鄭大勇，董少婷，陳錦章，呂成偉，黃振華，黃娜，石敏

(南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，廣東廣州 510515）

鼻咽癌組織中CCR7和CXCR4的表達(dá)及其臨床意義

鄭大勇，董少婷，陳錦章，呂成偉，黃振華，黃娜，石敏

(南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，廣東廣州 510515）

目的探討CXC族趨化因子受體4(CXCR4)和CC族趨化因子受體7(CCR7)在鼻咽癌(NPC)組織中的表達(dá)及其臨床意義。方法隨機(jī)選擇2012年1月至2013年10月本院NPC患者60例，取其鼻咽癌組織（病例組），選擇同期鼻咽部炎癥患者30例，取其鼻咽部組織(對照組)，采用免疫組織化學(xué)檢測兩組患者的CXCR4和CCR7表達(dá)情況。結(jié)果病例組CCR7和CXCR4的陽性表達(dá)分別為32例和27例，均高于對照組的6例和4例，其差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，Ⅲ期+Ⅳ期患者的CCR7和CXCR4陽性例數(shù)為22例和16例，高于Ⅰ期+Ⅱ期的10例和11例，其差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；M1期CCR7陽性例數(shù)為24例，高于M0期的8例，差異也具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者CCR7和CXCR4陽性例數(shù)分別為23例和24例，未轉(zhuǎn)移者9例和3例，其差異也具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論CCR7和CXCR4在鼻咽癌中的陽性表達(dá)率均明顯高于非鼻咽癌組織，且與鼻咽癌臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，CXCR4和CCR7在鼻咽癌的發(fā)生和發(fā)展中具有重要的意義。

鼻咽癌；CXC族趨化因子受體 4；C族趨化因子受體7

鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma，NPC)是嚴(yán)重威脅我國人民生命健康的惡性腫瘤之一。NPC分化程度低且鼻炎部淋巴組織豐富，70%的NPC患者確診時已經(jīng)發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，經(jīng)過放療后NPG患者五年生存率只有50%左右，導(dǎo)致患者死亡最主要的原因是NPC的侵襲和轉(zhuǎn)移[1]。國內(nèi)外研究表明，NPC的發(fā)生和發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移與某些趨化因子及其受體密切相關(guān)。CXC族趨化因子受體4(CXC chemokine receptor-4，CXCR4)和CC族趨化因子受體7(CC chemokine receptor-7，CCR7)在多種腫瘤組織中存在并過度表達(dá)，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移均密切相關(guān)[2]。本文旨在研究NPC患者的CXCR4和CCR7表達(dá)并其探討臨床意義，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料隨機(jī)選擇2012年1月至2013年10月間在本院住院治療的NPC患者60例(病例組)，均經(jīng)組織病理確診為NPC，所有患者均未進(jìn)行化療和放療等治療，排除其他器官腫瘤。病例組患者中男性38例，女性22例，年齡45～63歲，平均(53.2±7.5)歲。選擇同期在本院進(jìn)行手術(shù)治療的鼻咽部炎癥患者30例(對照組)，其中男性18例，女性12例，年齡42～64歲，平均(53.4±7.5)歲，兩組患者的年齡和性別比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 試劑與儀器鼠抗人單克隆抗體CCR7和CXCR4免疫組化試劑盒(北京中山公司)、DAB顯色試劑盒(武漢博士德公司)，CCR7和CXCR4一抗?jié)舛染鶠?：50，顯微鏡為日本OLIMPUS公司產(chǎn)品。

1.2.2 主要方法和指標(biāo)所有研究對象的鼻咽部組織標(biāo)本均采用免疫組化測定標(biāo)本中CCR7和CXCR4的表達(dá)。具體步驟：將鼻咽部組織標(biāo)本經(jīng)4%福爾馬林固定，石蠟包埋后進(jìn)行連續(xù)切片，應(yīng)用S-P免疫組化二步法，DAB顯色，脫水，透明和封片。顯微鏡下觀察CCR7和CXCR4的表達(dá)水平。按照免疫組化染色陽性腫瘤細(xì)胞比例和染色強(qiáng)度進(jìn)行評分，其中無陽性細(xì)胞為0分，＜10%為1分，10%～50%為2分，≥50%為3分，無著色為0分，輕度著色為1分，中度著色為2分，重度著色為3分，＜3分為陰性(-)，≥3分為陽性(+)。主要觀察不同患者組織CCR7和CXCR4表達(dá)，并將CCR7、CXCR4與年齡，病理分期以及肌層浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移臨床特征進(jìn)行相關(guān)性分析。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者鼻咽部組織的CCR7和CXCR4表達(dá)水平比較CCR7和CXCR4均在細(xì)胞內(nèi)為胞漿表達(dá)，光鏡下呈現(xiàn)黃色或褐色顆粒。顯微鏡下觀察，黃色或褐色顆粒的細(xì)胞數(shù)量多、顏色深為表達(dá)較強(qiáng)，見圖1、圖2。病例組CCR7和CXCR4的陽性表達(dá)分別為32例和27例，均高于對照組的6例和4例，其差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組患者的CCR7和CXCR4表達(dá)水平比較（例）

圖1 CXCR7在鼻咽癌中的表達(dá)(箭頭示)

圖2 CXCR4在鼻咽癌中的表達(dá)(箭頭示)

2.2 CCR7的表達(dá)與鼻咽癌的病例特征相關(guān)性Ⅲ期+Ⅳ期CCR7陽性例數(shù)為22例，高于Ⅰ期+Ⅱ期的10例，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；M1期CCR7陽性例數(shù)為24例，高于M0期的8例，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者CCR7陽性例數(shù)為23例，未轉(zhuǎn)移者的9例，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 CCR7的表達(dá)與鼻咽癌的病例特征相關(guān)性(例)

2.3 CXCR4的表達(dá)與鼻咽癌的病例特征相關(guān)性Ⅲ期+Ⅳ期CXCR4陽性例數(shù)為16例，高于Ⅰ期+Ⅱ期的11例，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者CXCR4陽性例數(shù)為24例，未轉(zhuǎn)移者3例，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

表3 CXCR4的表達(dá)與鼻咽癌的病例特征相關(guān)性

3 討論

NPC早期多不典型，確診時常常已經(jīng)發(fā)生淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移，放療和手術(shù)治療效果欠佳，患者5年生存率較低，腫瘤轉(zhuǎn)移受到一些趨化因子及受體的調(diào)控作用。趨化因子是一類分子量在8 000～10 000 kD的細(xì)胞因子，主要通過趨化因子受體介導(dǎo)而使細(xì)胞發(fā)生趨化運(yùn)動，發(fā)揮其生物學(xué)功能。趨化因子受體屬于G蛋白耦聯(lián)受體超家族，是表達(dá)在一些特定細(xì)胞表面的7跨膜域受體，其家族成員可分為CR、CCR、CXCR和CX3CR等4種類型，研究認(rèn)為其可以促進(jìn)腫瘤血管生成和腫瘤細(xì)胞增殖，并可導(dǎo)致腫瘤的浸潤和定向轉(zhuǎn)移，在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中具有重要的意義，其中CCR7、CXCR4兩種趨化因子是最常見的趨化因子[1-3]。

CCR7是CC類趨化因子受體的一種，國內(nèi)的研究顯示CCR7在胃癌和乳腺癌中均有不同程度的表達(dá)，并且與惡性腫瘤淋巴結(jié)的特異性轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。CXCR4是CXC類趨化因子的一種，CXCR4是一種高度保守的G蛋白耦聯(lián)的跨膜受體，分布最廣泛，存在于大多數(shù)類型的腫瘤細(xì)胞中[4-5]。本次調(diào)查結(jié)果顯示，病例組CCR7和CXCR4的陽性表達(dá)均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，提示CCR7和CXCR4在NPC患者組織中呈高表達(dá)，CCR7和CXCR4的增加使NPC的概率上升，NPC的發(fā)生與CCR7和CXCR4惡性程度密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，Ⅲ期+Ⅳ期CCR7陽性例數(shù)均高于Ⅰ期+Ⅱ期，M1期CCR7陽性例數(shù)高于M0期，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者CCR7陽性例數(shù)高于未轉(zhuǎn)移者，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；CXCR4與CCR7表達(dá)有相同的趨勢，說明CXCR4與CCR7與NPC臨床分期、M分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，這可能是因為CCR7因子與NPC周圍組織的CCL21因子結(jié)合從而導(dǎo)致局部發(fā)生Ca2+內(nèi)流，導(dǎo)致細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，腫瘤細(xì)胞內(nèi)肌動蛋白細(xì)胞骨架重新排布，從而促使腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)不同形狀的偽足，促使腫瘤細(xì)胞侵襲性增強(qiáng)，從而發(fā)生轉(zhuǎn)移和局部浸潤有關(guān)。CXCR4在機(jī)體內(nèi)具有促進(jìn)淋巴系統(tǒng)和造血系統(tǒng)成熟的功能，而腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移必須有新生血管供應(yīng)養(yǎng)分，因此NPC轉(zhuǎn)移過程中需要CXCR4促進(jìn)了腫瘤新生血管的形成從而為轉(zhuǎn)移瘤提供養(yǎng)分，與NPC轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[6-7]。

CXCR4與CCR7在臨床中有助于診斷NPC的發(fā)生，對于判斷其轉(zhuǎn)移和預(yù)后、指導(dǎo)術(shù)后治療具有重要意義，也可能是通過降低CXCR4與CCR7的表達(dá)，減緩NPC的生長和侵襲轉(zhuǎn)移而成為一個治療NPC新的靶點(diǎn)。

綜上所述，CCR7和CXCR4在鼻咽癌中的陽性表達(dá)率均明顯高于非鼻咽癌組織，且與鼻咽癌臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，CXCR4和CCR7在鼻咽癌縱發(fā)生和發(fā)展過程發(fā)揮了重要的作用，深入研究CxcR4、CCR7等趨化因子，不但可以對NPC診斷和分期提供參考依據(jù)，且可以為NPC的治療提供新靶點(diǎn)和新策略。

[1]Chee Ee Phua V,Loo WH,Yusof MM,et al.Treatment outcome for nasopharyngeal carcinoma in university malaya medical centre from 2004-2008[J].Asian Pac J Cancer Prev,2013,14(8):4567-4570.

[2]Hayashi E,Kuramitsu Y,Okada F,et a1.Proteomic profiling for cancel progression:differential display analysis for the expression of intracellular proteins between regressive and progressive cancer cell lines[J].Proteomics,2005,5(4):1024-1032．

[3]Wang RH,Zhang SX,Zhou LH,et al.Volume and dosimetric variations during two-phase adaptive intensity-modulated radiotherapy for locally advanced nasopharyngeal carcinoma[J].Biomed Mater Eng,2013,23(1):1269-1277.

[4]溫國明,郭悅青.趨化因子受體CCR7及CXCR4在胃癌中的表達(dá)[J].廣東醫(yī)學(xué),2006,27(7):968-970.

[5]王淑強(qiáng),張凡,李鵬.子宮頸癌中趨化因子CCR7、CCL21表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J].中國婦幼保健,2010,25(21):3019-3022.

[6]唐慧,張超,李琳,等.CXCR4和CCR7在Barrett's食管、食管腺癌和食管鱗癌中的表達(dá)及其臨床意義[J].世界華人消化雜志,2010,18(34):3632-3639.

[7]邱明遠(yuǎn),李健文,鄭民華.CXCR4和CXCR7在腫瘤中的研究進(jìn)展[J].中國癌癥雜志,2010,20(3):222-226.

Expressions and clinical significance of CXCR4 and CCR7 in nasopharyngeal carcinoma.

ZHENG Da-yong, DONG Shao-ting,CHEN Jin-zhang,LV Cheng-wei,HUANG Zhen-hua,HUANG Na,SHI Min.Department of Internal Medicine,Southern Medical University Southern Hospital,Guangzhou 510515,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo explore the expression of CXC chemokine receptor-4(CXCR4)and CC chemokine receptor-7(CCR7)in nasopharyngeal carcinoma(NPC)and its clinical significance.MethodsSixty patients with NPC admitted in our hospital from January 2012 to October 2013 were randomly selected for NPC tissue, which was assigned as the disease group.Another 30 cases with nasopharyngeal inflammation were selected as control group for normal nasopharyngeal tissue.CXCR4 and CCR7 in two groups were detected with expression by immunohistochemistry.ResultsThe positive expression cases of CCR7 and CXCR4 in the disease group were 32 cases and 27 cases respectively,which were higher than those in the control group with 6 cases and 4 cases,and there were statistically significant different(P＜0.05).The positive expression of CCR7 and CXCR4 inⅢstage andⅣstage were 22 cases and 16 cases,which were higher than those inⅠstage andⅡstage with 10 cases and 11 cases,and the difference has statistical significance(P＜0.05).The positive expression of CCR7 in M1stage was 24, which was higher than that in M0stage with 8 cases,and the difference was statistically significant(P＜0.05).The positive expression of CCR7 and CXCR4 in patients with lymph node metastasis were 23 cases and 24 cases,which were higher than in patients without metastasis with 9 and 3 cases,and the difference was statistically significant (P＜0.05).ConclusionThe positive expressions of CCR7 and CXCR4 in patients with NPC were significantly higher than those in non-carcinoma tissue.It is related with clinical stage and lymph node metastasis.CXCR4 and CCR7 play important roles in the occurrence and development of nasopharyngeal carcinoma.

Nasopharyngeal carcinoma;CXC chemokine receptor-4(CXCR4);CC chemokine receptor-7 (CCR7)

R739.63

A

1003—6350（2014）11—1567—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.11.0609

2013-12-16)

鄭大勇。E-mail：zhengdytg@163.com