劉丙營　孟翠麗　李曼　齊鳳杰

【摘要】目的研究趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在乳腺癌中的表達(dá)方式，并探討其與乳腺癌的臨床病理特征的關(guān)系。方法采用免疫組化技術(shù)檢測趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在40例乳腺癌細(xì)胞組織和40例正常乳腺細(xì)胞中的表達(dá)，并分析其表達(dá)與患者年齡、腫瘤大小、分化程度與淋巴轉(zhuǎn)移的臨床特征關(guān)系。結(jié)果趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在乳腺癌細(xì)胞中表達(dá)率為73.7%、62.5%明顯高于正常乳腺細(xì)胞23.6%、20.3%，兩組數(shù)據(jù)具有明顯統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），且CXCL12、CXCR4在乳腺癌組織中表達(dá)與患者年齡、腫瘤大小以及分化程度無關(guān)（P>0.05），與淋巴轉(zhuǎn)移有密切相關(guān)（P<0.01）。結(jié)論CXCL12、CXCR4在乳腺癌組織中有較高表達(dá)率，抑制CXCL12、CXCR4在乳腺癌組織中的表達(dá)可為臨床阻斷癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移提供重要途徑。

【關(guān)鍵詞】乳腺癌；CXCL12和CXCR4；表達(dá)和意義

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.04.076文章編號：1004-7484（2014）-04-1876-01趨化因子受體是CXCR4是趨化因子CXCL12的唯一受體，并參與體內(nèi)多種病理和生理過程，趨化因子CXCL12以及受體CXCR4在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程有著重要作用[1]。最近研究發(fā)現(xiàn)，CXCL12、CXCR4在多種惡性腫瘤中表達(dá)水平明顯升高，乳腺癌作為是女性最嚴(yán)重的惡性腫瘤疾病之一，其在乳腺癌細(xì)胞中發(fā)揮重要作用。本研究通過檢測CXCL12、CXCR4在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)和臨床病理特征關(guān)系，探討其在乳腺癌組織轉(zhuǎn)移的作用，從而為臨床阻斷癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移提供重要依據(jù)。1資料與方法

1.1臨床資料選取我院2010年2月——2013年2月分期間乳腺手術(shù)切除標(biāo)本80例，在每例乳腺癌標(biāo)本中取其腫瘤組織與正常乳腺組織分別作為觀察組和對照組。80例乳腺標(biāo)本均為女性，年齡38-65歲，平均年齡為46.3歲，根據(jù)組織分化程度分別為Ⅰ級15例，Ⅱ級48例，Ⅲ級17例，其中浸潤性導(dǎo)管癌39例，浸潤性小葉癌24例，髓樣癌7例，清潤性微乳頭狀癌5例，小管癌3例，粘液性癌2例；有淋巴轉(zhuǎn)移48例，無淋巴轉(zhuǎn)移32例；全部標(biāo)本術(shù)前無放療與化療處理，均用甲醛固定以及石蠟包埋。

1.2方法將石蠟包埋的組織切成4μm厚的切片，經(jīng)二甲苯脫蠟和梯度酒精水化后滴加3%的H2O2阻斷內(nèi)源性過氧化酶，孵育10min，然后用三羥甲基氨基甲烷緩沖液（trisbuffered saline，TBS）洗滌3次，置于95℃-100℃、pH6.0的檸檬酸緩沖液煮沸20min，再用TBS洗滌3次，滴加一抗（CXCR4 1：400）濕盒中37℃下孵育60min；TBS洗滌3次，滴加E-VISIONTM反應(yīng)液，50μl/片，37℃下孵育30min；TBS洗滌3次，0.4%色源底物溶液3，3-二氨基聯(lián)苯胺（3，3-diaminobenzidine，DAB）+0.3%H2O2孵育，光鏡下觀察到棕黃色反應(yīng)后終止。最后用流水洗，蘇木素復(fù)染，遞增梯度酒精脫水，二甲苯透明，常規(guī)樹脂封片[2]。

1.3療效判定CXCL12、CXCR4半定量評分標(biāo)準(zhǔn)參照Shimizu等方法，按陽性強度和面積分別記為0、1、2、3分，根據(jù)兩項記分之和判斷其結(jié)果：<3分為（-），3分為（+），4分為（++），5-6分為（+++）[3]。

1.4統(tǒng)計學(xué)意義采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料以χ±s表示，計數(shù)資料中的兩因素構(gòu)成比使用x2檢驗分析，相關(guān)性分析用非參數(shù)Spearman相關(guān)檢驗。當(dāng)兩組數(shù)據(jù)統(tǒng)計差異P<0.05時，說明具有統(tǒng)計學(xué)意義[4]。2結(jié)果

2.1CXCL12和CXCR4在乳腺細(xì)胞中的表達(dá)趨化因子CXCL12及其受體CXCR4主要在腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)，免疫化組織呈棕黃色，且CXCL12和CXCR4在乳腺癌細(xì)胞中表達(dá)率分別為73.7%、62.5%明顯高于正常乳腺細(xì)胞23.6%、20.3%，兩組數(shù)據(jù)有明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.01），統(tǒng)計有意義。

2.2CXCL12和CXCR4與臨床病理的關(guān)系趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在乳腺癌細(xì)胞的表達(dá)與患者的年齡、腫瘤大小和分化程度無關(guān)，根據(jù)統(tǒng)計學(xué)分析處理（P>0.05），無統(tǒng)計學(xué)意義。而其與淋巴轉(zhuǎn)移有密切聯(lián)系，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析處理（P<0.01），具有統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。