文│張志宏 王貴 滿都拉 胡斌(內(nèi)蒙古自治區(qū)通遼市家畜繁育指導(dǎo)站)
胚胎移植技術(shù)作為現(xiàn)代生物繁殖技術(shù),在肉用種羊生產(chǎn)中得到較好應(yīng)用,但各地區(qū)應(yīng)用效果差異較大,需要不斷總結(jié)學(xué)習(xí),完善提高。其影響因素有同期發(fā)情技術(shù)、超數(shù)排卵技術(shù)、移植操作技術(shù)、環(huán)境、飼養(yǎng)管理、品種、年齡等。內(nèi)蒙古通遼地區(qū)近幾年開始嘗試利用胚胎移植技術(shù)生產(chǎn)肉用種羊,2013年10月進行了德國美利奴、薩福克、杜泊3個品種98只供體羊胚胎移植。將本次同期發(fā)情、超數(shù)排卵處理方法及效果和移植妊娠率進行了詳細記錄和統(tǒng)計分析,為進一步提高胚胎移植效果提供依據(jù)。
1.同期發(fā)情與超數(shù)排卵。
(1)供體羊的同期發(fā)情和超數(shù)排卵。采取陰道內(nèi)放置CIDR海綿栓法。供體羊的超數(shù)排卵采用FSH(促卵泡素)遞減注射,并配合注射PMSG(孕馬血清促性腺激素)。具體方法如下:在放栓第10天開始連續(xù)注射FSH5~6次,每次間隔12小時,每2次遞減5IU。第1次注射FSH的同時注射PMSG。第5次注射FSH的同時撤栓,肌肉注射PG(氯前列烯醇)。12小時后即第6次注射FSH之前,對供體母羊進行試情,對發(fā)情的供體羊頸靜脈注射LH(黃體生成激素);沒有發(fā)情的供體羊進行第6次注射FSH,12小時后試情,發(fā)情的供體羊頸靜脈注射LH。準確記錄發(fā)情時間,一般2次試情即可全部發(fā)情。藥物用量見表1。
(2)受體羊的同期發(fā)情。與供體羊同時處理,同樣采取陰道內(nèi)放置CIDR海綿栓法。具體方法如下:在放栓第10天肌注PMSG,過36小時取栓,同時注射PG,每間隔12小時試情1次。一般2次試情即可全部發(fā)情。根據(jù)試情結(jié)果即發(fā)情時間不同進行編號,與供體羊進行匹配。
表1 同期發(fā)情和超數(shù)排卵所用激素使用劑量
表2 2013年同期發(fā)情和超數(shù)排卵用藥一覽表
同期發(fā)情所用藥物因廠家、批次不同,效果不一樣。2013年同期發(fā)情和超數(shù)排卵藥品來源見表2。
2.供體羊人工授精。采用手術(shù)子宮角輸精方法。對試情發(fā)情的供體母羊,12小時后人工授精。
3.胚胎采集、檢驗。供體羊人工授精48小時后,采用手術(shù)輸卵管沖胚,進行胚胎沖洗、檢驗。沖胚液為新西蘭進口。
4.受體羊的確定。受體羊同期發(fā)情處理后,有明顯發(fā)情反應(yīng),手術(shù)觀察正常排卵并形成功能黃體為合格移植受體。
5.移植。采用手術(shù)輸卵管移植法。從供體采集的胚胎,經(jīng)檢驗合格,馬上移植到與供體同期發(fā)情相匹配的受體母羊輸卵管。
同期發(fā)情觀察采用試情法。妊娠觀察,受體母羊移植后2個情期不發(fā)情為妊娠。
1.同期發(fā)情。供體同期發(fā)情率見表3。由表3可知,3個品種同期發(fā)情率均達到90%以上。經(jīng)顯著性T檢驗,差異不顯著(P>0.05)。(注:統(tǒng)計用SAS軟件)
2.超數(shù)排卵。超數(shù)排卵數(shù)見表4。3個品種超數(shù)排卵可用胚胎平均數(shù)分別為:薩福克6.2枚;杜泊8.4枚;德國美利奴9.3枚。經(jīng)顯著性T檢驗,3個品種頭均沖胚數(shù)、可用胚胎數(shù)差異不顯著(P>0.05)。
3.妊娠率。妊娠率見表5。3個品種妊娠率在60%以上。經(jīng)顯著性T檢驗,3個品種妊娠率差異不顯著(P>0.05)。
1.同期發(fā)情與超數(shù)排卵。同期發(fā)情與超數(shù)排卵是胚胎移植的關(guān)鍵技術(shù),同期發(fā)情質(zhì)量影響供體、受體生理狀態(tài)一致性;超數(shù)排卵技術(shù)影響胚胎數(shù)量和質(zhì)量。此次胚胎移植同期發(fā)情率90%以上,供體和受體同步差在10小時內(nèi),說明同期發(fā)情與超數(shù)排卵處理方法可行。
2.不同品種超數(shù)排卵可用胚胎數(shù)。3個品種超數(shù)排卵可用胚胎平均數(shù)差異不顯著。但是德國美利奴、杜泊平均可用胚胎數(shù)高于薩??耍聡览罡?。說明德國美利奴、杜泊在通遼地區(qū)有較高的胚胎移植價值。
3.妊娠率。3個品種妊娠率均在60%以上,與國內(nèi)平均水平接近。說明此次供體、受體體況較好;同期發(fā)情羊處理適當;移植操作技術(shù)趨于成熟。
4.關(guān)于超數(shù)排卵藥物用量。超數(shù)排卵FSH(促卵泡素)用量決定超數(shù)排卵效果。此次遵循的原則是:一是體重增加,F(xiàn)SH用量增加。二是初產(chǎn)母羊比經(jīng)產(chǎn)母羊?qū)SH敏感,用量稍減。此次超排,對于初產(chǎn)的母羊,基本用145~155IU,用量可能偏低,導(dǎo)致青年母羊超數(shù)排卵數(shù)量較小,適當加量可能會提高一些。
一是供體羊超數(shù)排卵用藥量嚴格按體重分組,再根據(jù)經(jīng)產(chǎn)、初產(chǎn)和超數(shù)排卵史做適量調(diào)整。二是做好供體羊體重和超數(shù)排卵用藥量詳細記錄,這是下次超數(shù)排卵用藥量的最好參考。三是預(yù)防輸卵管堵塞。手術(shù)操作手法要輕柔、熟練,減少對輸卵管的損傷,同時做好消炎,防止輸卵管堵塞,保證母羊正常繁殖年限。
表3 供體羊同期發(fā)情率
表4 超數(shù)排卵數(shù)統(tǒng)計
表5 三個品種移植妊娠率統(tǒng)計