厲 勇，楊 明，菲肖琨

（貴陽(yáng)市婦幼保健院輸血科，貴州貴陽(yáng)550003）

貴陽(yáng)地區(qū)新生兒G6PD酶篩查結(jié)果分析

厲 勇＊，楊 明，菲肖琨

（貴陽(yáng)市婦幼保健院輸血科，貴州貴陽(yáng)550003）

葡萄糖－6－磷酸脫氫酶缺乏癥（Glucose－6－Phosphate Dehydrogenase deficiency）是最常見(jiàn)的一種遺傳性酶缺乏病，俗稱蠶豆病。我國(guó)是本病的高發(fā)區(qū)之一，呈南高北低的分布特點(diǎn)，患病率為0.2%－44.8%。主要分布在長(zhǎng)江以南各省，以海南、廣東、廣西、云南、四川等省為高［1］。本文對(duì)近3年貴陽(yáng)市新生兒G6PD篩查結(jié)果進(jìn)行分析，探討新生兒G6PD缺乏發(fā)病情況和篩查意義，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 資料

對(duì)象為2010年3月至2012年10月在貴陽(yáng)市婦幼保健院分娩的活產(chǎn)新生兒，共11491例。家屬知情同意篩查。

1.2 篩查標(biāo)本的采集

出生72h內(nèi)的新生兒用采血針刺指尖采血后滴在S＆S903濾紙上，室溫自然風(fēng)干。

1.3 試劑

廣州米基科技發(fā)展有限公司G6PD熒光斑點(diǎn)定性試劑盒，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作。

1.4 篩查方法

采用熒光斑點(diǎn)定性法測(cè)G6PD活性。用正常標(biāo)本（已知G6PD正常）作陰性對(duì)照，可選用已知G6PD缺乏者的標(biāo)本作陽(yáng)性對(duì)照。用打孔器在標(biāo)本上制成3mm血斑紙片，加入100μl反應(yīng)液充混勻，取一小滴混合液滴于濾紙上（第一斑點(diǎn)）。將上液置于37℃孵育箱中10min，再取吸取5μl反應(yīng)液印滴于濾紙上（第二斑點(diǎn)），再將上液置于37℃孵育箱中到30min，再取吸取5μl反應(yīng)液印滴于濾紙（第三斑點(diǎn)）。晾干后，于長(zhǎng)波紫外燈下（365nm）觀察結(jié)果。

1.5 G6PD／6PGD比值法確診試驗(yàn)

凡初篩陽(yáng)性（G6PD缺乏）者均召回采集靜脈抗凝血，應(yīng)用改良G6PD定量比值法試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.6 結(jié)果判斷

1.6.1 檢測(cè)的第一斑點(diǎn)作為實(shí)驗(yàn)對(duì)照應(yīng)無(wú)熒光或弱熒光出現(xiàn)。30min時(shí)正常人第三斑點(diǎn)出現(xiàn)強(qiáng)熒光。G6PD缺乏雜合子出現(xiàn)弱熒光（第二斑點(diǎn)與第一斑點(diǎn)比較無(wú)明顯變化），G6PD嚴(yán)重缺乏者無(wú)熒光。

1.6.2 10min內(nèi)出現(xiàn)強(qiáng)熒光者表明G6PD活性正常，無(wú)熒光或弱熒光為篩查可疑陽(yáng)性；10－30min出現(xiàn)熒光為中度缺乏值；30min不出現(xiàn)熒光為重度或完全缺乏。

1.6.3 原標(biāo)本復(fù)查陽(yáng)性者召回嬰兒采靜脈血，進(jìn)行硝基四氮唑藍(lán)G6PD／6PGD比值法（NBT定量比值法）確診G6PD缺乏癥。結(jié)果判斷參考范圍：G6PD／6PGD≥1.1為G6PD正常；G6PD／6PGD在0.6－1.1為中度缺乏值；≤0.6為重度缺乏值。

2 結(jié)果

2.1 在11491例新生兒中共初篩出G6PD缺乏者139例，總發(fā)病率為1.21%。其中有5例，經(jīng)父母同意用高分辨率熔解曲線法檢測(cè)基因類型，進(jìn)行DNA測(cè)序，驗(yàn)證基因型是G6PD Canton（1376GT）和G6PD Kaiping（1388GA）這2中常見(jiàn)的基因類型。2.2 G6PD熒光斑點(diǎn)定性檢測(cè)11491例新生兒濾紙干血片共篩出G6PD缺乏者139例，其中G6PD輕中度缺乏（弱熒光）42例；G6PD重度缺乏（無(wú)熒光）97例；總發(fā)生率為1.21%（139／11491），見(jiàn)表1。

表1 11491例G6PD缺乏篩查表

2.3 貴陽(yáng)地區(qū)與其他城市新生兒G6PD缺乏癥的發(fā)病率比較，見(jiàn)表2。

表2 貴陽(yáng)地區(qū)G6PD缺乏癥的發(fā)病率與其他城市比較表

3 討論

3.1 G6PD缺乏癥發(fā)病機(jī)制

G6PD缺乏者，在一定情況下服用抗瘧藥、伯氨喹啉、磺胺藥、砜類藥等藥物或食用蠶豆后，代謝產(chǎn)生的自由基，或與氧合血紅蛋白作用形成的H2O2，使GSH氧化成GSSG。由于GSH降低，Hb的巰去GSH的保護(hù)，被氧化變性形成Heinz小體。紅細(xì)胞膜功能受損，導(dǎo)致溶血。G6PD缺乏癥溶血有5種表現(xiàn)：1蠶豆?。?新生兒高膽紅素血癥；3喹啉型藥物型貧血；4部分感染性溶血；5先天性非球形紅細(xì)胞性貧血。分娩過(guò)程中的窒息、宮內(nèi)宭迫使新生兒或胎兒缺氧，在此產(chǎn)生大量的氧自由基，G6PD缺乏的新生兒由于紅細(xì)胞NADPH生產(chǎn)量不足，不能維持正常的抗氧化損傷功能，致使紅細(xì)胞因過(guò)氧化損害而大量破壞，導(dǎo)致高膽紅素血癥，新生兒期可致核黃疸，造成智力低下。

3.2 關(guān)于G6PD發(fā)生率

G6PD缺乏癥是常見(jiàn)的遺傳性紅細(xì)胞酶病，是華南及西南各省常見(jiàn)的遺傳病之一，以海南、廣東、廣西、云南、四川等省為高。陳杰智等報(bào)道順德G6PD缺乏篩查陽(yáng)性率為10.58%［2］，孫玉紅等報(bào)道潮州地區(qū)陽(yáng)性率6.2%［3］，唐金華等報(bào)道防城港陽(yáng)性率5.8%［4］，李晨輝等報(bào)道湘潭陽(yáng)性率3.6［5］，李淑先等報(bào)道欽州陽(yáng)性率4.2%［6］。本文結(jié)果顯示貴陽(yáng)地區(qū)G6PD缺乏的檢出率為1.21%相對(duì)于其他城市較低，這可能與地理和環(huán)境因數(shù)有關(guān)。貴陽(yáng)地經(jīng)濟(jì)飛速發(fā)展，人口結(jié)構(gòu)年輕化，來(lái)自全國(guó)各地，跨省婚姻比例相對(duì)較高，這可能是造成新生兒G6PD缺乏率低于其他城市的部分原因。采用熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)篩查G6PD，是一種半定量的方法，具有較高的特異性和準(zhǔn)確性，具有經(jīng)濟(jì)、快速、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。召回確診采用改良G6PD／6PGD比值法，兩種方法結(jié)合，優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，提高篩查敏感性與診斷準(zhǔn)確性，避免發(fā)生漏診、誤診。

3.3 G6PD缺乏癥篩查的意義

G6PD缺乏癥在某些誘因下發(fā)病，發(fā)病的臨床表現(xiàn)溶血、黃疸、貧血、新生兒高膽紅素血癥等病癥。G6PD缺乏癥目前尚無(wú)根治方法，一旦發(fā)病，只能對(duì)癥治療。本病最重要的干預(yù)手段就是預(yù)防：患兒如果都可以避免接觸患病因素的話，終生可能不發(fā)病。因此，對(duì)新生兒進(jìn)行G6PD早期篩查和診斷，可積極預(yù)防因G6PD缺乏而引起的一系列疾病的發(fā)生，有效保護(hù)新生兒健康。另外我們對(duì)確診為G6PD缺乏的患者均發(fā)放G6PD缺乏攜帶卡，卡內(nèi)列出禁用及慎用的食物、藥物。對(duì)家長(zhǎng)進(jìn)行健康宣傳從而預(yù)防溶血性貧血的發(fā)生。

［1］江劍輝，李 蓓.廣州市125萬(wàn)新生兒葡萄糖6－磷酸脫氫酶缺乏癥篩查和防治［J］.廣東醫(yī)學(xué)，2009，09.

［2］陳杰智，梁麗明，岑雪明.新生兒G6PD缺乏癥篩查分析［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2013，11（17）：96.

［3］孫玉紅，蔡桂花，陳丹苗.潮州地區(qū)近五年G6PD缺乏癥篩查結(jié)果分析［J］.中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2013，21（4）：45.

［4］唐金華.某市新生兒G6PD檢測(cè)查結(jié)果分析［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2012，10（17）：224.

［5］李晨輝，吳命華，等.湘潭地區(qū)近五年新生兒G6PD缺乏癥篩查結(jié)果分析［J］.中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2012，20（6）：71.

［6］李淑先.新生兒臍血G6PD缺乏癥篩查結(jié)果分析［J］.中外婦兒健康，2011，19（2）：12.

2013－06－22）

1007－4287（2014）07－1171－02

＊通訊作者