何慶明
【摘要】食品微生物檢測技術(shù)的種類繁多,操作流程也各不相同,雖然各俱優(yōu)點,但也有許多需要完善與改進的地方。本文就針對常見的幾種食品微生物檢測技術(shù)的進展及研究進行論述,并分析食品微生物檢測技術(shù)的發(fā)展趨勢。
【關(guān)鍵詞】食品微生物;檢測技術(shù);進展研究
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(s).2014.01.689文章編號:1004-7484(2014)-01-0569-02
1前言
食品微生物是指與食品有關(guān)的微生物的統(tǒng)稱,包括有食源性病原微生物、生產(chǎn)型食品微生物、食物變質(zhì)。由于食品微生物對人身體健康的重要影響,采用先進的檢測技術(shù)對其進行準確、有效的檢測也顯得尤為重要。
2食品微生物檢測技術(shù)進展及研究
2.1分析化學檢測技術(shù)進展及研究近年來,在食品微生物檢測技術(shù)中,隨著應(yīng)用儀器與技術(shù)的不斷更新,分析化學檢測技術(shù)也朝著多元化的方向進行發(fā)展。分析化學檢測技術(shù)包括有氣相色譜·質(zhì)譜聯(lián)用檢測、高效液相色譜檢測、液相色譜·質(zhì)譜聯(lián)用檢測、氣相色譜檢測等。分析化學檢測技術(shù)主要是通過對食品微生物化學組成的分析來進行鑒定與區(qū)分。此種檢測技術(shù)的應(yīng)用,開辟了食品微生物檢測與鑒定的新途徑,對微生物檢測的準確性有著顯著的促進作用。
2.2PCR檢測技術(shù)的進展及研究PCR檢測是利用聚合酶鏈反應(yīng),將模板DNA、Taq酶、鎂離子、雙蒸水、緩沖液等混合物裝入PCR微型管內(nèi),并在可編程調(diào)控的PCR儀上來完成檢測。PCR檢測技術(shù)自從1985年發(fā)明以來,通過不斷地完善與改進,應(yīng)用于食品微生物檢測中時具有較高的敏感性與準確性。PCR檢測技術(shù)包括有免疫PCR、多重PCR、反轉(zhuǎn)錄PCR等,每種PCR檢測技術(shù)都可準確地檢測到相對應(yīng)的病菌與微生物,但其也主要是針對食品當中病原菌的特異性靶基因進行定位檢測,且PCR檢測技術(shù)還存在假陽性、定量困難等問題,還需進一步地完善[1]。
2.3核酸探針檢測技術(shù)的進展及研究核酸探針技術(shù)主要是利用同位素或者其他標記方法,對已知核苷酸的序列DNA片段進行標記,并將其加入已變異的DNA樣品當中,進而通過一定的條件作用達到食品微生物檢測的目的。核酸探針技術(shù)檢測食品微生物具有敏感性、特異性等優(yōu)勢,但其在檢測時需對檢測樣品進行一段時間的培養(yǎng),且檢測方法及過程比較復雜,并對毒素污染的不含產(chǎn)毒菌的食品無法進行準確檢測。
2.4免疫分析檢測技術(shù)的進展及研究免疫分析檢測技術(shù)包括酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)與免疫熒光技術(shù),酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)是將抗體或抗原吸附于固相載體上并進行免疫酶染色,待底物顯色后,再經(jīng)由定量或定性來分析有色產(chǎn)物量,進而得到微生物的檢測結(jié)果。此種檢測技術(shù)結(jié)合了放射免疫測定法與免疫熒光法兩者的優(yōu)勢,具有反應(yīng)靈敏、準確性高、可定量、適用范圍廣等優(yōu)點。近年來,隨著酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)的完善,對檢測食品中沙門氏菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌等檢測做出了卓越的貢獻。
而免疫熒光技術(shù)主要是通過在食品樣品上直接滴加已知特異性熒光標記的抗血清,并經(jīng)洗滌后在熒光顯微鏡下進行觀察,從而得出檢測結(jié)果;另外,也可采用間接法先于檢樣上滴加已知特異性熒光標記的抗血清,待其產(chǎn)生反應(yīng)后再進行洗滌,并加入熒光標記的抗體進行觀察。免疫熒光技術(shù)主要可用來檢測葡萄球菌毒素、李斯特菌、沙門氏菌等,其特異性強、敏感性高、檢測速度快,但也存在一些客觀性的不足,還有待進一步在研究與改進。
2.5生物傳感器檢測技術(shù)的進展及研究對食品微生物以生物傳感器檢測技術(shù)進行檢測時,其主要是將生物受體復合物(包括酶、核酸、抗體、多糖化合物等)與物理化學傳感器直接連接,并通過動態(tài)、實時觀察特異性生物,來分析其微生物的種類。生物傳感器檢測技術(shù)包括有免疫傳感器、酶傳感器、DNA雜交傳感器、微生物傳感器等,雖然其在食品微生物檢測領(lǐng)域中的應(yīng)用比較廣泛,但其敏感性還存在一定程度的欠缺,具體的發(fā)展與完善有待進一步研究。
2.6放射測量檢測技術(shù)的進展及研究放射測量技術(shù)作為化學與物理相結(jié)合的一種微生物檢測技術(shù),主要是對培養(yǎng)基內(nèi)的微生物進行檢測。放射測量法的檢測原理比較簡單,其檢測方法類似于碳元素追蹤法,通過利用培養(yǎng)基內(nèi)細菌生長、繁殖的過程,來確定樣品中微生物存在與種類。放射測量檢測技術(shù)具有簡單、準確、快速、自動化等諸多優(yōu)勢,其也被廣泛應(yīng)用于食品微生物中大腸埃希菌的定量檢測當中[2]。
2.7電阻抗檢測技術(shù)的進展及研究電阻抗檢測技術(shù)的檢測原理為,培養(yǎng)基中微生物在不斷生長過程中,可將其電惰性底物代謝成為活性底物,進而使得培養(yǎng)基中電導性增大,且培養(yǎng)物的阻抗降低。另外,培養(yǎng)基中微生物在生長過程中可產(chǎn)生一種特征性阻抗曲線,可依據(jù)電阻改變的圖形對檢測細菌進行鑒定。電阻抗檢測技術(shù)具有反應(yīng)速度快、重復性好、敏感性與特異性強等優(yōu)點,在食品微生物檢測中的應(yīng)用也比較廣泛。
3食品微生物檢測技術(shù)的發(fā)展趨勢
基于食品微生物檢測技術(shù)中目前存在的不足之處,其發(fā)展趨勢必將朝著以下幾點進行:
①標準化與國產(chǎn)化。從我國目前對食品微生物的檢測情況來看,大多數(shù)檢測都是采用國外的快速檢測法,這也造成了檢測成本高,缺乏國家相應(yīng)的標準等缺點。因此,大力在引進并融合國外的先進技術(shù),研究出符合我國檢測產(chǎn)品標準的檢測技術(shù),同時還需加大力度建立國家標準與規(guī)范。②提高質(zhì)量與準確性。應(yīng)用新工藝、高科技,提高與實驗相關(guān)產(chǎn)品的質(zhì)量,并優(yōu)化設(shè)計特殊培養(yǎng)基,進而提高檢測技術(shù)的靈敏度與特異性。③充分發(fā)揮各檢測技術(shù)的優(yōu)勢。在進行食品微生物檢測時,必須熟知各種檢測技術(shù)的優(yōu)缺點,有效地做到揚長避短,從而使其檢測技術(shù)能夠最大程度地發(fā)揮自己的優(yōu)勢[3]。
4結(jié)束語
隨著科技的快速發(fā)展,相信在不久的將來,各種存在缺點的食品微生物檢測技術(shù)將會被新型、先進、簡便的微生物快速檢測技術(shù)所替代。通過對檢測技術(shù)與標準的不斷完善與規(guī)范,使其能為人類的公共衛(wèi)生、疾病預(yù)防、飲食健康等方面做出巨大的貢獻。
參考文獻
[1]王云國,李懷燕.食品微生物檢驗內(nèi)容及檢測技術(shù)[J].糧油食品科技,2010,3(3):40-43.
[2]姜亞宏.淺談食品微生物實驗室檢測的質(zhì)量控制[J].健康必讀,2012,10(10):304-305.
[3]王玲娜.食品微生物快速檢測技術(shù)應(yīng)用分析[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù),2012,9(9):5-7.