裘珍飛等

摘 要 為促進(jìn)沉香無性繁殖進(jìn)程，以沉香成年優(yōu)樹萌條為接穗，2年生土沉香實生苗為砧木進(jìn)行嫁接試驗。結(jié)果表明：不同優(yōu)樹穗條嫁接成活率呈極顯著差異。接穗直徑與嫁接成活率密切相關(guān)，選擇直徑在0.6～0.8 cm的接穗，嫁接成活率可達(dá)80%以上。接穗和砧木直徑差值也影響嫁接成活率，差值在（0±0.09） cm時，嫁接成活率最高為84.9%，而差值大于0.4 cm時，成活率下降到50%以下。砧木接口直徑在0.4～1.0 cm時，對嫁接成活率影響不大。

關(guān)鍵詞 沉香；嫁接；接穗直徑；砧木直徑

中圖分類號 R291.2 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A

Abstract An asexual propagation study of Aquilaria spp. grafting was carried out using stump sprouts of mature plus tree as scions and A. sinensis（Lour.）Spreng on 2-year seedlings as rootstocks. The results showed that the survival rate was of highly significant difference between different plus tree cuttings. The scions diameter was correlated with grafting survival rate，and the survival rate was up to 80% as the thickness of scions was in the range of 0.6～0.8 cm. The diameter difference between rootstocks and scions also affected grafting survival rate，and the highest survival rate was 84.9% as the difference value was in the range of （0±0.09） cm and the survival rate was low to 50% as the difference value was more than 0.4 cm. The grafting survival rate was not affected with the thickness of rootstocks O/ （0.4-1.0 cm）.

Key words Aquilaria spp.； Grafting； Scions diameter； Rootstocks diameter

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2014.07.002

沉香（Aquilaria spp.）是瑞香科多年生常綠闊葉樹種，是中國生產(chǎn)中藥沉香的唯一植物資源。中國特有的土沉香[Aquilaria sinensis（Lour.）Spreng]野生資源已遭到嚴(yán)重破壞，現(xiàn)僅有零星散生的殘存植株，1999年已被國家列入二級野生保護(hù)植物。沉香又是一種珍貴的高級香料，上等沉香國際成交價每公斤高達(dá)上萬美元[1]。本世紀(jì)來林業(yè)生產(chǎn)者紛紛建立起大規(guī)模的沉香生產(chǎn)種植基地和繁育基地[2]。

目前我國南方地區(qū)種植的沉香品種主要是土沉香和奇楠沉香（A. crassna Pierre.）2種。土沉香主要分布于海南、廣東、廣西、福建、云南、臺灣等地。奇楠沉香天然分布于越南、泰國、馬來西亞、印度等國的熱帶森林里，我國云南西雙版納于20世紀(jì)90年代引種，經(jīng)過試驗試種，生長良好，5～6 a的奇楠沉香樹高達(dá)5 m，人工誘導(dǎo)結(jié)香也已獲成功[3]。奇楠沉香和土沉香形態(tài)相近，主要區(qū)別在于：土沉香蒴果質(zhì)地較薄，末端具尖頭，而奇楠沉香蒴果質(zhì)地較厚，末端較圓，土沉香枝條分枝角度比奇楠沉香大，相對樹冠也較大[4]。沉香樹種子結(jié)實量大，批量生產(chǎn)種苗不是問題，但由于種子來源混雜不清，沉香種植者對沉香樹的生長、結(jié)香數(shù)量和沉香品質(zhì)缺乏預(yù)見性，因此盡快選育優(yōu)良無性系并實現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)已迫在眉睫。

沉香無性繁殖中對組織培養(yǎng)、扦插研究較多，但難生根是沉香組織培養(yǎng)和扦插繁殖碰到的普遍難題。組織培養(yǎng)通過常規(guī)直接誘導(dǎo)無法生根，間接誘導(dǎo)法可以實現(xiàn)生根，生根率最高為86%[5]。間接法誘導(dǎo)生根大大提高了組培苗的成本，而且不同繁殖材料生根能力不同。扦插通過外源生長激素的調(diào)節(jié)，生根率為40%～50%，生根時間長[6]。對難生根的樹種，嫁接是無性繁殖的主要途徑。目前國內(nèi)沉香嫁接技術(shù)研究不多，只有牛煥群[7]開展少量試驗，成活率最高為52%。通過選優(yōu)嫁接，一方面收集和保護(hù)了優(yōu)良種質(zhì)資源，同時可以培育大量優(yōu)質(zhì)無性系苗木，解決市場良種供應(yīng)。本研究通過嫁接試驗培育了24個優(yōu)良沉香無性系，為進(jìn)一步高效擴(kuò)繁、促進(jìn)優(yōu)良無性系的推廣應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗地概況 試驗地位于廣東省廣州市天河區(qū)廣汕一路682號熱帶林業(yè)研究所苗圃地，屬南亞熱帶季風(fēng)氣候，年均溫21.4～21.9 ℃，最低月均溫1月為13.6 ℃，最高為7月的28.6 ℃，年降雨量平均為1 623.6～1 899.8 mm。

1.1.2 試驗材料 接穗培養(yǎng)：沉香山位于廣東省茂名市電白縣觀珠鎮(zhèn)內(nèi)，總面積400 hm2，瑞香科植物是區(qū)內(nèi)的主要藥用植物，其生長面積占區(qū)內(nèi)面積的60%以上[8]。沉香山人工種植的沉香主要是土沉香，種苗來自我國海南、廣東、廣西、云南和本地等多個地區(qū)，樹齡8～11 a。2012年3月，在沉香山沉香人工林中，選擇優(yōu)良單株，對優(yōu)良單株進(jìn)行編號。2012年6月對優(yōu)良單株進(jìn)行截枝、促萌處理，并定期觀察萌條生長狀況，對長出的萌條實行防蟲、疏密等管理，確保萌條的健康生長。

接穗采集和貯存：在2013年2月，連晴5 d后，采集優(yōu)樹半木質(zhì)化的萌條，邊采集，邊剪葉，編號后裝入保鮮密實袋中。保鮮密實袋外敷冰塊，裝入保鮮箱中進(jìn)行長距離運輸。到達(dá)目的地后把裝有穗條的保鮮密實袋保存在冰箱冷藏室中，以備第2、第3天嫁接之用。

砧木培養(yǎng)：2012年6月，選取1年生土沉香實生袋苗，苗高25～35 cm，以20 cm×20 cm株行距定植在苗床上，并實行精細(xì)的苗圃管理。2013年2月嫁接時，苗高為40～50 cm，地莖粗0.4～1.0 cm。

1.2 方法

1.2.1 試驗設(shè)計 采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計，3次重復(fù)。嫁接方法采用切接法，嫁接時，把穗條剪成6～10 cm長的枝段，每段帶2個腋芽，先用切接刀在接穗的基部削出大小不同的二個對稱斜面，一面長約2 cm，另一面長約1 cm，削面平滑，與此同時，將砧木從距地30 cm處剪斷截去頂部，再按照接穗的粗度，在砧木截面的偏北一側(cè)向下垂直切開一條裂縫，深2.5 cm左右，后將接穗的長削面朝里，插入砧木的切口內(nèi)，并將兩側(cè)形成層對齊，最后用塑料條帶將接口及接穗封口、綁緊。

1.2.2 不同優(yōu)樹嫁接對比試驗 采集24株優(yōu)樹穗條，根據(jù)各單株穗條狀況，每處理嫁接20～40株，共705株。嫁接后80 d調(diào)查嫁接成活率。成活率以接穗長出綠芽計為嫁接成活，接穗變黑或接穗鮮活，但未萌發(fā)綠芽為嫁接未成活。成活率=嫁接成活株數(shù)/嫁接株數(shù)×100%。

1.2.3 接穗直徑對嫁接成活率的影響 采集優(yōu)樹穗條，用游標(biāo)卡尺測量接穗的直徑，按直徑大小分為6個徑級，分別為0.2～0.29 cm、0.3～0.39 cm、0.4～0.49 cm、0.5～0.59 cm、0.6～0.69 cm、0.7～0.79 cm，根據(jù)各徑級穗條數(shù)量，每處理嫁接30～50株。共261株。嫁接后80 d調(diào)查成活率、接穗發(fā)芽數(shù)和新梢長度。接穗發(fā)芽數(shù)為萌發(fā)芽的節(jié)間個數(shù)，同一節(jié)間萌發(fā)多個芽計為1個芽。新梢長度為接穗萌芽處到主梢頂芽長度，同一接穗萌發(fā)1個芽，測量主梢長度，萌發(fā)2個芽，新梢長度為2個主梢長度之和。

1.2.4 砧木直徑對嫁接成活率的影響 用游標(biāo)卡尺測量砧木直徑，測量部位為剪口下2 cm，按直徑大小分為7個徑級，分別為0.2～0.49 cm、0.5～0.59 cm、0.6～0.69 cm、0.7～0.79 cm、0.8～0.89 cm、0.9～0.99 cm、1.0～1.2 cm，根據(jù)各徑級砧木的數(shù)量，每處理嫁接30～50株，共307株。嫁接后80 d調(diào)查成活率、接穗發(fā)芽數(shù)和新梢長度。

1.2.5 砧木、接穗直徑差值對嫁接成活率的影響

用游標(biāo)卡尺測量砧木、接穗直徑，計算其差值，按差值大小分為6個等級，分別為（0±0.09） cm（0.1～0.19） cm（0.2～0.29） cm（0.3～0.39） cm（0.4～0.49） cm>0.5 cm，根據(jù)各差值等級的數(shù)量，每處理嫁接30～50株，共283株。嫁接后80 d調(diào)查成活率、接穗發(fā)芽數(shù)和新梢長度。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用Excel和SPSS 11.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同優(yōu)樹對成活率的影響

單因子方差分析及多重比較表明（表1），24株沉香優(yōu)樹接穗嫁接成活率存在極顯著差異。嫁接成活率最高的為32、50、52號優(yōu)樹，成活率達(dá)80%以上，占總嫁接優(yōu)樹的12.5%。成活率最低的為3號優(yōu)樹，僅為21.8%，占總嫁接優(yōu)樹的4.2%。成活率在48.5%～56.7%的優(yōu)樹有10株，占總嫁接數(shù)的41.7%。本次試驗嫁接的平均成活率為56.8%。說明采集沉香成年優(yōu)樹嫁接，成活率穩(wěn)定在50%左右，少部分能達(dá)到80%，而個別單株低于30%。

2.2 接穗直徑對嫁接成活率的影響

方差分析及多重比較表明（表2）：接穗直徑對嫁接成活率和新梢生長有極顯著的影響，而對接穗發(fā)芽數(shù)影響不顯著。隨著接穗徑級0.2～0.8 cm的提高，嫁接成活率和接穗新梢高生長逐漸提高，徑級大于0.6 cm的接穗嫁接成活率和新芽高生長達(dá)到最高。通過曲線估計分析，接穗直徑分級與嫁接成活率相關(guān)密切，相關(guān)方程以3項式方程擬合度最高，擬合曲線方程為y=-1.851 9x3-158.93x2+291.63x-38.005（圖1），相關(guān)系數(shù)R2=0.975。

2.3 砧木直徑對嫁接成活率的影響

方差分析及多重比較表明（表3）：不同砧木徑級對嫁接成活率、接穗發(fā)芽數(shù)和新梢生長量沒有顯著影響，相關(guān)性分析顯示砧木直徑和成活率呈弱相關(guān)，相關(guān)系數(shù)R2=0.819 4，相關(guān)方差式為y=-38.89x3+949.76x2+629.19x+181.42（圖2）。

2.4 砧木和接穗直徑差值對嫁接成活率的影響

方差分析及多重比較表明（表4）：砧木和接穗直徑差值對嫁接成活率和新梢生長量產(chǎn)生顯著的影響，而對接穗發(fā)芽數(shù)影響不顯著。砧木和接穗直徑差值越小，嫁接成活率越高，隨著直徑差值的增大，嫁接成活率逐漸減小，當(dāng)直徑相差在0.4 cm以上時，嫁接成活率下降到50%以下。接穗新梢生長以直徑差值小于0.2 cm為好，當(dāng)直徑相差在0.4 cm以上時，新梢生長量明顯減小。曲線估計分析表明：砧木和接穗直徑差值與嫁接成活率相關(guān)密切，相關(guān)系數(shù)R2=0.989 6，曲線方差式為y=-87.963x3+166.87x2-139.5x+84.66（圖3）。

3 討論與結(jié)論

不同優(yōu)樹間嫁接成活率的差異首先可能是遺傳的原因。本次試驗中，由于采穗母株為沉香山普選的優(yōu)良單株，種苗來源于我國海南、廣東、廣西、云南和本地等多個地區(qū)，具有豐富的遺傳基因資源。沉香遺傳多樣性研究表明：沉香不同居群間和居群內(nèi)表型差異極顯著，葉長、葉寬和葉柄長等變異大[9]。葉型變化的差異在采穗母株中得到體現(xiàn)，這種遺傳多樣性導(dǎo)致的不同優(yōu)樹嫁接成活率的差異有利于選育嫁接成活率高的穗條。如本試驗32、50、52號優(yōu)樹，成活率達(dá)80%以上。其次是接穗和砧木親和力。一般情況下，親緣關(guān)系越近，具有相似的遺傳特性的砧穗組合，親和力較強(qiáng)，但實際生產(chǎn)上也取得很多遠(yuǎn)緣嫁接的成功，如蘋果[10]、柳/楊[11]、李/杏[12]等。因此砧、穗是否親和需要通過不同砧穗的組合試驗確定，有些樹種還需要通過長期栽培才能評價[13]。本試驗開展了相同的砧木，不同接穗嫁接組合，以后還應(yīng)開展相同接穗，不同砧木的試驗，以篩選出嫁接成活率高的砧穗組合。

砧、穗生長狀況的差異也是導(dǎo)致嫁接成活率差異的重要原因之一。砧木一般在苗圃定植，生長狀況容易控制，而穗條當(dāng)來自野生資源或多年生人工林時，生長狀況難以控制，牛煥群采集野生穗條時因為穗條質(zhì)量和數(shù)量得不到保證而導(dǎo)致嫁接成活率低下[5]。本試驗對優(yōu)樹進(jìn)行了截枝促萌，對穗條進(jìn)行有目的培養(yǎng)，因此保證了嫁接的成活率。但由于優(yōu)樹的生長狀況和萌芽能力的差異，也影響了穗條生長的差異，試驗中嫁接成活率最差的3號優(yōu)樹，也是萌芽力最差，獲得有效穗條最少的優(yōu)樹。

砧、穗粗度是嫁接工作者關(guān)心的問題。很多樹種研究表明，砧木粗度對嫁接成活率有顯著影響。凹葉厚樸嫁接以砧木粗度為1 cm以上嫁接成活率最高[14]，西南樺以砧木直徑大于0.5 cm較為適宜[15]。本研究沉香嫁接砧木直徑對成活率影響不顯著，可能是砧木定植于苗圃，肥水管理比較好的原因。接穗粗度對嫁接成活率影響的研究表明，凹葉厚樸以0.8～1 cm穗條直徑嫁接成活率最高，大于1.2 cm成活率下降[14]。沉香嫁接以直徑0.6～0.8 cm為好，由于沉香1年生萌條直徑很少超過0.8 cm，因此采集穗條時盡可能選擇粗的穗條嫁接。砧木和接穗的直徑大小雖然可以通過切削砧木和接穗的切面來控制，但砧木與接穗直徑大小一致仍然是最好的選擇，可以使形成層最大限度對準(zhǔn)，提高嫁接成活率。

參考文獻(xiàn)

[1] 田耀華， 原慧芳， 倪書邦， 等. 沉香屬植物研究進(jìn)展[J]. 熱帶亞熱帶植物學(xué)報， 2009， 17（1）： 98-104.

[2] 胡循鋒. 花山種植名貴樹種帶來新希望[J]. 廣西林業(yè)， 2012， （1）21.

[3] 鄒壽青. 奇南沉香及其育苗栽培技術(shù)[J]. 林業(yè)實用技術(shù)， 2008， （1）： 53.

[4] 徐大平， 丘佐旺. 南方主要珍貴樹種[M]. 廣東： 科技出版社， 2013： 14.

[5] 徐強(qiáng)興， 吳妃華， 周立賴. 土沉香的組培快繁技術(shù)研究[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2006， （8）： 44-46.

[6] 張玉臣， 周再知， 梁坤南， 等. 不同植物生長調(diào)節(jié)劑對白木香扦插生根的影響[J]. 林業(yè)科學(xué)研究， 2010， 23（2）： 278-282.

[7] 牛煥瓊， 魯學(xué)祥， 王亞麗， 等. 土沉香無性繁殖試驗初報[J]. 林業(yè)調(diào)查規(guī)劃， 2010， 35（6）： 119-123.

[8] 全珊珊， 陳振夏， 汪科元， 等. 沉香山藥用植物資源初步調(diào)查[J]. 廣東林業(yè)科技， 2011， 27（5）： 44-49.

[9] 趙 翾， 趙樹進(jìn). 白木香群體的表型多樣性分析[J]. 華南理工大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）， 2007， 35（4）： 117-122.

[10] 李曉林， 劉素君.蘋果屬植物嫁接后的表現(xiàn)與親緣關(guān)系初探[J]. 四川果樹， 1997， 25（2）： 5-7.

[11] 李保印， 劉用生， 周秀梅， 等， 柳屬與楊屬植物遠(yuǎn)緣嫁接研究[J]. 生物學(xué)通報， 2004， 39（10）： 19

[12] 范盛堯. 接穗郁李影響杏砧變異的實驗[J]. 遺傳， 1992， 21（4）： 43-44

[13] S Bueno S C， Tokunaga T， Berti A J. Grafting compatibility among eleven chestnut cultivars and hybrids[J]. Int'1 Chestnut Symp， 2009， （4）： 127-131.

[14] 李永欣， 王曉明， 曾慧杰， 等. 凹葉厚樸優(yōu)良無性系的嫁接技術(shù)研究[J]. 中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報， 2012， 32（2）： 31-34.

[15] 趙志剛， 曾 杰， 郭麗云， 等. 西南樺嫁接試驗[J]. 林業(yè)科技， 2006， 31（1）： 18-20.