1］現(xiàn)行質(zhì)量標準中未收載含量測定項目，不能有效地控制藥品質(zhì)量。丹參為方中主藥，丹參酮ⅡA是丹參的主要有效成分［2］，本文以丹參酮ⅡA為指標成分，建立了十一味養(yǎng)血消痛丸中丹參酮ⅡA的高效液相色譜測定法，為該制劑的質(zhì)量控制提供了客觀的含量評價方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器Agilent 1260型高效液相色譜儀，AUW-220D電子分析天平，5210DT超聲處理器。

1.2 試藥丹參酮ⅡA對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110766-200518）；甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑為分析純。十一味養(yǎng)血消痛丸（由柘城縣人民醫(yī)院提供，批號：130121、130326、130622）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件色譜柱：Eclipse XDB-C18色譜柱（4.6 ×150mm）；流動相：甲醇—水（75：25）為流動相［3］；流速1.0ml·min-1；檢測波長270nm；進樣量10μl；理論板數(shù)應不低于2000。

2.2 線性關(guān)系考察取丹參酮ⅡA對照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml置50 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。按照“2.1”項色譜條件，分別進樣2、4、6、8、10、12、14μl，記錄丹參酮ⅡA峰面積值，以峰面積積分值（Y）對對照品進樣量（X）進行線性回歸，得回歸方程：Y=196.45X+0.0778 r= 0.9999。結(jié)果表明，丹參酮ⅡA對照品進樣量在34.04～238.28μg范圍內(nèi)與峰面積值呈良好的線性關(guān)系。

2.3 對照品溶液的制備取丹參酮ⅡA對照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液，精密量取10ml，置50 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.4 供試品溶液及陰性對照溶液的制備取本品約4.0g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。另取缺丹參的其他味藥按處方工藝制成陰性制劑，按上述方法制備陰性對照溶液。

2.5 干擾試驗取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各10μl，按照“2.1”項色譜條件，分別進樣測定，記錄色譜圖，結(jié)果見圖1。

2.6 精密度試驗取同一對照品溶液，重復進樣5次，每次10μl，記錄峰面積，RSD=0.93%（n=5），表明精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗取同一對照品溶液，分別在0、1、2、3、4、5、6、8、10h，進樣測定，RSD=0.88%，供試品溶液在10小時內(nèi)峰面積基本穩(wěn)定。

圖高效液相色譜圖

2.8 加樣回收率試驗稱取6份已知含量為0.08mg／g的樣品約2.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加入對照品儲備液2.00ml，按照“2.4”項下方法制備供試品溶液，按照“2.1”項色譜條件，分別進樣測定，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率試驗結(jié)果

2.9 樣品測定取3批樣品，按“2.4”項下方法制備供試液，各進樣10μl，按外標法計算丹參酮ⅡA的含量，結(jié)果見表2。

表2 3批樣品中丹參酮ⅡA的含量

3 討論

丹參酮ⅡA是丹參的有效成分，本文建立的高效液相色譜法測定丹參酮ⅡA的含量，該方法操作簡便，雜質(zhì)對測定無干擾，重復性好，對控制該制劑的內(nèi)在質(zhì)量具有重要意義。

本文參考有關(guān)文獻［3-6］，針對本制劑的制備工藝及輔料的特性，通過試驗比較了回流、超聲、索式提取等提取方法，結(jié)果表明超聲處理30分鐘提取較為完全，且操作簡便快捷，故采用超聲提取。

［1］河南省食品藥品監(jiān)督管理局.河南省醫(yī)療機構(gòu)制劑標準［S］.2004.

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：70-71.

［3］王湛.HPLC測定調(diào)經(jīng)活血片中丹參的含量［J］.中外醫(yī)學研究，2010，8（22）：68-69.

［4］嚴紅，高楊，郭偉，等.不同產(chǎn)地丹參藥材中丹參酮ⅡA及丹參素的含量比較［J］.天津藥學，2003，15（3）：10-12.

［5］于百青，楊敏，孫鵬云.高效液相色譜法測定心舒丸中丹參酮ⅡA含量［J］.中國藥業(yè)，2012，21（13）：36-37.

［6］郭志鵬，郭迎霞.HPLC法測定通神復腦丸中丹參酮ⅡA的含量［J］.中國藥師，2009，12（11）：1666-1667.

De t e r mina tio n o f Tan s hino neⅡAin Shiyiw ei Yang x ue Xiao t o ng Pill b y HPL C

Li xiaoyan
（Shangqiu First People’s Hospital,Shangqiu,Henan Province,476000,China）

ObjectiveTo establish a HPLC method to determinate TanshinoneⅡAin Shixivei Yangwue Xiaotong pill.MethodsThe chromatographic sxstem consisted of C18 column，using methanol-vaters（75：25）as mobile phase.The content vas detected at a vaveleng of 270 nm，the flov rate vas 1.0ml·min-1.ResultsThe TanshinoneⅡAhad a good linear relation in the range of 34.04～238.28μg（r=0.9999），the average recoverx vas 98.05%and RSD=1.27%（n=6）.ConclusionThe established method vas accurate，sensitive and simple.It could be used for qualitx control of Shixivei Yangwue Xiaotong pill.

TanshinoneⅡA；HPLC；Shixivei Yangwue Xiaotong pill；Determination

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.02.101

：1672-2779（2014）-02-0148-02

??楊 杰 本文校對：劉曉云

2013-10-14）